反相离子对高效液相色谱法

摘要： 建立反相离子对高效液相色谱法测定猪肉中呈味核苷酸5'-尿苷酸二钠(5'-UMP)、5'-胞苷酸二钠(5'-CMP)、5'-鸟苷酸二钠(5'-GMP)、5'-肌苷酸二钠(5'-IMP)和5'-腺苷酸二钠(5'-AMP)含量的方法.应用ZORBAX SB-C18色谱柱,以0.01 mol/L KH2PO4溶液(含1.45 mmol/L四丁基硫酸氢铵,pH4.0)-乙腈(97∶3,V/V)为流动相进行洗脱,紫外检测器在254 nm处进行检测,外标法定量.结果表明,5种呈味核苷酸线性关系良好,相关系数均为0.9999,回收率在92.5％～106.0％范围内,相对标准偏差在1.75％～4.26％之间,5'-UMP、5'-CMP、5'-GMP、5'-IMP和5'-AMP检出限分别为2.0、2.0、2.0、3.0和3.0 mg/kg.该方法操作简便、灵敏度高、重现性好,适用于猪肉中呈味核苷酸含量的测定.

摘要： A method had been developed by Ion-pair RP-HPLC for simultaneous determination of eight water-soluble B vitamins (thiamine, ri-boflavin, niacin, pantothenic acid, pyridoxine, biotin, folic acid and cobalamin) in beer. The method had excellent linearity with the correlation coefficients over 0.9993. And its average spike recovery varied from 98.04%to 103.27%with RSD within the range of 0.32%~1.26%.%建立反相离子高效液相色谱同时分离检测硫胺素VB1，核黄素VB2，烟酸VB3，泛酸VB5，吡哆素VB6，生物素VB7，叶酸VB9，钴胺素VB12的分析方法。结果表明，B族维生素各组分线性良好，各线性相关系数都在0.9993以上；并用此方法测定啤酒中B族维生素。平均回收率为98.04%～103.27%，其RSD为0.32%～1.26%。

摘要： 通过菌悬液定量杀菌实验和亲和层析凝胶蛋白吸附量测定,最终从众多杀菌剂中筛选出一种既能有效杀死亲和层析介质中感染的细菌,又不影响其蛋白吸附量的理想杀菌剂苯扎氯铵;建立了利用反相离子对高效液相色谱测定层析柱中苯扎氯铵残留量的方法.采用C18色谱柱,流动相为乙腈-0.2 mol/L庚烷磺酸钠,于210 nm紫外波长下检测,检出限为0.000 25 mg/mL,实际样品中苯扎氯铵含量测定结果的相对标准偏差为0.63％,本方法具有良好的灵敏度和精密度.

摘要： Sample of selenium enriched yeast was extracted with Tris-HCl buffer solution of pH 7.5 by ultrasonic smashing for 30 min.Protein hydrolytic enzyme Pronase E was added to the extract,which was stirred at 37 °C for 18 h and separated by high speed centrifugation.The supernatant was taken and filtrated with Millipore Corp super-filtering membrane.Waters Symmetry Shield RP18 chromatographic column was used for separation of inorganic selenium (Ⅵ/ and 1Ⅳ) and organic selenium compounds of Selenocysteine,Selenourea and Selenomethionine.Mixtures of methanol and heptafluoro-butanoic acid mixed in different ratios were used as mobile phase in gradient elution for the 5 species of selenium.The eluates were used for ICP-MS determination.Linear relationships of the 5 species of selenium were kept in the same range within 100μg · L-1.The proposed method was applied to the analysis of sample of selenium-enriched yeast.It was found that:the amount of inorganic selenium was only amounting to 1.63％ of the total selenium.The major species of selenium existed in yeast was selenomethionine,amounting to 65％,which was easily absorbed and utilized by the human body.%富硒酵母样品用pH 7.5的Tris-盐酸缓冲溶液经超声破碎提取30 min,于提取液中加链霉蛋白酶E在37 °C搅拌18h,高速离心分离.取上清液经Millipore Corp超滤膜过滤,滤液中无机硒(Ⅵ及Ⅳ)和有机硒,即硒代半胱氨酸、硒代尿素和硒代蛋氨酸通过Waters Symmetry Shield RP18色谱柱分离.用不同比例混合的甲醇-七氟丁酸溶液作流动相进行梯度洗脱,用电感耦合等离子体质谱法在线测定洗脱液中各种形态硒的含量.5种形态硒的质量浓度均在100 μg·L1以内呈线性.应用此法分析了富硒酵母样品,结果表明:无机硒占总硒量的1.63％,65％的硒以易被人体吸收的硒代蛋氨酸形式存在.

