PRDM1基因失活对C－MYC的调控在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的作用

摘要

目的研究PRDM1基因失活对C-MYC的调控在弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）中的作用, 探讨其与免疫分型及预后相关性。方法选取2009年1月至2015年12月在新疆医科大学第一附属医院收治DLBCL患者的石蜡包埋组织100例, 反应性增生淋巴结20例。免疫组织化学EnVision法检测CD20、CD10、MUM1、Ki-67、bcl-6、Blimp1、C-MYC、PAX5蛋白表达, 根据Hans分型法进行免疫分型。逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测两组中PRDM1、C-MYC mRNA表达情况。单因素生存分析（Kaplan-Meier）法从蛋白、mRNA水平分析PRDM1/Blimp1及C-MYC与预后相关性。应用阳离子脂质体转染法介导的小干扰RNA（siRNA）转染OCI-LY1[生发中心B细胞型（GCB型）]和OCI-LY3（non-GCB型）细胞系, RT-PCR和Western blot方法检测siRNA转染前后细胞系中C-MYC mRNA和蛋白表达情况。结果 100例DLBCL患者中, GCB型27例（27/100, 27.0%）, non-GCB型73例（73/100, 73.0%）。Blimp1蛋白在肿瘤中阳性表达26例（26/100, 26.0%）, 反应性增生淋巴结中阳性表达20例（20/20, 100.0%）。PRDM1 mRNA高表达58例（58/100, 58.0%）, 其中GCB型22例（22/27, 81.5%）, non-GCB型36例（36/73, 49.3%）, 两者之间差异有统计学意义（P=0.004）。同时, 在mRNA水平, PRDM1在不同免疫分型、血清乳酸脱氢酶（LDH）水平、B症状、原发部位等临床病理参数表达有差异, C-MYC在性别、国际预后指数（IPI）评分、血清LDH水平之间表达有差异, PRDM1与C-MYC具有显著相关性（χ2=7.648, P=0.006）。沉默两个细胞系中PRDM1基因后, RT-PCR和Western blot结果显示在OCI-LY1细胞系中C-MYC基因和蛋白在转染组表达较空白对照组及阴性对照组表达上调。结论在DLBCL中PRDM1基因失活所致的C-MYC基因表达上调可能是DLBCL发生的一个重要因素, 为相关研究提供实验证据。同时, PRDM1蛋白及mRNA和免疫分型相关, PRDM1 mRNA是提示不良预后的标志。