液相色谱串联质谱法在食品中有毒有害物质分析中的应用研究

摘要

食品安全问题尤其是食品中有毒有害物质的污染已成为社会和政府关注的焦点，也是消费者最担忧的问题。鉴于有毒有害物质的不确定性，应用痕量分析和超痕量分析技术进行检测显得尤为重要。目前国内外已有关于食品中有毒有害物质的液相色谱-质谱联用的检测方法，但仍有部分有毒有害物质没有相关的检测标准方法和参考文献方法。
　　 本研究针对食品安全中较为突出的问题，利用液相色谱-质谱连用技术，建立了食品中较为典型的有毒有害物质（如莱克多巴胺、克伦特罗、乌洛托品、碱性染料）的分析方法。主要研究内容如下:
　　 (1)高效液相色谱-串联质谱法测定加工肉制品中莱克多巴胺和克伦特罗的含量
　　 建立了高效液相色谱串联质谱测定加工肉制品中莱克多巴胺和克伦特罗的方法。采用阳离子交换色谱柱(SCX)分离目标化合物，同时改进了前处理方法，采用PXC固相萃取柱净化，并对洗脱溶液和高效液相色谱串联质谱的各参数进行优化。高效液相色谱流动相流速为0.4 mL/min，进样量为10μL，柱温为40℃。样品均质后加入30μLβ-盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶，并经0.02 mol/L醋酸铵溶液(pH5.2)提取，离心，过固相萃取柱净化。两种目标化合物在0.1～100μg/L范围内线性关系良好，检出限和定量下限分别不超过0.04μg/kg和0.15μg/kg。样品平均加标回收率为71％～98％，RSD低于8.5％。结果表明，此方法适合于加工肉制品中莱克多巴胺和克伦特罗的测定。
　　 (2)液相色谱-串联质谱法测定食品中的乌洛托品
　　 建立了测定乌洛托品的液相色谱-串联质谱法，用于快速监测食品中违法添加的乌洛托品，保护消费者健康。食品中乌洛托品经无水硫酸钠干燥脱水，乙腈提取后，采用梯度洗脱，SCX色谱柱分离，在电喷雾正离子和多反应监测模式下测定，外标法定量。乌洛托品在1-1000μg/L浓度范围线性良好，相关系数为0.9988，方法的检出限和定量限分别为0.2μg/kg和1.0μg/kg，加标回收率在52.6％～118％之间，相对标准偏差小于10.2％。本方法快速、准确、特异性强，灵敏度高，样品前处理简便易行，分析周期短，适合大量样品的测定。
　　 (3)高效液相色谱-串联质谱法同时快速测定鱼制品中5种常见碱性染料
　　 建立了高效液相色谱-串联质谱快速测定加工鱼制品中5种常见碱性染料（罗丹明B、孔雀石绿、结晶紫、碱性橙2、碱性嫩黄O）的方法。样品经脱脂后甲醇提取，冷冻后离心，过膜，上机。分析时流动相A为0.01 mol/L醋酸铵（用冰醋酸调pH=3.0），B为乙腈，目标化合物在梯度洗脱条件下，经SCX柱分离，采用多反应监测(MRM)正离子(ESI+)模式进行测定。结果表明:鱼制品中孔雀石绿、结晶紫的检测限为0.5μg/kg，罗丹明B、碱性橙2的检出限为0.6μg/kg，碱性嫩黄O的检出限为0.3μg/kg，五种目标化合物的回收率在71.5％～95.5％之间，相对标准偏差不超过9.07％。该方法操作简单，灵敏度高，实现了5种常见碱性染料的同时分离，适合于鱼制品中5种常见碱性染料的快速检测。

目录

声明

摘要

第1章 绪论

1．1 液质联用与食品安全简介

1．1．1 液质联用简介

1．1．2 食品安全简介

1．2 食品安全中有毒有害物质污染现状

1．3 液相色谱串联质谱在食品中有毒有害物质分析中的现状

1．3．1 农药残留的检测

1．3．2 兽药残留的检测

1．3．3 非法添加物的检测

1．4 本课题研究内容与意义

1．4．1 本课题研究内容

1．4．2 本课题研究意义

第2章 高效液相色谱-串联质谱法测定加工肉制品中莱克多巴胺和克伦特罗的含量

2．1 前言

2．2 实验部分

2．2．1 仪器与试剂

2．2．2 标准溶液

2．2．3 测定条件

2．2．4 样品处理

2．3 结果与讨论

2．3．1 色谱条件的优化

2．3．2 固相萃取柱的选择

2．3．3 洗脱液的选择

2．3．4 两种色谱／质谱方法的对比

2．3．5 质谱条件的优化

2．3．6 两种提取方法对比

2．3．7 方法学验证

2．3．8 稳定性实验

2．3．9 模拟食品加工

2．3．10 实际样品的测定

2．4 小结

第3章 高效液相色谱-串联质谱法测定食品中的乌洛托品

3．1 前言

3．2 实验部分

3．2．1 试剂与仪器

3．2．2 标准溶液的制备

3．2．3 LC-MS／MS分析条件

3．2．4 样品处理

3．3 结果与讨论

3．3．1 质谱条件优化

3．3．2 色谱分离条件的优化

3．3．3 稳定性实验

3．3．4 样品前处理的选择

3．3．5 质谱定性与定量

3．3．6 方法学验证

3．3．7 干扰试验

3．3．8 实际样品测定

3．4 小结

第4章高效液相色谱-串联质谱法同时快速测定鱼制品中五种常见碱性染料

4．1 前言

4．2 实验部分

4．2．1 仪器与试剂

4．2．2 LC-MS／MS分析条件

4．2．3 标准溶液的配制

4．2．4 样品处理

4．3 结果与讨论

4．3．1 质谱条件优化

4．3．2 色谱条件的优化

4．3．3 样品前处理条件的选择

4．3．4 线性范围、检出限及精密度实验

4．3．5 精密度、稳定性

4．3．6 加标回收试验

4．3．7 实际样品测定

4．4 小结

结论与展望

1 结论

2 本论文的创新点

3 展望

参考文献

附录A 攻读硕士学位期间所发表的学术论文目录

致谢