小鼠角质形成细胞MHC-Ⅰ类限制性内源性抗原递呈系统的构建

摘要

目的建立一转染小鼠角质形成细胞系，使其表达 MHC－Ⅰ类分子限制的卵白蛋白（ ovalbumin， OVA）抗原。方法将含有融合 OVA基因（在角蛋白 5的启动子下）和小鼠 H－ 2Kb的重组质粒转染于小鼠 PAM212细胞系（ H－ 2Kd）。采用 RT－ PCR和流式细胞分析技术检测相应基因的转录及翻译水平的表达。结果本实验建立了 2个可表达小鼠 H－ 2Kb分子 （命名为 PAM－ Kb）的转染细胞系， 4个可表达 OVA mRNA（命名为 PAM－ OVA）的转染细胞系和 2个可同时表达小鼠 H－ 2Kb分子和 OVA mRNA的转染细胞系（命名为 PAM－ OK）。结论所建立的 MHC－Ⅰ限制的内源性抗原系统为进一步理解多肽 /MHC－Ⅰ复合体与具有相应特异 T细胞受体的 CD8＋ T细胞之间的相互作用奠定了基础。