siRNA抑制人舌癌细胞VEGF表达对MMP-2、-9及TIMP-1、-2蛋白表达的影响

摘要

目的 利用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制人舌癌TcaS113细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达,观察其对培养细胞和移植瘤基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)-2、-9及基质金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs)-1、-2蛋白表达的影响.方法 以稳定转染携带VEGF-siRNA真核表达载体的Tca8113细胞(VEGF-siRNA1、VEGF-siRNA2)为实验组,以转染空载体的及未转染的Tca8113细胞为实验对照组和空白对照组.将细胞分别接种于裸鼠皮下,用免疫组化法分别测定各组培养细胞和移植瘤VEGF、MMP-2、-9及TIMP-1、-2的蛋白表达.结果 各组培养细胞及移植瘤VEGF免疫组化染色:VEGF-siRNA1组、VEGF-siRNA2组与实验和空白对照组相比,平均阳性率降低,平均灰度值增高(P＜0.05);各组培养细胞均未检测出MMP-2、-9及TIMP-1、-2蛋白的阳性表达.各组移植瘤MMP-9、TIMP-1、-2可见阳性表达,但各组染色平均阳性率及平均灰度值之间的差异无统计学意义(P＞0.05),而MMP-2未见明显阳性表达.结论 以siRNA干扰沉默人舌癌Tca8113细胞VEGF基因,可明显抑制细胞及移植瘤内YEGF蛋白表达,但是对MMP-2、-9及TIMP-1、-2蛋白的表达无明显影响.