内质网糖蛋白KEDLC1的表达、纯化及多克隆抗体的制备

摘要

本文构建内质网新基因KEDLC1的原核表达载体,诱导融合蛋白的表达,并对其进行纯化;制备兔抗KEDLC1蛋白多克隆抗体并进行鉴定。应用RT-PCR技术,以人肝母瘤细胞系HepG2细胞提取的总RNA为模板,扩增目的基因KDELC1的全长CDs,构建原核表达载体pET-32a(+)KDELC1.利用大肠埃希菌BL21 (DE3)能够成功表达KEDLCI蛋白，免疫动物制备的KEDLCI的蛋白多克隆抗体具有较高的KEDLCI结合活性，为今后研究KEDLCI蛋白的生物学特性奠定了基础。