声明
论文创新点
中英文缩略对照表
第一章 结直肠癌及NRF2的研究进展
1.1 结直肠癌
1.1.1 结直肠癌的发生发展
1.1.2 结直肠癌的分子机制
1.1.3 肠癌的治疗
1.2 NRF2的研究进展
1.2.1 NRF2-ARE信号通路
1.2.2 NRF2的调控
1.2.3 NRF2与耐药
1.3 泛素化与去泛素化系统
1.3.1 泛素化系统
1.3.2 去泛素化系统
1.4 DUB3的研究进展
1.4.1 DUB3的发现
1.4.2 DUB3的功能
1.4.3 DUB3与癌症
第二章 实验材料与试验方法
2.1 实验材料
2.1.1 肠癌组织样品
2.1.2 细胞系、质粒及病毒
2.1.3 主要实验试剂及耗材
2.1.4 主要仪器设备
2.2 实验方法
2.2.1 质粒构建
2.2.2 质粒提取
2.2.3 细胞培养
2.2.4 慢病毒包装
2.2.5 稳转细胞系构建
2.2.6 CRISPR/Cas9敲除细胞系构建
2.2.7 总RNA提取、反转录及定量
2.2.8 双荧光素酶报告基因实验
2.2.9 免疫印迹实验
2.2.10 半衰期实验
2.2.11 免疫荧光实验
2.2.12 免疫沉淀实验
2.2.13 泛素化实验
2.2.14 细胞活力实验
2.2.15 细胞克隆形成实验
2.2.16 数据统计分析
第三章 实验结果与讨论
3.1 前言
3.2 实验结果与分析
3.2.1 DUB3被鉴定为NRF2最有可能的去泛素化酶
3.2.2 NRF2和DUB3在肠癌组织中表达上调
3.2.3 DUB3稳定NRF2的蛋白水平
3.2.4 DUB3促进NRF2的转录活性
3.2.5 DUB3、NRF2和KEAP1一起形成一个复合体
3.2.6 DUB3降低NRF2的K48连接的泛素化
3.2.7 DUB3通过上调NRF2引起化疗耐药
3.3 讨论与展望
参考文献
博士期间发表及待发表论文
致谢
