载脂蛋白E对EAE小鼠发病前期巨噬细胞分泌MMP-9、TIMP-1及炎症因子的影响

摘要

目的探讨载脂蛋白E（ApoE）对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠发病前期脾脏巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）及炎症因子的影响。方法按照随机数字表法,将20只ApoE基因敲除型（ApoE-/-）C57BL/6J小鼠分为ApoE-/-EAE组和ApoE-/-对照组,20只野生型（WT）C57BL/6J小鼠分为WT EAE组和WT对照组,每组10只。采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55（MOG35-55）作为抗原诱导ApoE-/-EAE组和WT EAE组小鼠制成EAE模型,ApoE-/-对照组和WT对照组小鼠以生理盐水代替。提取造模后7 d时小鼠脾脏巨噬细胞进行体外培养,ApoE-/-EAE组和WTEAE组巨噬细胞以MOG35-55刺激,ApoE-/-对照组和WT对照组巨噬细胞予等量生理盐水处理,48 h后采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞培养液中MMP-9、TIMP-1、干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白介素-6（IL-6）含量。结果 WTEAE组巨噬细胞的MMP-9、IFN-γ、TNF-α及IL-6分泌量均明显高于WT对照组,ApoE-/-EAE组巨噬细胞的MMP-9、IFN-γ、TNF-α及IL-6分泌量均明显高于ApoE-/-对照组,ApoE-/-EAE组巨噬细胞的MMP-9、IFN-γ、TNF-α及IL-6分泌量均明显高于WT EAE组,WT EAE组巨噬细胞的TIMP-1分泌量明显高于WT对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论在EAE发病前期,脾脏巨噬细胞分泌的MMP-9及炎症因子增多,而ApoE表达的缺乏进一步促进巨噬细胞分泌更多的MMP-9及炎症因子,故给予ApoE补充可能会通过调节巨噬细胞分泌MMP-9及炎症因子,起到保护血脑屏障完整性、减轻炎症反应的作用。