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125I粒子持续低剂量率照射和60Coγ射线高剂量率照射对非小细胞肺癌细胞生物学效应影响的比较性研究

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绪论

1.1 肺癌危险因素

1.2 肺癌临床表现

1.3 肺癌病理类型

1.4 肺癌治疗及预后

1.5 问题与展望

第1章 引言

第2章 125I粒子持续低剂量率照射和60Coγ射线高剂量率照射对非小细胞肺癌细胞增殖能力影响的比较

2.1 材料与试剂

2.2 照射装置

2.3 实验试剂的配制

2.4 实验方法

2.5 实验结果

2.6 实验讨论

第3章 125I粒子CLDR照射和 60Coγ射线HDR照射对NSCLC细胞周期和细胞凋亡影响的比较

3.1 材料与仪器

3.2 实验方法

3.3 实验结果

3.4 实验讨论

第4章 125I粒子CLDR照射和 60Coγ射线HDR照射抑制NSCLC细胞增殖效应分子机制的比较

4.1 材料与仪器

4.2 实验方法

4.3 实验结果

4.4 实验讨论

参考文献

附录1 英文缩略词及相关中文符号说明

附录2 攻读硕士学位期间发表的学术论文

致谢

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摘要

目的:采用125I粒子和60Coγ射线对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞A549、H1299及正常支气管上皮细胞BEAS-2B照射,探讨两种电离辐射对NSCLC细胞生物学效应的影响及抑癌效应的分子机制。
  方法:A549、H1299、BEAS-2B细胞处于指数生长期时分别行125I粒子持续低剂量率(CLDR)照射和60Coγ射线高剂量率(HDR)照射。分别采用克隆形成试验检测细胞克隆存活率、流式细胞技术检测细胞周期与细胞凋亡率的改变,通过Western blot技术检测细胞中Bcl-2、BAX、Caspase-3及PARP蛋白表达水平的改变。
  结果:与60Coγ射线HDR照射相比,125I粒子CLDR照射后A549、H1299细胞存活分数降低更显著、细胞周期阻滞更明显(A549细胞为 G1期阻滞、H1299细胞为G2/M期阻滞)、细胞凋亡率更高。最后Western Blotting实验表明125I粒子CLDR照射较60Coγ射线HDR照射明显上调促凋亡蛋白BAX、Cleaved-caspase-3、Cleaved-PARP的表达,同时明显下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。然而在同样的照射条件下BEAS-2B细胞的凋亡率以及凋亡相关蛋白的表达并没有发生明显的变化。
  结论:125I粒子CLDR照射较60Coγ射线HDR照射抑制A549、H1299细胞增殖的效应更明显,其中A549细胞对电离辐射相对敏感,H1299细胞次之,与A549、H1299相比BEAS-2B细胞对电离辐射相对抵抗。其次Bcl-2/BAX的失衡以及Caspase-3及PARP蛋白的裂解活化在125I粒子CLDR照射抗增殖效应中发挥着重要的作用。

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