反相色谱

摘要： 高效液相色谱(HPLC)由于其具有检测精度高、重复性好、可同时分离几种甚至十几种物质的优势,被广泛应用在食品添加剂、兽药农残、活性营养成分等检测领域,而反相色谱因其具有可调节参数多、流动相配制灵活、适用性广的优势成为液相色谱分析的最常见方法。在实际检验工作中,针对不同的目标物质建立适宜的分析方法,配备合适的色谱条件是必不可少的。本文以反相色谱方法的建立为例,详细论述了应如何针对某种成分建立液相色谱分析方法并通过调整流动相种类、色谱柱参数等条件进行方法的优化,对于实际乳制品检验工作中方法的优化和建立有一定的参考价值。

摘要： 采用一种无创取样方法实现了人体内糖化白蛋白的定量分析.以唾液为测试样品,首先通过超滤分离出唾液中分子量大于10 kD的蛋白分子,再经过反相色谱对唾液中的白蛋白进行进一步分离提纯,其中36.0～37.0 min的馏分经质谱鉴定为人血清白蛋白.通过葡萄糖苯脎分光光度法对唾液馏分中的白蛋白进行定量分析,并与临床中使用的白蛋白定量分析方法进行比较.结果表明,对于健康样品,5次平行实验的平均糖化比例为10.9％,相对标准偏差为11.3％.本方法可定量分析健康人唾液中的糖化白蛋白,有望用于临床糖尿病初步筛查.

摘要： 目的 利用反相色谱法测定菊花中咖啡酸衍生物和黄酮类成分的含有量.方法 样品70％甲醇提取物的分析采用Zorbax Eclipse Plus C18柱(150 mm×4.6 mm,3.5 μm);流动相乙腈-0.1％甲酸,梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;柱温20°C;检测波长280 nm.采用外标法对8种成分进行含有量测定.结果 8种成分在各自范围内线性关系良好(r＞0.994 3),平均加样回收率99.05％ ～ 101.00％,RSD 0.47％～0.65％.结论 该方法准确稳定,重复性好,可用于菊花的质量控制.

摘要： 开展了咪唑离子液体用于反相色谱流动相进行苯甲酸和山梨酸分析的研究.考察了咪唑离子液体种类与浓度、甲醇浓度、紫外检测波长等因素对分离、检测苯甲酸和山梨酸的影响,并探讨了2种分析物的保留规律.建立了以咪唑离子液体为流动相添加剂的反相色谱测定苯甲酸和山梨酸的分析方法.采用Agilent ZORBAX ODS反相色谱柱,以甲醇-0.2 mmol/L氯化1-丁基3-甲基眯唑水溶液(40∶60,体积比)为流动相,紫外检测波长230 nm,流速1.0 mL/min,色谱柱温度35°C时,可在7.0 min内实现苯甲酸和山梨酸的分离和检测.苯甲酸和山梨酸的线性范围为1.0 ～ 100.0 mg/L,相关系数(r)高于0.999 5,检出限均为0.02 mg/L.将方法应用于饮料样品中苯甲酸和山梨酸的测定,加标回收率为93.9％ ～ 104％,相对标准偏差(RSD)不大于4.0％,满足定量分析的要求.

摘要： 选取具有相同比表面积、不同甲苯抽出物透光率的炭黑N134,采用反相色谱测试其表面能,考察炭黑表面能与甲苯抽出物透光率的关系.结果 表明:当甲苯抽出物透光率低时,炭黑N134晶体边缘的高能位点被不完全燃烧的原料油或者烃类物质占据,炭黑N134的表面能色散分量低;当甲苯抽出物透光率为77％时,炭黑N134的表面能色散分量为233.6 mJ·m-2,甚至比甲苯抽出物透过率为92％的炭黑N234低约24％;当甲苯抽出物透光率高于82％时,随着甲苯抽出物透光率的提高,炭黑N134的表面能色散分量呈线性提高;当甲苯透光率为99％时,炭黑N134的表面能色散分量达到511.0mJ·m-2.炭黑生产企业可通过控制工艺和原材料提高炭黑纯净度,以提高炭黑质量.

