声明
摘要
缩略词表
1 前言
1.1 农药残留问题
1.1.1 农药残留的种类及现状
1.1.2 农药残留的来源及危害
1.1.3 农药残留的检测方法
1.2 植物酯酶抑制法快速检测农药残留的研究
1.2.1 植物酯酶抑制法快速检测农药残留的原理
1.2.2 植物酯酶酶源筛选
1.2.3 酶抑制法快速检测农药残留的方法
1.3 立题意义及研究内容
1.3.1 立题意义
1.3.2 研究内容
2 材料与方法
2.1 材料、试剂与仪器
2.1.1 实验材料与试剂
2.1.2 仪器设备
2.2 试剂的配制
2.2.1 显色液的配制
2.2.2 α-乙酸萘酚标准溶液的配制
2.2.3 农药标准液的配制
2.3 实验方法
2.3.1 麦麸酯酶制备及纯化方法
2.3.2 蛋白质测定方法
2.3.3 麦麸酯酶活力的测定方法
2.3.4 麦麸酯酶抑制率的测定
2.3.5 酶抑制法检测体系的优化
2.3.6 麦麸酯酶对有机磷及氨基甲酸酯类农药敏感性的研究
2.3.7 农药抑制麦麸酯酶动力学常数(Ki、Ka、K2)及IC50的测定
2.3.8 麦麸酯酶抑制法在果蔬农药残留检测应用中的研究
2.4 数据分析
3 结果与分析
3.1.酶抑制法检测农药残留体系的优化
3.1.1 最大吸收波长的选择
3.1.2 表面活性剂的增敏效果及最佳浓度的选择
3.1.3 农药抑制时间对酶活抑制率的影响
3.2 麦麸酯酶对有机磷及氨基甲酸酯类农药敏感性的研究
3.2.1 有机磷及氨基甲酸酯类农药对麦麸酯酶粗酶液的抑制作用
3.2.2 有机磷及氨基甲酸酯类农药对纯化后麦麸酯酶的抑制作用
3.2.3 纯化前后麦麸酯酶对农药敏感性结果比较
3.3 农药抑制麦麸酯酶动力学常数及IC50的研究
3.3.1 农药抑制麦麸酯酶动力学常数的测定结果
3.3.2 农药抑制麦麸酯酶半抑制浓度(IC50)的测定结果
3.4 麦麸酯酶抑制法在果蔬农药残留检测应用中的研究
3.4.1 麦麸酯酶抑制法检测体系抗干扰实验
3.4.2 蔬菜样品前处理方法的确定
3.4.3 辛辣蔬菜中假阳性消除的研究
3.4.4 抽样检测市售果蔬的农药残留验证方法有效性
4 讨论
4.1 检测条件的选择
4.1.1 水浴温度及pH的选择
4.1.2 农药抑制麦麸酯酶时间的选择
4.2 影响植物酯酶对农药敏感性的因素
4.3 纯化后麦麸酯酶的纯度
4.4 农药抑制麦麸酯酶动力学常数的测定
4.5 蔬菜中农药残留提取方法的选择
4.6 假阳性消除方法的选择
4.7 酶抑制法快速检测农药残留的应用
5 结论
5.1 酶抑制法检测体系的最佳条件
5.2 麦麸酯酶粗酶液对农药敏感性
5.3 纯化后的麦麸酯酶对农药敏感性
5.4 农药抑制麦麸酯酶动力学常数的测定
5.5 酶抑制法检测农药残留前处理的最佳条件
5.6 酶抑制法检测辛辣蔬菜假阳性的消除
参考文献
致谢
附录:攻读硕士学位期间发表论文及成果