基于UPLC-Q-TOF-MS谱-效分析的浙贝母化痰质量标志物的初步筛选及含量差异研究

摘要

目的探讨10种不同产地规格浙贝母超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)指纹谱与其化痰作用的谱-效关系,初步筛选浙贝母化痰作用质量标志物(Q-marker),并比较主要质量标志物的含量差异。方法应用UPLC-Q-TOF-MS技术建立浙贝母指纹图谱。液相条件:色谱柱ZORBAX HPLC Eclipse Plus C18(3 mm×150 mm,1.8μm),以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL·min^(-1);柱温30℃;进样量2μL。质谱条件:通过运用电喷雾(ESI)离子源,在正负离子模式下进行数据采集。采用小鼠酚红法以气管酚红排泌量为指标评价浙贝母化痰作用。结合双变量相关分析和灰色关联度分析研究浙贝母指纹图谱中共有峰与化痰作用的相关性,筛选出关联性较大的成分作为其化痰作用的主要质量标志物。采用高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)建立其中4个主要成分的含量测定方法,并比较不同产地规格的含量差异。结果初步筛选出6个与浙贝母化痰作用相关的质量标志物,分别为腺苷、贝母辛,西贝素、贝母素乙、贝母素甲、浙贝素。10个不同产地规格浙贝母中贝母辛含量在0.186~1.1069 mg·g^(-1)内;西贝素含量在0.2047~1.2439 mg·g^(-1)内;贝母素乙含量在0.0842~0.6115 mg·g^(-1)内;贝母素甲含量在1.4585~11.7696 mg·g^(-1)内。结论基于“谱-效”关联的质量标志物研究策略是一种快速分析及初步确定浙贝母化痰作用药效物质的有效方法。在此基础上建立的浙贝母主要质量标志物HPLC-ELSD含量测定的方法可靠、准确。本实验对完善浙贝母质量控制方法,制定科学的浙贝母商品标准规范具有较重要的参考价值。