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多壁碳纳米管呼吸暴露导致大鼠持续性的胸腔炎症以及胸膜纤维化和间皮细胞增生

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中英文缩略词表

1引言

2实验材料

2.1实验细胞株

2.2实验动物及多壁碳纳米管

2.3主要试剂

2.4主要溶液的配制

1)细胞培养所用溶液

2)Western blot所用溶液

3)其它溶液

2.5 主要仪器及设备

3实验方法

3.1动物实验

3.1.1纳米材料悬浮液的制备

3.1.2纳米材料的肺内投予

3.1.3免疫组织化学

3.1.4石蜡切片HE染色

3.1.5偶氮卡红(Azan-Mallory)染色

3.1.6光学显微镜、偏光显微镜及扫描电子显微镜的观察

3.2细胞培养

3.2.1细胞复苏

3.2.2细胞传代

3.2.3细胞冻存

3.3蛋白质免疫印迹(Western blot)

3.3.1配胶

3.3.2蛋白样品准备

3.3.3用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白含量

3.3.4 SDS-PAGE电泳及转膜

3.3.5 封闭、杂交及化学发光检测

3.4 细胞增殖实验

3.5细胞周期检测

4实验结果

4.1 MWCNTs的暴露会导致持续性脏胸膜和壁胸膜纤维化增厚

4.2 MWCNTs的暴露会导致脏胸膜和壁胸膜间皮细胞的增殖

4.3 MWCNTs的暴露会导致胸膜腔的持续炎症及MWCNTs沉积

4.4 MWCNTs暴露促使胸腔灌洗液中的细胞因子分泌增高

4.5 IL-2、IP-10与IL-18三种细胞因子共同对人成纤维细胞与胸膜间皮细胞有增殖促进作用

5讨论

6结论

参考文献

附录

致谢

综述:巨噬细胞在肺纤维化过程中的研究进展

参考文献

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