NS-398

摘要： 目的 研究环氧化酶抑制剂NS-398联用奥沙利铂(L-OHP)对宫颈癌HeLa细胞的抑制及诱导凋亡作用.方法 体外培养人宫颈癌HeLa细胞,CCK-8法检测不同浓度NS-398(0、30、60μmol/L),L-OHP(0.0、2.5、5.0、10.0 mg/L)单独作用及联合作用于HeLa细胞后对细胞的抑制作用;将HeLa细胞随机分为:对照组、NS-398组(60μmol/L)、L-OHP组(10 mg/L)及联合组(NS-39860μmol/L+L-OHP 10 mg/L),倒置显微镜观察HeLa细胞形态改变,罗丹明染色观察HeLa细胞凋亡情况,流式细胞仪检测HeLa细胞早期凋亡率,DNA琼脂糖凝胶电泳检测梯状条带.结果 CCK-8结果显示,与未加药物组比较,NS-398单药组和L-OHP单药组抑制率增高;联合组抑制率高于NS-398单药组和L-OHP单药组(均P<0.01).对照组细胞状态良好,形态呈梭形,贴壁生长,细胞边缘清晰,胞膜完整.NS-398组细胞体积皱缩变小变圆,胞质内出现颗粒状物质,少量细胞从瓶底脱落,漂浮于培养液中.L-OHP组细胞失去正常形态,皱缩变小,培养液中可见死细胞.联合组培养液中可见大量死细胞和细胞碎片,仅余少量细胞贴在瓶底,且形态呈不同程度的皱缩,部分细胞破裂,细胞内容物溢出.罗丹明123染色结果显示,对照组无荧光;NS-398组、L-OHP组与联合组荧光强度增强,尤其以联合组最为明显.流式细胞仪检测结果显示,NS-398组和L-OHP组凋亡率明显高于对照组;联合组凋亡率明显高于NS-398组、L-OHP组(均P<0.01).DNA电泳显示,联合组出现了明显的梯状条带,NS-398组和L-OHP组有明显的弥散现象出现;对照组即无弥散现象也无梯状条带出现.结论 NS-398能够增强L-OHP对HeLa细胞的生长抑制作用和诱导凋亡作用.

摘要： 目的 探讨选择性环氧合酶-2 (COX-2)抑制剂NS-398联合光动力疗法(PDT)对人胆管癌细胞QBC939凋亡的影响及其作用机制.方法 将QBC939进行体外培养,人胆管癌QBC939细胞来源于上海中科院细胞库,采用随机化分组法进行分组,培养72 h后进行细胞计数盒-8(CCK-8)实验.实验分为4组,即单纯NS-398组、单纯PDT组、联合实验组和空白对照组,分别将0、25、50、100、200 μmol/L浓度的NS-398和0、2、4、6、8、10 mg/L浓度的血卟啉衍生物(HPD)在0、5、10、15 J/cm2的光照强度作用下,分别依次联合作用于QBC939细胞;运用CCK-8法检测各组的细胞生长抑制率(R);采用流式细胞法检测QBC939细胞的凋亡率(A);应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测QBC939细胞中COX-2和血管内皮生长因子-C(VEGF-C)的基因表达情况;采用免疫细胞化学链霉亲和素-过氧化物酶结合物(SP)法测定QBC939细胞质中COX-2和VEGF-C的蛋白表达情况;应用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定QBC939细胞上清中COX-2和VEGF-C的蛋白分泌情况,组间比较进行单因素方差分析.结果 NS-398和PDT两种措施在体外均能单独抑制QBC939细胞生长,当NS-398浓度为50 μmol/L,HPD浓度为8 mg/L、光照强度为5 J/cm2联合作用后,R可达95％,联合实验组与单纯NS-398组、单纯PDT组和空白对照组比较差异均有统计学意义,继续上调两者的强度,R变化不明显;流式细胞实验中联合实验组A为(55.19±1.14)％,与空白对照组(5.57±1.21)％、单纯NS-398组(19.55±1.06)％和单纯PDT组(18.62±1.18)％比较差异均有统计学意义(F=6 153.000,P＜0.05);荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)结果可见COX-2在联合实验组(0.21±0.02)中表达量明显低于空白对照组(1.00±0.00)、单纯NS-398组(0.32±0.03)和单纯PDT组(0.35±0.02),差异均有统计学意义(F=8 446.182,P＜0.05),VEGF-C在联合实验组(0.23±0.01)中表达量明显低于空白对照组(1.00±0.00)、单纯NS-398组(0.36±0.02)和单纯PDT组(0.38±0.03),差异均有统计学意义(F=8 571.895,P＜0.05);SP免疫细胞化学结果表明COX-2在联合实验组[(4.96±0.42)％中]表达量明显低于空白对照组[(55.12±0.87)％]、单纯NS-398组[(21.26±0.49)％]和单纯PDT组[(25.83±0.45)％],差异均有统计学意义(F=28 134.564,P＜0.05),VEGF-C在联合实验组[(20.65±1.02)％]中表达量明显低于空白对照组[(67.51±1.48)％]、单纯NS-398组[(30.54±1.31)％]和单纯PDT组[(32.12±1.25)％],差异均有统计学意义(F=3 739.623,P＜0.05);ELISA可见COX-2在联合实验组[(26.58 ±0.27) μg/L]中表达量明显低于空白对照组[(35.14 ±0.22) μg/L]、单纯NS-398组[(30.29±0.31) μg/L]和单纯PDT组[(31.67±0.13) μg/L],差异均有统计学意义(F=2 972.978,P＜0.05),VEGF-C在联合实验组[(1.36±0.02)μg/L]中表达量明显低于空白对照组[(1.69 ±0.03) μg/L]、单纯NS-398组[(1.45±0.03)μg/L]和单纯PDT组[(1.47 ±0.04) μg/L],差异均有统计学意义(F=420.490,P＜0.05).结论 NS-398和PDT两种措施联合可显著抑制QBC939细胞生长,促进细胞早期凋亡,其对QBC939细胞生长的抑制作用可能是通过抑制COX-2和VEGF-C的表达,进而促进细胞早期凋亡实现的.

