甜瓜APX基因的克隆、序列分析及原核表达

摘要

通过对甜瓜叶片接种白粉病菌,利用RT-PCR和RACR方法从甜瓜中分离出抗坏血酸过氧化物酶基因片段,通过特异引物扩增到cDNA序列及gDNA序列。分析表明,CmAPX基因的cDNA长1 047bp,ORF编码框共750bp,编码249个氨基酸,分子量大约27．3kD。CmAPX基因具有10个外显子,9个内含子。该基因和其他作物的蛋白质序列同源性在75%-97%之间。构建了高效的原核表达载体pET-24a(+)-CmAPX,在大肠杆菌中诱导高量表达了该蛋白。