溶剂特性对三臂星型类弹性蛋白多肽相变温度的影响

摘要

本文利用Spy Tag/Spy Catcher特性构建了三臂星型结构的类弹性蛋白多肽（elastin-like polypeptides,ELPs）,考察其在不同溶剂,如分子拥挤试剂、osmolytes及深共熔溶剂（deep eutectic solvents,DESs）中的相变温度及行为,并与含有相同ELPs重复数的线性ELPs120作对比。结果表明：在不同浓度拥挤试剂PEG2000作用下,两种结构的ELPs相变温度均降低,当其各自浓度均为25μmol/L时,三臂星型ELPs相变温度降低3℃-13℃,而ELPs120相变温度仅降低1.5℃-10.8℃。此外,在添加PEG2000后,三臂星型ELPs相变缓慢;在不同类型和浓度的osmolytes溶液中,25μmol/L三臂星型ELPs相变温度明显要比线性ELPs高8℃左右;在DESs体系中,三臂星型ELPs有类似与水溶液中的相变行为,且其相变温度受到抑制,另外三臂星型ELPs和ELPs120在DESs/PBS体系中,与在（氯化胆碱＋尿素）/PBS体系中的相变行为一致,其中当DESs体积含量为50%,ELPs120相变温度是最低的。由于ELPs在非单一缓冲液体系中的相变行为不同,这丰富了ELPs作为纯化标签的应用,且在非单一缓冲液体系中因降低了相变温度,节约了纯化融合蛋白的经济成本,同时也为研究ELPs拓扑结构与其相变行为之间的关系奠定理论基础。