摘要： Objective: To investigate the effect of COX-2 inhibitor bevacizumab on the activity and apoptosis of retinal ganglion RGC-5 cells induced by H2O2 and the regulation of p38 MAPK signaling pathway. Methods: Retinal ganglion RGC-5 cells was stimulated using H2O2 ( 200, 300, 400, 600, 800 μmol/L) to establish a H2O2 damage model, H2O2 concentration was selected based on half inhibitory concentration, COX-2 inhibitor bevacizumab treated RGC-5 cell induced by H2O2 for 7 h, SB203580 as a p38 MAPK signaling pathway inhibitor, cell viability and apoptosis rate were detected by MTT method and flow cytometry, respectively; the expression of PCNA, p53, p38 and p-p38 protein were detected by Western blot. Results: Different concentrations of H2O2 could inhibit the viability of RGC-5 cells, and the cell viability decreased with the increase of H2O2 concentration, because 400 μmol/L H2O2 inhibited half of the cell viability, it was selected as an object of study. Compared with the control group, the cell viability and the expression of PCNA were decreased significantly in H2O2 group, the apoptosis rate and the expression of p53 and p-p38 protein was increased significantly; compared with H2O2 group, the cell viability and PCNA expression were increased significantly in the H2O2+bevacizumab group, the apoptosis rate and the expression of p53 and p-p38 protein were decreased significantly ( P ＜ 0. 05); compared with H2O2+ bevacizumab group, the cell viability and PCNA expression were increased significantly in H2O2+bevacizumab+SB203580 group, the apoptosis rate and the expression of p53 and p-p38 protein were decreased significantly ( P＜0. 05). Conclusion: Inhibition of immunosuppressive factor COX-2 expression can improve the activity of retinal ganglion cells and inhibit apoptosis by regulating the p38 MAPK signaling pathway.%目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS-398对H2O2诱导的视网膜神经节RGC-5细胞活力和凋亡及p38MAPK信号通路的调控作用.方法:200、300、400、600、800μmol/L的H2O2刺激视网膜神经节RGC-5细胞建立H2O2损伤模型,根据半数抑制浓度选择H2O2的浓度; COX-2抑制剂NS-398处理H2O2诱导的RGC-5细胞7 h,SB203580作为p38MAPK信号通路抑制剂,通过MTT法及流式细胞术分别检测细胞的活力和凋亡率; Western blot检测细胞增殖核抗原(PCNA)、p53、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、p-p38的蛋白表达.结果:不同浓度的H2O2均可抑制RGC-5细胞活力,且随H2O2浓度升高细胞活力降低,由于400μmol/L的H2O2可抑制一半的细胞活力,选择作为研究对象;与空白对照组比较,H2O2组细胞活力及PCNA蛋白表达均显著降低,细胞凋亡率及p53和p-p38的蛋白表达均显著升高,与H2O2组比较,H2O2+NS-398组细胞活力及PCNA蛋白表达均显著升高,细胞凋亡率及p53和p-p38的蛋白表达均显著降低(P＜0.05);与H2O2+NS-398组比较,H2O2+NS-398+SB203580组细胞活力及PCNA蛋白表达均显著升高,细胞凋亡率及p53和p-p38的蛋白表达均显著降低(P＜0.05).结论:抑制免疫抑制因子COX-2表达可通过调控p38MAPK信号通路提高视网膜神经节细胞活力和抑制细胞凋亡.

