numb

摘要： 目的观察柔肝化纤颗粒抑制大鼠肝纤维化活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、4-羟基壬烯酸(4-HNE)的生成及转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))、Numb表达的影响,探究柔肝化纤颗粒抗肝纤维化的作用机制。方法采用经典CCl_(4)复合因素制备大鼠肝纤维化模型72只,随机分为模型组、秋水仙碱组阳性对照组,造模成功后予柔肝化纤颗粒低剂量(2 mg/kg)、中剂量(4 mg/kg)、高剂量(8 mg/kg)进行灌胃,每周3次,共8周。在药物治疗8周后,处死大鼠,留取各组大鼠肝脏组织和血清。采用HE及Masson染色观察各组治疗后组织形态学变化;采用比色法检测血清中活性氧(ROS)水平;采用硫代巴比妥酸(TBA)法检测肝组织匀浆中MDA、4-HNE含量;采用qPCR、Western Blot方法检测各组大鼠肝组织中TGF-β_(1)、Numb的表达水平。结果柔肝化纤颗粒可明显改善大鼠肝纤维化,并非呈剂量依赖型;模型组大鼠血清ROS水平明显高于其他各组,柔肝化纤颗粒可显著降低血清中ROS水平(P<0.05),柔肝化纤颗粒各剂量组大鼠肝组织中MDA、4-HNE含量明显低于模型组(P<0.01或P<0.05);柔肝化纤颗粒可明显抑制TGF-β_(1)、Numb的表达(P<0.01)。结论柔肝化纤颗粒具有抗肝纤维化作用,其机制可能是通过抑制肝脏脂质过氧化物生成及TGF-β_(1)和Numb表达相关。

摘要： 目的 探讨Numb对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)复合物1(mTORC1)信号通路活性的影响及潜在的分子机制。方法建立Numb-siRNA转染和/或顺铂诱导的雄性BALB/c小鼠急性肾损伤模型,分为4组:NC-siRNA、Numb-siRNA、NC-siRNA+顺铂、Numb-siRNA+顺铂。免疫组化检测肾脏Numb、Megalin的表达与分布;Western blot检测各组动物肾脏中Numb、S6、p-S6、S6K1、p-S6K1、4EBP1、p-4EBP1的蛋白表达。分离培养Numb-siRNA转染的小鼠原代近端肾小管上皮细胞。体外建立Numb-siRNA转染和/或氨基酸刺激的大鼠肾小管上皮NRK-52E细胞模型,分为NC-siRNA组、Numb-siRNA组、NC-siRNA+氨基酸刺激组和Numb-siRNA+氨基酸刺激组。Western blot检测各组细胞Numb、S6、p-S6的蛋白表达,检测沉默Numb表达前后的NRK-52E细胞、小鼠肾脏及原代近端肾小管上皮细胞中AMPK、p-AMPK的蛋白表达。V1G1过表达及空白对照慢病毒感染、Numb-siRNA转染和/或氨基酸刺激NRK-52E细胞,分为NC-siRNA+空载慢病毒+氨基酸刺激组、Numb-siRNA+空载慢病毒+氨基酸刺激组及Numb-siRNA+V1G1过表达慢病毒+氨基酸刺激组;Western blot检测V1G1、S6、p-S6的蛋白表达。结果 与NC-siRNA组相比,Numb-siRNA组小鼠肾脏近端肾小管上皮细胞Numb及p-S6的蛋白表达均下调(P<0.05),但不影响近端小管标记蛋白Megalin的表达与分布;与对照组小鼠相比,顺铂处理组小鼠肾脏p-S6K1及p-4EBP1的蛋白表达均上调(P<0.05),而Numb-siRNA处理组小鼠抑制顺铂介导的p-S6K1及p-4EBP1的蛋白表达水平的上调(P<0.05)。在NRK-52E细胞中,与氨基酸饥饿组相比,氨基酸刺激组细胞p-S6的蛋白表达上调(P<0.05),而转染Numb-siRNA的细胞中Numb及p-S6的蛋白表达较对照组均下调(P<0.05);在Numb表达水平下调的NRK-52E细胞、小鼠肾脏及小鼠原代近端肾小管上皮细胞中,p-AMPK的蛋白表达均下调(P<0.05);在Numb表达水平下调的NRK-52E细胞中,V1G1的蛋白表达下调(P<0.05),上调NRK-52E细胞中V1G1的蛋白表达,可以逆转Numb沉默介导的p-S6的降低(P<0.05)。结论 Numb可通过上调V1G1的蛋白表达促进近端肾小管上皮细胞m TORC1信号通路的活化。