摘要： 按6.82mg/kgobow大鼠单剂量口服臭豆碱,用RP-HPLC方法测定大鼠肝组织中不同时间点臭豆碱的浓度.方法:高效液相色谱法,色谱柱为大连产HYP-ODS柱(200mm×4.6mm,5mm),柱温30°C；流动相由水相-异丙醇-乙腈(150:15:20体积比)组成.水相部分每1000mL中含SDS 0.5g,三乙胺3.5mL,85％磷酸2mL(用三乙胺调至pH3.0)；流速1.0mL.min-1紫外检测波长309nm.结果:经DASver1.0药代动力学软件处理数据.结果表明,臭豆碱在肝组织符合一室模型,其动力学参数为:Tmax (2.5)min,Cmax (12095.84)· g/L,T1/2(118.55)min,T1/2ka (0.000)min,AUC (1807361.08)· g/L.min,Vd/F(15.256)L/kg,CL/F (0.009)L/min/kg.结论:口服给药臭豆碱后通过血管很快扩散到肝脏,具有消除快、无残留等特点.

摘要： 目的 建立黄连上清片(黄柏、黄连、大黄、连翘、薄荷、黄芩等)中盐酸小檗碱、盐酸巴马汀和盐酸药根碱的测定方法.方法 采用甲醇超声提取,反相离子对高效液相色谱法测定.C18色谱柱(250 mm ×4.6 nmn,5 μm)；柱温40°C；流动相为0.01 mol/L庚烷磺酸钠与0.01 mol/L磷酸二氢钾等量混合(用磷酸调pH为3.1)-乙腈(70:30)；体积流量为1.0mL/min;检测波长为345 nm,进样量为10 μL.结果 3种生物碱成分色谱分离行为良好,盐酸小檗碱、盐酸巴马汀和盐酸药根碱的线性范围分别为10.6711 ～64.0266 μg (r=0.999 99)、1.123 2～6.739 2μg(r=0.999 16)和1.198 8～7.1928μg(r =0.999 66)；平均回收率分别为99.66％、98.25％和97.40％,RSD分别为1.2％、0.6％和0.8％(n=6).结论 该方法简单易行,专属性强,准确性好,重复性好,可用于黄连上清片的质量控制.

摘要： 用反相离子对HPLC法测定盐酸林可霉素注射液中乙二胺四乙酸二钠的含量.Waters Symmetry C18柱,流动相:含12.5％甲醇和0.052％甲酸的水溶液(pH 3.5),检测波长为254nm,流速为1.0 mL· min-1,柱温为25°C.三批样品检测结果平均为0.001％.%This study is to establish a method for the determination of disodium edetate in lincomycin hydrochloride injection. The sample was separated on a Waters Symmetry C18 column. The mobile phase was an aqueous solution comprising 12.5% (v/v) methanol and 0.052% (vlv) formic acid (pH was adjusted to 3.5). The detection was carried out at 254 nm and a flow rate of 1.0 mL·min-1. The column temperature was 25°C. The average result was 0.001%.