摘要： Objective To investigate the effect of docosahexaenoic acid (DHA) combined with cyclooxygenase-2 (COX-2) selective inhibitor NS-398 on the apoptosis of cholangiocarcinoma QBC939 cells and the mechanism.Methods In vitro,cholangiocarcinoma QBC939 cells were treated with 0,15,30,45,60 and 75 μg/ml DHA with 0,25,50,100,150 and 200 μmol/L NS-398,respectively.The absorbances of the QBC939 cells were measured by CCK8 and its growth inhibition ratios were analyzed.Flow cytometry was applied to detect cell apoptosis.The level of β-catenin and COX-2 mRNA and protein were measured by real-time PCR,immunocytochemistry and enzyme-linked immunoadsordent assay,respectively.Results DHA combined with NS-398 could significantly suppress the growth of QBC939 cells (P ＜ 0.05).When the concentration of DHA went up to 45 μg/ml and NS-398 was 100 μmol/L,the relative growth inhibition rate of QBC939 cells was 90.0％.If the concentrations were increased,the result showed no significant differences.Furthermore,flow cytometry analysis indicated that DHA combined with NS-398 could induce QBC939 cells apoptosis at the early stage,and the apoptosis rate was significantly different between the experimental and control groups (P ＜ 0.01).Real-time PCR showed low β-catenin and COX-2 expression in QBC939 cells disposed by DHA combined with NS-398,and their expression were significantly different between the experimental and control groups (P ＜ 0.01).Immunocytochemistry and ELISA demonstrated that DHA combined with NS-398 could decrease β-catenin and COX-2 protein expression in QBC939 cells.Conclusion DHA combined with NS-398 induced apoptosis and inhibited proliferation of cholangiocarcinoma cells QBC939 in vitro through targeting β-catenin and COX-2.%目的 研究二十二碳六烯酸(DHA)联合选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS-398对人胆管癌细胞QBC939凋亡的影响及其作用机制.方法 体外培养人胆管癌QBC939细胞株,分别设立DHA组、NS-398组、二者联合组和空白对照组.将0、15、30、45、60、75μg/ml的DHA和0、25、50、100、150、200μmol/L的NS-398分别联合作用于胆管癌QBC939细胞;应用CCK8法检测其对QBC939细胞生长的相对抑制率;采用流式细胞术检测QBC939细胞的凋亡情况;应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测QBC939细胞中β-连环蛋白(catenin)和COX-2两种因子的基因表达情况;应用SP免疫细胞化学法测定作用前后QBC939细胞浆中β-catenin和COX-2两种蛋白的表达情况;应用ELISA法测定QBC939细胞上清中两种蛋白分泌情况.结果 DHA和NS-398在体外均能单独抑制QBC939细胞生长.DHA浓度为45μg/ml,联合NS-398浓度为100μmol/L时,作用24小时后,细胞生长抑制率达到90.0％,实验组与DHA组、NS-398组和空白组差异均有统计学意义(P＜0.05).继续增加两种药物浓度,细胞生长抑制率变化不明显.流式细胞术显示,DHA联合NS-398能明显促进QBC939细胞早期凋亡;实时PCR显示二者联合能明显抑制QBC939细胞中β-catenin和COX-2基因表达;SP免疫细胞化学实验显示,二者联合能抑制QBC939细胞浆中β-catenin和COX-2两种蛋白表达;ELISA实验显示,二者联合能抑制QBC939细胞中两种蛋白的细胞外分泌.结论 DHA联合NS-398能明显抑制胆管癌QBC939细胞生长,促进胆管癌细胞早期凋亡.二者联合对胆管癌QBC939细胞生长的抑制作用可能是通过抑制β-catenin和COX-2两种因子基因及蛋白水平的表达,进而促进胆管癌QBC939细胞的早期凋亡实现的.

