载药肿瘤细胞外泌体联合放疗对乳腺癌肿瘤干细胞增殖的影响

摘要

背近年来研究发现，载药肿瘤细胞外泌体与相应起源的肿瘤细胞具有较高的亲和性，与其他细胞的结合力较低，因而成为一种高效的靶向药物载体。目的：观察载药肿瘤细胞外泌体联合放疗对乳腺癌肿瘤干细胞增殖的影响。方法：采用超速离心法从人乳腺导管癌细胞ZR-75-30中分离肿瘤细胞外泌体，并用其包裹甲氨蝶呤，制备载药肿瘤细胞外泌体。采用流式细胞技术从人乳腺导管癌细胞ZR-75-30中分离CD133＋乳腺癌肿瘤干细胞，分5组培养：空白组常规培养，肿瘤细胞外泌体组加入含载药肿瘤细胞外泌体的RPMI 1640培养基，低、中、高剂量放疗组加入含载药肿瘤细胞外泌体的RPMI 1640培养基培养24 h，然后分别接受2，4，6 Gy的X射线照射1次；培养7 d后，倒置显微镜下观察肿瘤球形成数量及肿瘤球体积，Western Blot 检测Nanog、Sox-2、Oct-4的表达。结果与结论：①与空白组比较，肿瘤细胞外泌体组肿瘤球数量、体积明显减少（P 〈 0.05）；与肿瘤细胞外泌体组比较，低、中、高剂量放疗组肿瘤球数量、体积明显减少（P 〈 0.05），且随放疗剂量增高，减少幅度增大；②与空白组比较，肿瘤细胞外泌体组Nanog、Sox-2、Oct-4表达降低（P 〈 0.05）；与肿瘤细胞外泌体组比较，低、中、高剂量放疗组Nanog、Sox-2、Oct-4表达降低（P 〈 0.05），且随放疗剂量增高，减少幅度增大；③结果表明，载药肿瘤细胞外泌体协同放疗发挥抑制CD133＋乳腺癌肿瘤干细胞的增殖活性，且呈放疗剂量依懒性。