摘要： 目的:以盐酸水苏碱为研究对象,确定此类季铵盐型生物碱成分的色谱条件选择。方法:通过比较不同色谱柱、不同缓冲盐种类和不同流动相的改变,分析其对盐酸水苏碱保留行为的影响。结果:盐酸水苏碱的检测选用Waters XBridge■BEH Amide色谱柱,以乙腈/0.4%十二烷基硫酸钠为流动相,流动相中不得加入甲醇、乙醇等有机溶剂。结论:选用Waters XBridge?BEH Amide色谱柱,以乙腈/十二烷基硫酸钠为流动相进行盐酸水苏碱色谱条件的开发。可为季铵盐型生物碱类成分色谱条件选择提供参考。

摘要： 本文以对氨基苯酚盐酸盐为背景紫外吸收试剂,采用间接紫外检测的反相色谱法分离检测辛烷磺酸盐、癸烷磺酸盐和十二烷基磺酸盐三种无紫外吸收的烷基磺酸盐。采用反相C18色谱柱分离,流动相为对氨基苯酚盐酸盐溶液-乙腈,检测波长为210nm,实现了三种目标烷基磺酸盐的分离和检测。考察了紫外吸收试剂种类、有机溶剂种类和浓度、对氨基苯酚盐酸盐浓度及其它色谱分析条件等对分离分析的影响,并探讨了影响规律。对氨基苯酚盐酸盐既是背景紫外吸收试剂,又是有效的洗脱剂组分。在选择的色谱条件下,三种目标烷基磺酸盐可在15min内完全分离和检测。辛烷磺酸盐、癸烷磺酸盐、十二烷基磺酸盐的检出限分别为0.13、0.12和0.97mg/L。将方法应用于84-消毒液的测定,加标回收率大于91%,满足日常定量分析要求。

摘要： 目的：建立能更全面反映莲子心化学成分的指纹图谱。rn 方法：采用亲水作用色谱和反相色谱两种色谱模式，对莲子心中化学成分进行全面分析和研究，用相似度和主成分分析考察小同莲子心样品的关系，然后根据光谱与色谱信息，采用化学计量学二维数据解析方法-光谱相关色谱法，对两种色谱模式光谱色谱指纹图谱中的组分相关性进行判断。rn 结果：2种色谱模式指纹图谱反映的化学信息并不相一致，将2种模式结合，得到了能更全面反映莲子心化学成分信息的指纹图谱。rn 结论：该方法能为全面控制莲子心药材质量提供参考，也为中药指纹图谱的研究提供新思路。

摘要： 本文构建了一种基于反相色谱的集成化蛋白质分析平台。先通过反相色谱对蛋白质进行预分离,随后通过中空纤维膜接口去除样品馏分中的有机溶剂并调节pH值,再依次进入酶反应器在线酶解。最后将酶解产物通过反相色谱分离后送入质谱进行鉴定。以牛血清白蛋白为样品,对该平台进行了初步评价。实验结果显示了该平台在蛋白质分析方面的优势。

摘要： 目的：本文通过2D-LC-UV系统结合大体积进样（Large volume inject,LVI）建立人血浆中帕利哌酮测定方法，用于帕利哌酮体内药物浓度研究工作。rn 方法：2D-LC中第一维（LC1）为反相色谱系统，色谱柱为 FRO XB-C18，（30×4.6mm , 5μm，ANAX），流动相为30mmol/L醋酸铵：乙腈：=42：58（V/V），第二维（LC2）为离子交换色谱系统，色谱柱为ASYNC SCX（150mm×4.6 mm i.d, 5μm），流动相为20mmol/L 醋酸铵：乙腈：=30：70（V/V）；LC1及LC2系统通过六通阀连接，采用"中心切割"模式及陷阱柱转移目标物；检测波长为280nm，样品用乙腈沉淀预处理，进样200ul，。rn 结果：2D-LC系统具有很强抗干扰能力；LVI提高了分析的灵敏度，同时最大程度降低简化样品处理流程及样品处理误差；2D-LC-UV具有稳健性良好，无需内标校正方法误差。方法学显示帕利哌酮在8.3~160ng·ml-1线性关系良好，相关系数为0.999 93， LLQD为4.0ng·ml-1。萃取回收率在99.5%~100.5%，日内RSD＜3%（n=6），日间RSD均＜5%（n=18），准确度在99.1%~102.3%。rn 结论：本文建立了高度自动化及高性能的2D-LC-UV方法，方法样品处理简单、结果准确、时间消耗少及分析成本低，适用于帕利哌酮临床长期的治疗药物浓度检测。