摘要： Objective:To investigate if NS-398 could enhance the chemosensitivity of Bortezomib (BOR) on human multiple myeloma RPMI 8226 cells.Methods:After the treatment of NS-398 combined with BOR,MTT assay was used to detect the proliferation inhibition effect on human multiply myeloma RPMI 8226 cells in vitro,Flow cytometry was used to analyze their effect of apoptosis and cell cycle;the caspase-3 activity of different treatment group was detected by using ELISA and the activity of Cox-2 was measured by using Cox-2 activity assay kit.Results:The inhibitory rate of NS-398 combined with BOR was higher than that of NS-398 or BOR alone(Q ＞ 0.85).After treatment of NS-398 combined with BOR,the percentage of cells arrested in the G0/G1 phase and apoptotic rate were both higher than that of treatment with each drug alone(Q ＞ 1.15).The caspase-3 activity in cells treated with combined of NS-398 and BOR was significantly higher than that of treatment of each drug alone(Q ＞ 1.15).Conclusion:NS-398 combined with BOR shows a synergistic effect on the growth inhibition of RPMI 8226 cells in vitro.%目的:观察NS-398能否增强多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞对硼替佐米(BOR)的化疗敏感性.方法:NS-398与BOR联用后,用MTT法测定对体外培养的RPMI 8226细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测对细胞周期和凋亡的影响;ELISA法检测细胞的Caspase-3活性;Cox-2试剂盒定量检测各组细胞Cox-2的活性.结果:NS-398联合BOR对RPMI 8226细胞的增殖抑制率大于单用组(Q＞0.85);NS-398联合BOR使RPMI 8226细胞阻滞于Go/G1期,细胞凋亡率明显高于单用组(Q＞1.15);NS-398联合BOR组细胞的Caspase-3的活性高于单用组(Q＞1.15).结论:NS-398具有协同增强BOR体外抗骨髓瘤RPMI 8226细胞的作用.

摘要： 目的 体外观察环氧化酶-2选择性抑制剂NS-398对奥沙利铂(L-OHP)抑制结肠癌HCT-8细胞增殖和诱导凋亡的协同作用.方法 采用CCK-8法检测不同浓度L-OHP(1.25、2.50、5.00、10.00、20.00 μmol/L)单用及联合(20.00、80.00 μmol/L)NS-398作用于人结肠癌HCT-8细胞24 h后的细胞增殖抑制率;采用流式细胞仪检测细胞周期.琼脂糖凝胶电泳技术检测L-OHP(2.50、5.00、10.00、20.00 mg/L)单用及联合NS-398(10.00、100.00 μmol/L)对HCT-8细胞作用48 h的凋亡情况.结果 NS-398、L-OHP单用及二者联合对HCT-8细胞均有抑制增殖作用,可阻止细胞周期进程,诱导细胞凋亡;L-OHP联合NS-398对HCT-8细胞的作用明显强于L-OHP单用,二者具有协同作用,且随着NS-398剂量的增高而增强(P<0.01).结论 NS-398能够协同L-OHP增强其对结肠癌细胞生长抑制和凋亡效应.

