H5N1亚型禽流感病毒NP蛋白一个鸡MHC Ⅰ分子限制性T细胞表位的鉴定

摘要

为鉴定禽流感病毒核蛋白(NP)中的T细胞表位,本研究根据蛋白结构预测技术预测了4个潜在细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位(NP120-128、NP163-172、NP85-92、NP67-74),并合成相应的候选短肽.构建了含有NP基因的重组质粒pCAGGS-NP,将其转染293T细胞.间接免疫荧光和western blot结果表明NP蛋白能够在293T细胞中获得表达.重组质粒免疫SPF鸡后能够诱导鸡体产生特异的NP抗体.在合成的4条短肽中,NP67-74体外刺激免疫过pCAGGS-NP的鸡脾淋巴细胞可以显著提高脾淋巴细胞IFN-γ的分泌量,提示短肽NP67-74能够在体外诱导活化鸡淋巴细胞产生CTL,可能是AIV NP的CTL表位.该研究结果对流感病毒免疫机制和通用疫苗研究具有借鉴意义.