一株具有抗菌活性耐盐芽孢杆菌B-11的分离鉴定及发酵工艺优化

摘要

目的 旨在从盐碱土壤中分离获得一株耐盐细菌B-11,对其进行分类鉴定及抗菌活性优化及抗菌特性研究.方法 基于形态学分析和16S rRNA基因序列对菌株进行分类鉴定.以金黄色葡萄球菌为指示菌,采用双层平板法对菌株B-11发酵液特性进行研究,并通过发酵培养基的正交优化试验,获得菌株产抗菌活性物质最佳的发酵培养条件.通过对菌株B-11基因组次级代谢产物合成基因的分析,研究其基因组上的功能基因.结果 结合形态学和分子鉴定表明该菌为Bacillus属成员,在0-4％的NaC1浓度范围内生长良好,为耐盐细菌.该细菌发酵上清液对蛋白酶K和链霉蛋白酶敏感,对pH、温度和紫外光具有良好的耐受性.通过正交优化得到菌株B-11最适发酵条件为:可溶性淀粉15g/L,黄豆粉15g/L,NaCl 15g/L,pH为自然pH,接种量为1.5％,发酵温度为34℃或37℃,优化后发酵液对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径较优化前提高25.5％.利用基因组测序及次级代谢产物合成相关基因分析,发现Bacillus sp.B-11基因组中含有非核糖体肽合成酶(NRPS)基因,并结合该菌次级代谢产物对蛋白酶的敏感性,表明该菌具有产多肽类化合物的潜力.结论 盐碱土壤中的极端微生物资源可作为抗菌活性物质的潜在新来源.