耳蜗α1D L-型电压门控钙通道剪切异构体的克隆和体外表达研究

摘要

目的 克隆大鼠耳蜗毛细胞电压门控钙通道α1D剪切异构体并在体外表达.方法 以耳蜗基底膜中组织总RNA为模板,利用长距离RT-PCR克隆耳蜗毛细胞表达的电压门控钙通道α1D剪切异构体,并利用异源表达系统在哺乳动物细胞系进行表达.结果 克隆的耳蜗毛细胞表达的α1D剪切异构体全长cDNA长达6.2kb,构建了哺乳动物表达载体,建立了稳定表达该剪切异构体的细胞系.结论 内耳毛细胞表达组织特异性的α1D剪切异构体,该异构体在外源表达系统中的表达为今后研究耳蜗α1D L-型钙通道蛋白的电生理和药理特性奠定了基础.