摘要： 胰腺癌是一种常见的消化道肿瘤,恶性程度高,预后极差。目前针对胰腺癌有多种治疗方案,但效果均不太理想。阐明胰腺癌发病机制仍是临床亟需解决的重要难题。可变剪接是真核生物基因表达调控的重要手段,同一基因的剪接异构体介导产生不同生物学表型,其异常可导致诸多疾病的产生。Numb,一种重要的细胞命运决定蛋白,其可变剪接近年来被发现与癌症的发生密切相关。在胰腺癌中Numb的选择性剪接可产生多种不同亚型的Numb蛋白,对癌症相关通路的活化以及肿瘤细胞生物学行为具有不同的调节作用,探索Numb的剪接异构体在胰腺癌中不同功能有利于解释胰腺癌发病机理和新疗法的开发。本文就Numb蛋白在胰腺癌中研究进展进行综述,着重探讨其剪接异构体功能特点以及不同亚型对胰腺癌各方面的调节作用。

摘要： 目的:研究miR-182对结直肠癌细胞HT-29增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其机制.方法:运用qRT-PCR检测人正常结肠上皮细胞HCoEpiC、结直肠癌细胞HT-29中miR-182、NUMB的表达;将anti-miR-con组(转染anti-miR-con)、anti-miR-182组(转染anti-miR-182)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-NUMB组(转染pcDNA-NUMB)、anti-miR-182+si-con组(anti-miR-182和si-con共转染)、anti-miR-182+si-NUMB组(anti-miR-182和si-NUMB共转染)均用脂质体法转染HT-29细胞;West-ern blot检测各组细胞中NUMB的蛋白表达;Transwell检测各组细胞的迁移和侵袭;MTT法检测各组细胞的增殖;双荧光素酶报告基因检测实验检测各组细胞的荧光素酶活性.结果:与人正常结肠上皮细胞HCoEpiC相比,结直肠癌细胞HT-29中miR-182表达显著升高,NUMB表达显著降低(P<0.05);抑制miR-182、过表达NUMB均可下调HT-29细胞的增殖、迁移、侵袭;NUMB是miR-182的靶标.敲减NUMB可逆转抑制miR-182对HT-29细胞增殖、迁移、侵袭的下调作用.结论:miR-182可促进结直肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭,其机制可能与靶向NUMB有关,将可为miR-182靶向治疗结直肠癌提供依据.

摘要： 目的 探讨NUMB对胆囊癌细胞NOZ和GBC-SD的增殖和迁移的作用.方法 应用RNA干扰技术敲低人胆囊癌细胞NOZ和GBC-SD中NUMB的表达,将人胆囊癌细胞NOZ和GBC-SD分别分为实验组(si-NUMB组)和对照组(CTRL组),其中si-NUMB组转染si-NUMB,CTRL组转染阴性对照剂si-NC.采用CCK-8法检测两组细胞的增殖能力[吸光度(OD)值来表示];采用Transwel小室实验检测两组细胞的迁移能力;采用Western blot法检测NUMB及上皮间质转化关键蛋白的表达水平.结果 NOZ细胞中,与CTRL组相比,si-NUMB组中的OD值在第2、3、4、5天时均明显为高(均P<0.05);GBC-SD细胞中,与CTRL组相比,si-NUMB组中的OD值在第3、4、5天时均明显为高(均P<0.05).与CTRL组比较,si-NUMB组中人胆囊癌NOZ和GBC-SD细胞的迁移细胞的数量均明显升高(均P<0.05).与CTRL组相比,NOZ和GBC-SD细胞在si-NUMB组中NUMB、E-cadherin蛋白表达水平均明显为低而Snail-1、N-cadherin蛋白表达水平均明显为高(均P<0.01).结论 NUMB能够抑制胆囊癌细胞的增殖和迁移能力,可能作为胆囊癌治疗的靶标.