摘要： 目的：建立了大环化合物固定相分离氨基甲酸酯农药和有机磷农药的方法。rn 方法：基于全氢化二十六元六氮杂大环(L1)液相键合固定相(L1GlySil)的制备，并以5种氨基甲酸酯类农药和4种有机磷为分析物，在反相色谱条件下考察了L1GlySil的色谱保留特征及流动相中甲醇含量对分析物的影响。rn 结果：以L1GlySil为固定相分离了5种氨基甲酸酯类农药和4种有机磷农药，并且这5种氨基甲酸酯类农药洗脱顺序受流动相中甲醇含量的影响。rn 结论：这种大环化合物固定相可以分离氨基甲酸农药和有机磷农药。

摘要： 残余硅羟基对碱性化合物以及酸性化合物的分离产生不利影响，减弱残余硅羟基效应一直是色谱固定相研究方面的热点。烷基咪唑常用来制备离子液体，基于咪唑的离子交换固定相也早已被制备和研究。本文采用先聚合后在硅胶表面接枝的方法，制备了一种新型高效液相色谱固定相：聚1-烯丙基咪唑接枝硅胶固定相，并对该新型固定相进行了色谱性能研究。在反相色谱条件下，分别分离了苯胺类、苯酚类和多环芳烃类化合物；在离子色谱条件下，分离了常见无机阴离子。

摘要： 混合模式色谱(Mixed-mode chromatography,MMC)能在分离过程中提供两种或多种分离机理,有利于提高分离选择性(separation selectivity)和扩大应用对象适用范围(analyte coverage)。近年来,混合模式色谱及其固定相的研究得到了较大发展。笔者发展了一种基于click chemistry的键合四聚乙二醇固定相(Click OEG4),并且对其反相色谱保留行为进行了研究,发现其与常规C18的选择性有很大区别。由于Click OEG4结构中存在的三唑环具有一定的碱性,在反相色谱常用的酸性条件下容易质子化而带上正电荷,因此Click OEG4除了能够提供反相色谱机理外,还具有弱阴离子交换功能,是一种反相/弱阴离子交换(RP/WAX)混合模式色谱固定相。色谱评价结果表明Click OEG4具有明显的反相色谱保留行为。使用有机酸为探针化合物研究了Click OEG4的阴离子交换行为。

摘要： 高效液相色谱是一种快速有效的分析工具,30多年来一直在分析科学中占有举足轻重的地位。在高温液相色谱法中,升高温度会产生以下效果：溶质扩散系数增大、流动相粘度降低、水的介电常数降低等。不少学者研究了温度对保留时间、选择性和峰型改善的影响,Y.Yang等推出了以纯水为流动相下塔板高度随温度变化的理论模型。由于甲醇/乙腈是实验室中最常用的有机溶剂,他们在高温下和水具有相似的性质,因此,本文所构建的理论模型适于反相色谱中含有有机溶剂的样品在高温下保留行为的预测。

摘要： 实验室自制RAM柱对小分子药物的保留主要是基于疏水作用，符合反相液相色谱的性质，除此之外，内表面键合相上的脉基还提供了氢键，静电作用等分子间作用力参与了小分子药物的保留过程，但这些作用较弱。从热力学角度分析，自制RAM柱对温度敏感，只有在298-308K范围内，RAM柱性能稳定，小分子药物在RAM柱上的保留过程是放热过程，低温有利于保留，并且证明了保留能力好的药物在RAM柱上的保留过程是自发的，而保留能力差的药物不是自发的。所以，自制RAM柱适用于疏水性强的药物，对其保留机理的研究能够使我们更加合理使用RAM，为后续RAM的合成提供实验依据。

