人肝门部胆管癌细胞QBC939中Vimentin基因的siRNA构建研究

摘要

目的 构建可抑制Vimentin基因表达的siRNA并转染进入人肝门部胆管癌QBC939细胞株,初步鉴定siRNA的干扰效果。方法 设计并合成Vimentin(NM-003380)基因的可作用于不同位点的3种siRNA及一组siRNA阴性对照序列,使用脂质体法将3种不同的siRNA序列及阴性对照序列瞬时转染进入人肝门部胆管癌QBC939细胞,分别命名为T1组(siVIM-1)、T2组(siVIM-2)、T3组(siVIM-3)及NC组(siCtrl),使用RT-PCR、Q-PCR技术测定实验中各组细胞Vimentin在mRNA水平上的表达情况。结果 T1、T2及T3组Vimentin在基因表达水平上均较NC组受到抑制,T2组的抑制效果较T1及T3组更明显,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 成功建立并筛选出人肝门部胆管癌细胞QBC939细胞Vimentin基因的siRNA。为后续进一步研究Vimentin的生物学特性及在肝门部胆管癌QBC939细胞中的作用奠定了基础。