摘要： OBJECTIVE To establish a reversed phase ion-pair HPLC method for the determination of the activity of nucleo-side diphosphate kinase (NDPK) in human red blood cells (RBC). METHODS RBC with reaction substrates (dADP and dGTP) and other reaction mixtures were incubated at 37 °C for 5 min.then inactivated by heating at 100 °C for 10 min.and cen-trituged with supernatant sample for analysis. dATP concentrations were quantified for the determination of the activity of NDPK in human RBC. Separation was achieved by SymmetryShield TM RP18(150 mm×3. 9 mm, 5 μm) with UV detection at 260 nm and column temperature of 25 t. Using gradient elution,the mobile phase A consisted of mixture of 20 tnmol·'L-1 KH2PO4--K2HPO4buffer solution and ion-pairing reagent 5 mmol·L-1TBAHS,and mobile phase B was acetonitrile. RESULTS NDPK could catalyze ADP + dGTP←→dATP + dGDP reaction specifically. The calibration curve was linear over the range of 4. 33 -43. 34 μmol·L-1 (r2 - 1.000) and the limit of quantitation was 4. 33 μmol·L-1. The intra- and inter-assay coefficients of variation were less than 5. 53% and 6. 69% , respectively. The mean analytical recoveries of dATP were 98. 4% - 104. 2% and the mean absolute recoveries were all more than 83%. A stability study showed that dATP samples in RBC were stable at room temperature or at 4 t for at least 24 hours,as well as for at least 30 days at - 80 °C after three freeze-thaw cycles. CONCLUSION This method is -simple,rapid,sensitive,specific,and can be applied to study the relationship between activity of NDPK and efficacy and toxicity of thiopurines.%目的:建立测定人体红细胞(RBC)内核苷二磷酸激酶( NDPK)活性的反相离子对高效液相色谱法.方法:稀释RBC中加入反应底物(dADP和dGTP)及其他反应混合液后,37°C孵育5 min,100°C灭活10 min,离心取上清液进样分析.以反应产物dATP定量分析NDPK活性.色谱柱为SymmetryShield TM RP18(150 mm×3.9mm,5μm),检测波长为260 nm,柱温为25°C；采用梯度洗脱,流动相A为20 mmol·L-1 KH2 PO4-K2 HPO4缓冲液、加入离子对试剂5mmol· L-1四丁基硫酸氢铵(TBAHS)溶液,流动相B为乙腈.结果:NDPK催化反应dADP+ dGTP←→dATP+ dGDP反应特异性良好,RBC内dATP的线性范围为4.33～43.34 μmol·L-1(r2=1.000),定量下限为4.33 μmol·L-1.日内及日间RSD分别小于5.53％和6.69％,准确度为98.4％～104.2％,平均绝对回收率大于83％；dATP样品在室温或4°C、- 80°C保存30d及反复冻融3次稳定性良好.结论:该法操作简便快速、灵敏、专属性强,可应用于人体RBC内NDPK活性测定,为研究NDPK活性与嘌呤类药物反应相关性提供基础.

摘要： Objective To develop an RP - HPLC method for the determination of edetate disodium dehydrate (EDTA) in Loteprednol and Tobramycin Ophthalmic Suspension. Methods After being diluted with 0. 02% copper sulfate pentahydrate water solution, samples were separated by HPLC on a C18(150 mm ×4. 6 mm, 5 μm) column. The mobile phase A is tetrabutylammonium hydroxide phosphate buffer solution ( 0. 2% tetrabutylammonium hydroxide water solution was adjusted pH to 3. 0 ± 0. 05 with 10% phosphoric acid water solution ) - acetonitrile (80: 20). The mobile phase B is acetonitrile. The mobile phases were gradient eluted. The detection wavelength was 280 nm. The colunm temperature is 30 °C. Results Calibration curve for EDTA is linear over range of 0.02-0. 10 g/L( r=1. 000 0, n = 6 ). And the average recovery is 100.52% , RSD = 0. 72% ( n = 6). Conclution The assay was proved to be sensitive, accurate and convenient with good resolution. It can be applied to control the quality of Loteprednol and Tobramycin Ophthalmic Suspension.%目的 建立反相离子对高效液相色谱法,测定氯替泼诺妥布霉素混悬滴眼液中乙二胺四乙酸二钠(EDTA)的含量.方法 色谱柱为DiedmaC18柱(150mmx4.6mm,5μm);流动相A为氢氧化四丁基铵磷酸盐缓冲液[取10%氢氧化四丁基铵水溶液31 mL,加水390mL,用磷酸(1→10)溶液调pH至(3.0±0.05),加水至1 600 mL]-已膊(80:20),流动相B为乙腈,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为280nm;拄温为30°C.结果 EDTA的质量浓度在0.02-0.10 g/L(r=1.000 0,n=6)范围内与峰面积线性关系良好;平均回收率为100.52%,RSD=0.72%(n=6).结论 该方法快速、灵敏,结果准确可靠,可作为氯替泼诺妥布霉素混悬滴眼液的质量控制项目之一.