摘要： 实验室自制RAM柱对小分子药物的保留主要是基于疏水作用，符合反相液相色谱的性质，除此之外，内表面键合相上的脉基还提供了氢键，静电作用等分子间作用力参与了小分子药物的保留过程，但这些作用较弱。从热力学角度分析，自制RAM柱对温度敏感，只有在298-308K范围内，RAM柱性能稳定，小分子药物在RAM柱上的保留过程是放热过程，低温有利于保留，并且证明了保留能力好的药物在RAM柱上的保留过程是自发的，而保留能力差的药物不是自发的。所以，自制RAM柱适用于疏水性强的药物，对其保留机理的研究能够使我们更加合理使用RAM，为后续RAM的合成提供实验依据。

摘要： 实验室自制RAM柱对小分子药物的保留主要是基于疏水作用，符合反相液相色谱的性质，除此之外，内表面键合相上的脉基还提供了氢键，静电作用等分子间作用力参与了小分子药物的保留过程，但这些作用较弱。从热力学角度分析，自制RAM柱对温度敏感，只有在298-308K范围内，RAM柱性能稳定，小分子药物在RAM柱上的保留过程是放热过程，低温有利于保留，并且证明了保留能力好的药物在RAM柱上的保留过程是自发的，而保留能力差的药物不是自发的。所以，自制RAM柱适用于疏水性强的药物，对其保留机理的研究能够使我们更加合理使用RAM，为后续RAM的合成提供实验依据。

摘要： 本发明公开了基于校准集化合物保留指数和误差反向传播网络构建的反相液相色谱保留指数的移植方法，以提高保留指数在不同方法间的移植效率和准确度，进而建立一种准确、灵活和通用的液相CRI数据库，提高了化学分析领域需要根据色谱保留信息进行方法移植和化合物鉴别的准确度。

摘要： 本发明属于分析领域，公开了一种氟雷拉纳中间体肟酸的反相高效液相色谱分析方法，通过使用乙腈水溶液溶解，之后以特定的反向高效液相色谱条件确定色谱图，根据色谱图计算出待测样品中氟雷拉纳中间体肟酸(4‑(羟基亚氨基)甲基)‑2‑甲基苯甲酸的含量。本发明提供的氟雷拉纳中间体肟酸的高效液相分析方法，检测灵敏度高，稳定性高，可靠性高，理论塔板数高，同时操作相对简单优点，能够有效测出氟雷拉纳中间体肟酸料肟酸含量，有利于保证氟雷拉纳中间体肟酸原料药及制剂的质量。

摘要： 本发明属分析化学领域，具体公开了采用中药中化合物评价不同反相模式色谱分离材料的方法，用中药中特征化合物人参皂苷类、酚酸类、生物碱类、环烯醚萜类、黄酮苷及苷元类的保留因子、选择性、峰形等参数表征不同反相模式色谱填料的性能，结合雷达图直观描述每种色谱材料的性质曲线，体现不同色谱填料的性质差异，指出新材料在中药提取物分离中的应用方向，实现中药样品分析材料的快速筛选。本方法采用中药实际样品进行新型色谱分离材料性质的评价，更贴近材料的实际应用。

摘要： 本发明涉及一种亲水作用色谱‑反相色谱组合二维液相系统及其分析方法，该系统包括亲水作用色谱柱、反相色谱柱、检测器、自动进样器、第一泵组件、第二色谱泵、第三色谱泵、混合器、样品环和切换阀；所述第一泵组件与所述亲水作用色谱柱接通，所述第二色谱泵和第三色谱泵分别与所述混合器接通，所述混合器与所述反相色谱柱接通；所述切换阀至少具备以下2种连接状态：连接状态1：将检测器的入口与亲水作用色谱柱的出口接通，并将样品环的两个端口分别与第二色谱泵、混合器接通；连接状态2：将检测器与反相色谱柱接通，并将样品环的两个端口分别与亲水作用色谱柱和系统外接通。该系统可实现对极性差异较大的多组分目标物的一次性分析。

摘要： 本发明涉及液相色谱技术领域，是一种在线亲水相互作用色谱/反相色谱串联接口装置；含有高压惰性气体源和相关减压及阀切换设备。具体的说就是，第一维色谱柱一端通过切换阀和管道与惰性气体（如氮气）减压阀和泵系统相连，另一端通过切换阀和管道与第二维色谱柱和废液相连；通过切换阀门，高压惰性气体置换第一维色谱柱中残留的溶剂，克服了在线串联中溶剂的不兼容问题，保证了样品在第二维色谱柱上的保留，从而实现亲水相互作用色谱和反相色谱之间的串联。该接口使用方便，操作简单，省时，高效，通用性强；由于亲水相互作用色谱/反相色谱的直接串联，可进行样品在线、快速的连续操作，降低样品的损失。

