毛细管区带电泳同时分离维拉帕米和去甲维拉帕米对映体

摘要

目的：建立同时分离维拉帕米（ＶＰＭ）和去甲维拉帕米（ＮＶＰＭ）对映体的高效毛细管电泳方法。方法：采用目前应用最广泛的毛细管区带电泳模式，以三甲基β环糊精（ＴＭβＣＤ）为手性选择剂，考察了毛细管柱、进样方式、运行电压、缓冲液ｐＨ值、溶剂等因素对峰迁移、分辨率、灵敏度的影响，选择优化的电泳条件用于标准溶液的分离和测定。结果：用ｐＨ为２．５，含６０ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＴＭβＣＤ的６０ｍｍｏｌ·Ｌ－１磷酸盐缓冲液为手性拆分剂，在７５μｍ（ＩＤ）×３０ｃｍ的聚内酰胺涂渍柱（柱温２０℃）上，采用１２ｋＶ（７ｓ）电迁移进样，运行电压为１４ｋＶ，紫外检测波长２００ｎｍ，能在１１ｍｉｎ内将内标（Ｇａｌｏｐａｍｉｌ）、ＲＶＰＭ、ＳＶＰＭ、ＲＮＶＰＭ和ＳＮＶＰＭ完全分离，并用各对映体与内标的峰面积比为定量指标进行水标溶液的浓度测定，定量检测限为２５ｎｇ·ｍｌ－１，日间变异小于１０％，线性关系良好。结论：毛细管区带电泳方法能快速、高效地分离ＶＰＭ和ＮＶＰＭ对映体，为ＶＰＭ和ＮＶＰＭ对映体的测定及质量控制提供新的方法，为生物体液中ＶＰＭ及其代谢物ＮＶＰＭ对映体的测定，为开展ＶＰＭ对映体特异性的药动学和药效学研究打下基?