摘要： 目的:建立HPLC法同时测定复方苯甲酸软膏中苯甲酸和水杨酸含量的方法.方法:使用ZORBAX Eclipse XDB-C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-水(78∶22)[含十六烷基三甲基溴化铵(HDTA)0.001 5 mol·L-1,用稀醋酸调pH至5],柱温为30°C,流速为1.0 ml· min-1,检测波长为280 nm.结果:苯甲酸和水杨酸的线性范围分别为:49.5 ～495.2 μg· ml-1 (r=1.000),24.3 ～243.2 μg·ml-1 (r=1.000)；平均回收率分别为99.8％,99.9％；RSD分别为0.99％,0.87％.结论:该方法快速,简便,灵敏,分离度好,适用于控制产品质量.%Objective: To establish an ion-pair RP-HPLC method for the determination of benzoic acid and salicylic acid in compound benzoic acid ointments. Method; A ZORBAX Eclipse XDB-C18 column ( 150 mm x4. 6 mm,5 μm) was used. The mobile phase was methanol-water (78: 22,including HDTA 0. 001 5 mol·L-1 .adjusting pH to 5. 0 with dilute acetic acid) and the column temperature was 30°C. The flow rate was 1. 0 ml·min~' and the detection wavelength was 280 nm. Resu The linear range of benzoic acid and salicylic acid was 49.5-495.2μg·ml-1 (r= 1.000) and 24.3-243.2μg·ml-1 (r= 1.000) with average recovery of 99. 8% (RSD =0.99% ) and 99.9% (RSD =0. 87% ),respectively. Conclusion; The method is simple, sensitive,accurate and suitable to control the preparation quality.

摘要： 目的:建立应用超声萃取反相离子对高效液相色谱法测定食品中亚硝酸盐和硝酸盐含量的方法。方法:食品样品经温水浴,超声萃取,去脂肪和沉淀蛋白后,进样20μl,以甲醇-混合磷酸盐(1.25mmol/L NaHPO和1.25mmol/L KHPO及内含4mmol/L四丁基溴化铵)(体积比为20:80)为流动相,流速为1.0ml/min,经Gemini C色谱柱(250×4.6mm×5μm)柱分离,225nm检测。结果:亚硝酸盐、硝酸盐完全分离,R>1.5,在0.20～100.00mg/L范围内呈线性关系,相关系数大于0.9995,检出下限分别为0.08mg/L,0.10 mg/L,回收率在97.4﹪～101.9﹪之间。结论:本方法准确、灵敏,操作简便.同时测定硝酸盐和亚硝酸盐,适合于食品样品中硝酸盐和亚硝酸盐的测定。

摘要： 该文研究了反相离子对高效液相色谱法分离化工产品苯胺－２，５－双磺酸。以含０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸氢二钠和５．０ｍｍｏｌ／Ｌ溴化四丁基铵的甲醇：水［１５：８５（ｖ／ｖ），ｐＨ＝５．５］为流动相。在６．０ｍｍ，１５０ｍｍ Ｓｈｉｍｐａｃｋ ＣＬＣ－ＯＤＳ（５μｍ 粒径）色谱柱上分离。２３分钟内混合物全部洗脱。此方法简便、 快速、高效且重现性好。

