tBHQ对无机砷诱导HaCaT细胞凋亡中的保护作用

摘要

目的观察tBHQ对内源性线粒体凋亡通路和凋亡相关蛋白Bcl-2等蛋白表达的影响,探讨tBHQ在无机砷诱导HaCaT细胞凋亡过程中的作用。方法采用分光光度法检测Caspase-3蛋白活力;Western blot法分析细胞内Caspase-3、CytC、Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果 NaAsO2单独作用于HaCaT细胞24 h,线粒体中Cyt C蛋白表达降低,而胞浆中Cyt C蛋白表达则随染砷剂量的增加而明显升高。tBHQ预处理12 h后再分别暴露于NaAsO2,线粒体中CytC蛋白表达明显恢复,胞浆中CytC蛋白表达则随tBHQ剂量的增加而明显回落。此外,NaAsO2单独作用于HaCaT细胞24 h,Procaspase-3蛋白表达降低,而Caspase-3活化程度均显著高于对照组(P<0.01),tBHQ预处理12 h后再暴露于NaAsO2,Procaspase-3蛋白表达均明显高于相同浓度砷单独作用组,而且Caspase-3酶活力得到明显抑制,差异均具有统计学意义(P<0.05)。NaAsO2单独作用于HaCaT细胞24 h,与对照组相比Bcl-2蛋白表达降低,而Bax蛋白表达明显升高。tBHQ预处理12 h后再分别暴露于NaAsO2,Bcl-2蛋白表达明显恢复,而Bax蛋白表达则随tBHQ剂量的增加而减少。结论 tBHQ能够影响线粒体凋亡途径拮抗NaAsO2诱导的人皮肤角质细胞凋亡;tBHQ能够诱导调控凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax从而发挥抗凋亡作用。