Caveolin-1基因重组腺病毒表达系统的构建与鉴定

摘要

目的：构建靶向肝脏的小凹蛋白-1 caveolin-1基因重组腺病毒并对该表达体系进行鉴定。方法：根据GeneBanks中caveolin-1的序列设计引物,以大鼠肝组织提取总RNA为模板,PCR扩增caveolin-1,并将caveolin-1序列克隆至pAdTrack-CMV质粒中,再与pAd-easy质粒进行同源重组构建重组腺病毒载体,利用脂质体法于293细胞中进行包装重组腺病毒, RT-PCR 检测 caveolin-1基因的转录, Western blotting检测caveolin-1蛋白的表达情况。结果：PCR及Western blotting检测结果表明成功构建出caveolin-1基因重组腺病毒。结论：成功构建出caveolin-1基因重组腺病毒,为进一步研究caveolin-1基因在肝纤维化及肝硬化疾病中的作用机制打下实验基础。