摘要： 本发明涉及一种控制用于控制针对液相色谱法尤其是高效液相色谱法的活塞泵单元的控制装置。活塞泵单元具有相位错开地以不同相位循环地工作的至少两个活塞-缸体单元，活塞-缸体单元在出口端口上产生待输送溶液的预定的流动，在出口端口处，基于与该出口端口处相关的流动负载阻力而产生系统压力，控制装置在活塞运动方面对用于至少两个活塞-缸体单元的驱动装置的驱动设备进行控制，在至少两个活塞-缸体单元中的每一个活塞-缸体单元的一个循环的压缩阶段中，实现介质的从出口压力到系统压力的非等温压缩，按照从输出压力到系统压力的方式完成介质的非等温压缩，在紧接的至少也由相关的那个活塞-缸体单元确定流动的输送阶段中，在压缩阶段中被加热的介质在输送阶段的补偿阶段被冷却，在相关的那个活塞-缸体单元的循环的紧接着输送阶段的减压阶段中，实现介质的从系统压力到环境压力的非等温或绝热膨胀，在相关的那个活塞-缸体单元的紧接的填充阶段中，待输送的介质被送入相关的那个活塞-缸体单元的缸体容积内，或者被活塞-缸体单元吸入。控制装置被构造成用于获得至少两个活塞-缸体单元的至少一个第一活塞-缸体单元的缸体容积中的压力。控制装置在第一活塞-缸体单元的压缩阶段的测量阶段或者在第一活塞-缸体单元的减压阶段的测量阶段中，使得用于第一活塞-缸体单元的驱动设备停止运转预定的时间段，并由此获得表征压力随时间变化曲线的测量数据。控制装置利用在测量阶段中获得的用于确定修正关系scorr(t)的测量数据，对至少两个活塞-缸体单元中的至少一个活塞-缸体单元在补偿阶段的活塞运动进行修正，并且在使用修正关系的情况下在补偿阶段控制至少两个活塞-缸体单元中的至少一个活塞-缸体单元，使得因热补偿过程而造成的流动波动基本上得到补偿。

摘要： 本发明公开了一种利用高效离子交换色谱法分析牛乳制品中未变性α-乳白蛋白和β-乳球蛋白成分的方法，包括样品预处理、样品测定和含量分析三个步骤，其特征在于：所述样品测定步骤中流动相的选择为A泵：0.02mol/L pH8.2的Tris- HCl；B泵：0.02mol/L pH8.2的Tris- HCl+0.5 mol/L NaCl。本发明采用高效液相离子交换色谱法对乳制品中未变性α-乳白蛋白和β-乳球蛋白成分分析测定,方法重现性良好，且可以很好的反映出α-乳白蛋白和β-乳球蛋白成分。

摘要： 本发明提供一种单片聚合物基质用于液相层析分离生物-有机分子。在一实例中，基质是从含以下物质的混合物聚合形成的：(i)疏水单体，(ii)交联剂和(iii)成孔溶剂或成孔成分的混合物。本发明的单片基质特别适用于以反相离子对层析方法从样品中分离多核苷酸(如DNA和/或RNA)。

摘要： 一种同时测定对克里西丁磺酸及其原料含量的液相色谱法，其特征是采用反相离子对色谱法，高效液相色谱条件为：色谱柱：C

摘要： 本发明公开了一种反相离子对高效液相色谱测定盐酸林可霉素注射液中乙二胺四乙酸二钠含量的方法。该方法的色谱条件为：色谱柱：Waters Symmetry C18(4.6mm×150mm，5μm)；流动相：甲醇和甲酸的水溶液；检测波长：254nm；流速：1.0mL/min；柱温：25°C；进样量：50μL。本发明的反相离子对高效液相色谱测定盐酸林可霉素注射液中乙二胺四乙酸二钠含量的方法与其他的检测方法相比，避免了出现倒峰及因络合太快造成杂质峰与主峰无法分离的问题；相比其他测定方法更简洁、灵敏，稳定性和选择性更高，更经济有效。

