生物质谱纳喷雾喷针的制备与蛋白质鉴定研究

摘要

蛋白质组学在1994年被提出后,迅速发展成为了一门涉及化学、生物等多学科,在疾病诊断、药物研发等方面有着重要意义的科学,被认为是后基因组时代生命科学研究的一项核心内容.相比于基因仅有4种碱基,蛋白质由20种氨基酸所组成,此外还有磷酸化、糖基化等多种翻译后修饰,其研究具有极大的复杂程度,因此需要一种更为强大的工具以获得蛋白质组所具有的大量信息.生物质谱以其高灵敏度、高分辨率,精确测定蛋白质和肽的相对分子质量,可以快速高效得到大量蛋白质的信息,从而对达到对蛋白质组的分析.本工作使用微管拉制仪将20μm内径石英毛细管拉制为可以适用于纳升级流速的ESI喷针，考察了不同拉制条件对所得到喷针形貌的影响的影响。将所得喷针用于生物质谱对于标准样品的信号检测。测试了纳升级流速下喷针相对离子源进样锥位置与所得信号强度的关系，优化了喷针的喷雾条件。比较了75μm商业化喷针和20μm自制喷针，得到了自制喷针效果优于商业化喷针的结论，在30nL/min流速下20μm自制喷针的信号强度比商业化喷针大4.5倍。