三氯乙烯对Jurkat T细胞免疫毒性作用

摘要

目的研究三氯乙烯（TCE）对Jurkat T细胞免疫毒性,探讨TCE对Jurkat T细胞的最大无作用剂量。方法 ①分别以不同浓度的TCE（0.10、0.50、1.00、2.00、5.00、10.00 mmol/L）作用于初始和活化Jurkat T细胞（以佛波酯和离子霉素进行活化处理）,并设TCE浓度为0.00 mmol/L的对照组和二甲基亚砜（DMSO）组（溶剂对照组）,在培养24、48、72 h后,光学显微镜下观察Jurkat T细胞形态,以CCK-8法检测Jurkat T细胞存活率。②分别采用不同剂量的TCE（0.00、0.02、0.20、2.00 mmol/L）作用于初始和活化Jurkat T细胞,分别在培养24、48、72 h后,以流式细胞术检测细胞凋亡情况,以酶联免疫吸附实验检测细胞培养上清中白细胞介素-2（IL-2）水平。结果 ①染毒24 h后,10.00 mmol/L TCE染毒组可见明显细胞毒性,表现为细胞分散、体积变小、胞膜破裂、胞质浓缩、胞质内容物外溢逐渐增多。细胞存活率在染毒剂量与染毒时间的交互效应上有统计学意义（P〈0.01）,其中,在3个时间点,与同时间点对照组和DMSO组比较,0.10、0.50、1.00和2.00 mmol/L TCE染毒组细胞存活率均无出现有统计学意义的下降（P〉0.05）,5.00和10.00 mmol/L TCE染毒组细胞存活率均下降（P〈0.01）。②以0.00~2.00mmol/L TCE染毒时,细胞凋亡率在染毒剂量主效应上以及其与细胞类型、染毒时间的交互效应上均无统计学意义（P〉0.05）。活化Jurkat T细胞IL-2水平均高于同时间点同组初始Jurkat T细胞（P〈0.01）;在3个时间点,活化Jurkat T细胞IL-2水平均随TCE染毒剂量增加而增加,呈剂量-效应关系（P〈0.01）;活化Jurkat T细胞IL-2水平随TCE染毒时间增加而增加,呈时间-效应关系（P〈0.01）。结论本研究条件下,TCE对Jurkat T细胞的最大无作用剂量为2.00 mmol/L。高剂量TCE（≥5.00 mmol/L）可对初始和活化Jurkat T细胞造成细胞毒性损伤;低剂量TCE（≤2.00 mmol/L）可刺激活化Jurkat T细胞IL-2分泌增高,并呈剂量-效应关系和时间-效应关系。