摘要： BACKGROUND The role of the Notch pathway in carcinogenesis and tumor progression has been demonstrated in many organs,including the colon.Accordingly,studies aimed at developing therapies targeting this pathway in various cancers require the identification of several factors that may play a role in regulating Notch-1 expression.Although Numb,Itch,and seven in absentia homolog-1(Siah-1)have been shown to contribute to the regulation of Notch signaling,their role in colorectal carcinogenesis and tumor progression has not been fully elucidated to date.AIM To evaluate Numb,Itch,and Siah-1 expression in colorectal tumors to clarify their relationship with Notch-1 expression and their role in carcinogenesis and tumor behavior.METHODS Expression of Notch-1,Numb,Itch,and Siah-1 was investigated in 50 colorectal carcinomas,30 adenomas,and 20 healthy colonic tissues by immunohistochemistry and quantitative real-time polymerase chain reaction(PCR)analyses.RESULTS In contrast to Notch-1,which is expressed at higher levels in tumor tissues and adenomas,expression of Numb,Itch,and Siah-1 was stronger and more frequent in normal mucosa(P<0.01).There was a positive correlation between Notch-1 expression and high histological grade,the presence of lymph node metastasis,and advanced-stage tumors,whereas expression of Numb,Itch,and Siah-1 was absent or reduced in tumors with these clinicopathological parameters(P<0.05).In survival analysis,expression of Notch was related to poor prognosis but that of Numb,Itch,and Siah-1 correlated with improved survival(P<0.05).Multivariate analysis revealed Notch-1 expression and loss of Numb expression to be independent prognostic parameters together with lymph node metastasis(P<0.05).CONCLUSION Our findings support the role of Notch-1 in colorectal carcinoma and indicate that loss of Numb,Itch,and Siah-1 expression is associated with carcinogenesis.Our data also suggest that these three proteins might be involved in the Notch-1 pathway during colorectal carcinoma(CRC)progression and might play an essential role in approaches targeting Notch as novel molecular therapies for CRC.

摘要： 肝纤维化是机体对创伤修复的应答反应,是各种慢性肝病走向肝硬化的必经之路,目前尚无阻断或逆转肝纤维化的化学或生物药品上市.肝纤维化的发病机制十分复杂,涉及TGFβ/Smad、Notch、Wnt、Hedgehog等多种信号通路,但如何执简驭繁仍然是治疗领域面临的关键问题.Numb,一个非常关键的细胞命运决定因子,参与Notch、Wnt、Hedgehog等信号通路的调控,但其在抗肝纤维化中的作用尚未得到充分重视,综述了Numb在抗肝纤维化中的潜在应用价值.

摘要： Numb起初被描述为果蝇感觉器官发育过程中的细胞表型决定因子,是一种单次跨膜蛋白,含有磷酸酪氨酸结合结构域(PTB)、脯氨酸富含区结构域(PRR),根据2种结构域的长度不同,哺乳动物存在4种不同的亚型.Numb不仅参与神经元分化的调节、突触形成与再生,还可调节Notch信号通路及淀粉样前体蛋白转运,参与阿尔茨海默病的病理生理过程.