摘要： 本发明涉及一种亲水作用色谱‑反相色谱组合二维液相系统及其分析方法，该系统包括亲水作用色谱柱、反相色谱柱、检测器、自动进样器、第一泵组件、第二色谱泵、第三色谱泵、混合器、样品环和切换阀；所述第一泵组件与所述亲水作用色谱柱接通，所述第二色谱泵和第三色谱泵分别与所述混合器接通，所述混合器与所述反相色谱柱接通；所述切换阀至少具备以下2种连接状态：连接状态1：将检测器的入口与亲水作用色谱柱的出口接通，并将样品环的两个端口分别与第二色谱泵、混合器接通；连接状态2：将检测器与反相色谱柱接通，并将样品环的两个端口分别与亲水作用色谱柱和系统外接通。该系统可实现对极性差异较大的多组分目标物的一次性分析。

摘要： 本发明涉及液相色谱技术领域，是一种在线亲水相互作用色谱/反相色谱串联接口装置；含有高压惰性气体源和相关减压及阀切换设备。具体的说就是，第一维色谱柱一端通过切换阀和管道与惰性气体（如氮气）减压阀和泵系统相连，另一端通过切换阀和管道与第二维色谱柱和废液相连；通过切换阀门，高压惰性气体置换第一维色谱柱中残留的溶剂，克服了在线串联中溶剂的不兼容问题，保证了样品在第二维色谱柱上的保留，从而实现亲水相互作用色谱和反相色谱之间的串联。该接口使用方便，操作简单，省时，高效，通用性强；由于亲水相互作用色谱/反相色谱的直接串联，可进行样品在线、快速的连续操作，降低样品的损失。

摘要： 本发明公开了一种反相色谱固定相及其制备方法和应用，涉及液相色谱固定相技术领域，反相色谱固定相的结构式为：其中Silica Gel为硅胶，n＝0～10。所述反相色谱固定相的制备方法，通过巯基‑烯烃点击反应将截短侧耳素修饰到硅胶表面，制备得到新型反相色谱固定相。所述反相色谱固定相的能够应用于分离非极性化合物等物质。本发明提供的反相色谱固定相的结构新颖，制备方法简单高效，固定相中含水疏水骨架，同时多种官能团如酯基、羰基、羟基和硫醚键可提供不同的分离选择性，可广泛用于各类化合物的分离分析。

摘要： 本发明公开了一种用反相色谱法检测他克莫司软膏中杂质XV含量的方法，经过对高效液相色谱分析中的色谱柱、流动相等条件进行筛选，选用合适的缓冲溶液体系，采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料，以6mM磷酸的水溶液为溶液A，以乙腈‑叔丁基甲基醚（81:19）为溶液B，以溶液A‑溶液B（4:1）为溶液C，以溶液A‑溶液B（1:4）为溶液D，柱温为60°C；流速为1.8ml/min；检测波长为220nm；进样体积为50μl；按下表进行梯度洗脱，快速准确地实现了他克莫司软膏中杂质XV（OD‑1）含量的检测。

摘要： 本发明公开一种高效的利拉鲁肽的纯化分离方法，涉及一种色谱技术纯化利拉鲁肽的改进方法。本方法采用高效液相反相制备色谱技术对利拉鲁肽进行分离纯化，该制备方法以反相色谱填料为基质，对纯化工艺条件中重要参数进行优化，如缓冲盐种类、浓度、pH、流动相梯度及上样量等，使样品具有适当的保留和良好的峰形；采用优化后的纯化工艺可以获得高纯度利拉鲁肽。本发明方法具有高选择性、载样量大、收率高等优势，本发明所要解决的技术问题是现有制备方法分离纯化困难、产品的总收率和纯度低。本发明为缩短生产周期、降低生产成本、提高产品质量提供了一种新的方法。