活化型TAK1转基因小鼠的建立及TAK1对牙釉质发育影响的初步研究

摘要

目的:建立人活化型TAK1(caTAK1)转基因小鼠,初步研究TAK1对釉质发育的影响.方法:克隆小鼠釉原蛋白(Amelogenin,Amelx)启动子及人TAK1的全长基因,并利用缺失突变原理扩增caTAK1基因;运用Gateway技术将caTAK1基因插入Amelx启动子下游构建转基因表达载体,并通过显微注射法建立caTAK1转基因小鼠;用PCR扩增对转基因小鼠的基因型进行鉴定,RT-PCR检测外源性TAK1基因在转基因小鼠颌骨中的表达,并运用X线片、体视显微镜及微型CT对转基因小鼠磨牙釉质的矿化程度和病理性磨损程度进行观察.结果:成功构建了caTAK1转基因表达载体并制备转基因小鼠;转入的人caTAK1基因在小鼠颌骨组织中特异性表达;活化型TAK1转基因小鼠磨牙釉质的矿化程度较野生型小鼠差,1月龄时,两种小鼠磨牙釉质表面的磨损程度无明显差别,而6月龄时,与野生型小鼠相比,活化型TAK1转基因小鼠磨牙釉质有严重磨损.结论:TAK1在牙齿釉质发育过程中具有重要作用.