摘要： 目的:探究miR-129在乳腺癌中对肿瘤干细胞自我更新能力的调控作用及其机制.方法:应用免疫组化检测乳腺癌肿瘤干细胞在肿瘤组织与癌旁组织中的数量及其与乳腺癌肿瘤分期的关系,验证miR-129和Numb与乳腺癌肿瘤干细胞之间的相关关系.在体外实验中应用Western Blotting及RT-PCR验证miR-129通过阻断雌激素受体alpha(ER alpha,ESR1)对Notch信号通路的调节作用及其调节的具体机制;应用裸鼠成瘤实验验证miR-129在裸鼠体内水平对乳腺癌肿瘤干细胞的影响.结果:肿瘤组织中乳腺癌肿瘤干细胞的比例高于癌旁组织并与肿瘤分期具有相关性;乳腺癌肿瘤干细胞比例与临床样本中miR-129和Numb的表达水平呈负相关;乳腺癌肿瘤干细胞中miR-129的过表达与Notch信号通路的抑制直接相关,这种作用很可能是miR-129通过调控ESR1所引起的Let-7b的表达下调进而导致Numb的释放来实现的;miR-129在裸鼠体内实验中可以抑制乳腺癌肿瘤干细胞的成瘤.结论:miR-129在乳腺癌组织中可以通过调控Notch信号通路影响乳腺癌肿瘤干细胞自我更新的能力,具体的调节机制可能是通过调控ESR1所引起的Let-7b的表达下调进而导致Numb的释放来最终抑制Notch信号通路的激活.

摘要： 本发明涉及Numb或其上调剂在制备治疗肝纤维化、肝硬化或促进肝实质细胞再生的药物中的应用。本发明使用RNA干扰技术诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)的Numb基因敲减/过表达后注射入肝纤维化大鼠体内观察其作用，还使用RNA干扰技术促使肝卵圆细胞(WB‑F344)的Numb基因敲减，观察细胞的变化。结果证实，Numb敲减后促进WB‑F344细胞向胆管细胞表型分化，还促进BMSCs向胆管上皮细胞分化并显著促进肝纤维化的发展；而Numb过表达则促进BMSCs向肝细胞分化，促进纤维化肝脏修复。因此，Numb基因为治疗肝纤维化、肝硬化或促进肝实质细胞再生的靶基因。

摘要： 本发明公开了NUMB基因用于筛选哈萨克马泌乳性能检测试剂盒及其应用，利用本发明检测试剂盒通过检测GA和GG等位基因，用于选育提高哈萨克马泌乳性能，检测试剂盒有六个区，包括96孔板区、枪头区、采血管区、DNA提取试剂区、PCR扩增试剂区和Marker区均为扇形区域，根据自行设计特异性引物，以样本基因组DNA为模板进行PCR扩增，对PCR扩增产物后进行KASP分型；本发明不仅填补了国内外这一研究领域的空白，而且对于提高哈萨克马泌乳量水平、提高农牧民经济收入、加快新疆乳用马业发展具有实际应用价值，为新疆畜牧业的可持续发展提供了科学服务的平台。

摘要： 本发明公开了一种肝肠胆固醇吸收的关键蛋白质Numb及其用途。具体地，公开了Numb蛋白抑制剂在调节胆固醇吸收中的用途，以及Numb蛋白与NPC1L1蛋白相互结合的抑制剂的用途。本发明还公开了一种NPC1L1突变蛋白，该突变因不能与Numb相互结合从而减少NPC1L1蛋白介导的胆固醇吸收。

摘要： MSI2‑Numb结合代谢分子测定胰腺癌进展的方法，所属检测技术领域，方法包括肿瘤组织切术阶段检测和血液预后阶段检测。肿瘤组织切术阶段检测包括肿瘤组织细胞预处理、测定肿瘤组织Musashi2、测定肿瘤组织Numb、测定血液代谢分子及判定；血液预后阶段检测包括测定血液Musashi2、测定血液Numb、测定血液代谢分子及预后；本发明提供MSI2‑Numb结合代谢分子测定胰腺癌进展的方法，能够通过测定Musashi2和Numb在胰腺癌组织中表达结合血液检测来进行胰腺癌病情进展筛查，能够客观评估肿瘤临床进展、耐药性及不良预后，有助于拟定最佳治疗方案，检测精度比现有检测方法提高20％。

