猪α干扰素基因在干酪乳酸杆菌中的表达

摘要

从质粒pMD 18-IFN-cα扩增出猪α干扰素(IFN-α)基因成熟蛋白序列,克隆到含有信号肽的质粒pUCK-SP中,获得重组质粒pUCK-SP-IFN-α.再将NdeⅠ和EcoRⅠ双酶切获取的SP-IFN-α片段插入到同样处理的干酪乳酸杆菌(Lb.casei)整合型表达载体pMJ67的lac启动子下游,得到重组质粒pMJ67-SP-IFN-α,电穿孔转化Lb.casei CECT 5276.抽提Lb.casei基因组DNA,采用PCR及测序鉴定证实猪IFN-α基因整合到Lb.casei的基因组中.SDS-PAGE证明猪IFN-α基因在重组Lb.casei中获得了表达.为重组基因工程干扰素的生产奠定基础.