摘要： 本发明涉及一种控制用于控制针对液相色谱法尤其是高效液相色谱法的活塞泵单元的控制装置。活塞泵单元具有相位错开地以不同相位循环地工作的至少两个活塞-缸体单元，活塞-缸体单元在出口端口上产生待输送溶液的预定的流动，在出口端口处，基于与该出口端口处相关的流动负载阻力而产生系统压力，控制装置在活塞运动方面对用于至少两个活塞-缸体单元的驱动装置的驱动设备进行控制，在至少两个活塞-缸体单元中的每一个活塞-缸体单元的一个循环的压缩阶段中，实现介质的从出口压力到系统压力的非等温压缩，按照从输出压力到系统压力的方式完成介质的非等温压缩，在紧接的至少也由相关的那个活塞-缸体单元确定流动的输送阶段中，在压缩阶段中被加热的介质在输送阶段的补偿阶段被冷却，在相关的那个活塞-缸体单元的循环的紧接着输送阶段的减压阶段中，实现介质的从系统压力到环境压力的非等温或绝热膨胀，在相关的那个活塞-缸体单元的紧接的填充阶段中，待输送的介质被送入相关的那个活塞-缸体单元的缸体容积内，或者被活塞-缸体单元吸入。控制装置被构造成用于获得至少两个活塞-缸体单元的至少一个第一活塞-缸体单元的缸体容积中的压力。控制装置在第一活塞-缸体单元的压缩阶段的测量阶段或者在第一活塞-缸体单元的减压阶段的测量阶段中，使得用于第一活塞-缸体单元的驱动设备停止运转预定的时间段，并由此获得表征压力随时间变化曲线的测量数据。控制装置利用在测量阶段中获得的用于确定修正关系scorr(t)的测量数据，对至少两个活塞-缸体单元中的至少一个活塞-缸体单元在补偿阶段的活塞运动进行修正，并且在使用修正关系的情况下在补偿阶段控制至少两个活塞-缸体单元中的至少一个活塞-缸体单元，使得因热补偿过程而造成的流动波动基本上得到补偿。

摘要： 本发明属于高效液相色谱法分析技术领域，具体提供一种应用高效液相离子色谱法检测牛蒡含片中水解菊糖成分的方法，对牛蒡含片进行水解后得到牛蒡菊糖水解液，对水解液进行脱色后注入高效液相色谱仪，得到菊糖充分水解后各组分的色谱图。优化了牛蒡菊糖含片中功能性低聚糖的生产工艺参数，对生产实践具有现实的指导意义，尤其弥补了紫外风光光度计法对产品品质检测灵敏度较低，不适合复杂成分的样品检测的缺陷。

摘要： 本发明公开了一种利用高效离子交换色谱法分析牛乳制品中未变性α-乳白蛋白和β-乳球蛋白成分的方法，包括样品预处理、样品测定和含量分析三个步骤，其特征在于：所述样品测定步骤中流动相的选择为A泵：0.02mol/LpH8.2的Tris-HCl；B泵：0.02mol/LpH8.2的Tris-HCl+0.5mol/LNaCl。本发明采用高效液相离子交换色谱法对乳制品中未变性α-乳白蛋白和β-乳球蛋白成分分析测定，方法重现性良好，且可以很好的反映出α-乳白蛋白和β-乳球蛋白成分。

摘要： 本发明提供一种单片聚合物基质用于液相层析分离生物－有机分子。在一实例中，基质是从含以下物质的混合物聚合形成的：(ⅰ)疏水单体，(ⅱ)交联剂和(ⅲ)成孔溶剂或成孔成分的混合物。本发明的单片基质特别适用于以反相离子对层析方法从样品中分离多核苷酸(如DNA和/或RNA)。

摘要： 一种用反相离子对高效液相色谱法测定替莫唑胺酯栓剂含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）对照品溶液的制备；（2）供试品溶液的制备；（3）含量测定：吸取对照品溶液，供试品溶液，各10-20μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，根据色谱图的峰面积，计算供试品中替莫唑胺酯的含量。