摘要： 本发明涉及Numb或其上调剂在制备治疗肝纤维化、肝硬化或促进肝实质细胞再生的药物中的应用。本发明使用RNA干扰技术诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)的Numb基因敲减/过表达后注射入肝纤维化大鼠体内观察其作用，还使用RNA干扰技术促使肝卵圆细胞(WB‑F344)的Numb基因敲减，观察细胞的变化。结果证实，Numb敲减后促进WB‑F344细胞向胆管细胞表型分化，还促进BMSCs向胆管上皮细胞分化并显著促进肝纤维化的发展；而Numb过表达则促进BMSCs向肝细胞分化，促进纤维化肝脏修复。因此，Numb基因为治疗肝纤维化、肝硬化或促进肝实质细胞再生的靶基因。

摘要： 本发明属于生物技术领域，涉及检测NUMB表达水平的试剂的应用和试剂盒。更具体地，涉及检测NUMB表达水平的试剂在制备用于乳腺癌辅助诊断和/或乳腺癌患者预后判断的制剂中的应用以及一种用于乳腺癌辅助诊断和/或乳腺癌患者预后判断的试剂盒。临床样本检测结果显示，乳腺癌中NUMB表达较癌旁组织显著降低；且NUMB低表达不利于乳腺癌患者总体生存。因此，检测该基因表达变化的试剂可用于乳腺癌预后或者诊断、治疗。

摘要： 本发明公开了NUMB基因用于筛选哈萨克马泌乳性能检测试剂盒及其应用，利用本发明检测试剂盒通过检测GA和GG等位基因，用于选育提高哈萨克马泌乳性能，检测试剂盒有六个区，包括96孔板区、枪头区、采血管区、DNA提取试剂区、PCR扩增试剂区和Marker区均为扇形区域，根据自行设计特异性引物，以样本基因组DNA为模板进行PCR扩增，对PCR扩增产物后进行KASP分型；本发明不仅填补了国内外这一研究领域的空白，而且对于提高哈萨克马泌乳量水平、提高农牧民经济收入、加快新疆乳用马业发展具有实际应用价值，为新疆畜牧业的可持续发展提供了科学服务的平台。

摘要： 本发明公开了NUMB在绝经后妇女原发性骨质疏松症诊断或预后中的用途。本发明通过检测发现NUMB在正常绝经女性和绝经后妇女原发性骨质疏松症患者的血液中的表达存在差异，基于NUMB与绝经后妇女原发性骨质疏松症的相关性，将NUMB认作是用于绝经后妇女原发性骨质疏松症诊断和预后判断的分子标志物。作为一种无创性的绝经后妇女原发性骨质疏松症诊断和预后方法，该分子标志物在临床上具有广泛的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种肝肠胆固醇吸收的关键蛋白质Numb及其用途。具体地，公开了Numb蛋白抑制剂在调节胆固醇吸收中的用途，以及Numb蛋白与NPC1L1蛋白相互结合的抑制剂的用途。本发明还公开了一种NPC1L1突变蛋白，该突变因不能与Numb相互结合从而减少NPC1L1蛋白介导的胆固醇吸收。

摘要： 本发明公开了一种稳定敲低Numb和Numblike的细胞系，包括真核表达载体，所述真核表达载体包括用于抑制Numb表达的序列、以及U6启动子和用于抑制Numb Numblike表达的序列。这种稳定敲低Numb和Numblike的细胞系，通过抑制Numb和Numblike的mRNA的转录，以明显降低Numb和Numblike的蛋白表达量。该稳定表达细胞系的建立，不仅成功在体外模拟了乳腺癌细胞Numb和Numblike的表达状态为研究Numb和Numblike在乳腺癌中的作用提供了模型，而且也为Numb和Numblike的功能的研究提供了帮助。本发明还提供一种上述定敲低Numb和Numblike的细胞系的构建方法。