用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性分析进行沙眼衣原体的基因分型

摘要

为了研究泌尿生殖道沙眼衣原体（ＣＴ）感染的分子流行病学，我们建立了一种不需做培养的ＣＴ血清型鉴定方法。用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增ＣＴ大部分主要外膜蛋白基因（ｏｍｐｌ），将扩增产物做限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析，即用限制性内切酶ＡｌｕⅠ和ＭｓｐⅠ同时消化，产生的片段通过１０％聚丙烯酰胺凝胶电泳分离。经硝酸银染色后，１５个ＣＴ血清型标准株产生１３个特征性带谱。血清型Ｃ和Ｊ带型相似，用ＨｉｎｆⅠ酶切后区分；Ｈ和Ｌ３带型相同，用ＤｄｅⅠ和ＥｃｏＲⅠ同时酶切后区分。对１２份ＣＴ培养阳性的临床标本行ＰＣＲＲＦＬＰ分型检测。结果：Ｄ血清型为６份标本，Ｅ型２份，Ｆ型２份，Ｆ／Ｇ混合型１份，Ｂ型１份。研究表明对ｏｍｐｌ的ＰＣＲＲＦＬＰ基因分型方法能用于大范围ＣＴ感染的流行病学研究