摘要： 目的研究二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)和选择性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂NS-398联合对人胆管癌细胞QBC939的抑制作用。方法体外培养人胆管癌QBC939细胞株,分别设立DHA浓度组、NS-398浓度组、二者联合组和空白对照组,即将0、15、30、45、60、75μg/ml浓度的DHA和0、25、50、100、150、200μmol/L浓度的NS-398分别联合作用于胆管癌QBC939细胞;应用CCK8法检测其分别对QBC939细胞生长的相对抑制率;采用流式细胞术检测QBC939细胞的凋亡情况;应用Transwell小室检测QBC939细胞的体外侵袭情况。结果 DHA和NS-398在体外均能够单独抑制QBC939细胞生长,45μg/ml的DHA联合100μmol/L的NS-398经24 h作用后,细胞生长抑制率达到90%,实验组与DHA浓度组、NS-398浓度组和空白组差异均有统计学意义(P<0.05),继续增加2种药物浓度,细胞生长抑制率变化不明显;流式细胞术显示DHA和NS-398联合能明显促进QBC939细胞早期凋亡;15μg/ml的DHA联合50μmol/L的NS-398经24 h作用后,对胆管癌细胞生长无明显抑制作用,但QBC939的体外侵袭能力明显降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论 DHA和NS-398联合能明显抑制胆管癌QBC939细胞生长,促进胆管癌细胞早期凋亡,抑制胆管癌细胞的侵袭,二者联合对胆管癌QBC939细胞生长的抑制作用可能是通过促进细胞早期凋亡实现的。

摘要： 目的 探讨NS398联合X射线照射对食管癌干细胞和贴壁肿瘤细胞辐射增敏效应的差异,并分析食管癌干细胞的辐射抗性及其与相关蛋白表达的关系.方法 采用无血清培养基分离细胞系ECA109的食管癌干细胞;流式细胞仪检测细胞表面标记物CD44+和CD271+的表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测NS398联合不同照射剂量(0、4和8 Gy)对细胞增殖能力作用的联合效应;克隆形成实验检测NS398对亲本细胞和细胞球辐射增敏效应的差异;Western blot检测细胞内4种相关蛋白的表达水平.结果 在无血清培养基中可分离培养稳定传代的肿瘤干性细胞球.细胞球CD271+的表达高于亲本细胞(t=3.81,P＜0.05).照射后细胞球增殖能力大于亲本细胞.NS398联合照射时,亲本细胞的存活分数(SF2)小于细胞球(t=2.91,P＜0.05),NS398对亲本细胞的SER大于细胞球.细胞球内Bmi-1、c-Myc、β-catenin和Cyclin D1的表达水平较亲本细胞均升高(t=8.09、7.90、7.50、7.15,P＜0.05);4 Gy照射后细胞内Cyclin D1的表达水平均升高(=9.74、6.67,P＜0.05);NS398联合4 Gy照射组与4 Gy照射组相比,亲本细胞β-catenin和Cyclin D1表达水平降低(t=10.15、12.12,P＜0.05),细胞球β-catenin和Cyclin D1表达水平亦降低(=3.23、7.45,P＜0.05).结论 无血清培养基分离培养的食管癌干细胞高表达干细胞表面标记物CD271和干细胞相关蛋白,并具有辐射抗性,其机制可能与β-catenin分子及其下游靶蛋白的表达水平有关.%Objective To study the radiation sensitive enhancement ratio (SER) of NS398 on esophageal cancer stem cells and adherent tumor cells and analyze the radioresistance related protein expressions.Methods ECA109 esophageal cancer stem cells were cultured in serum-free medium.Expression levels of cell surface maker CD44 + and CD271 + were analyzed by flow cytometry.MTT assay was used to detect cell proliferation after the treatments with NS398 and irradiation(0,4 and 8 Gy).The sensitization effects of NS398 on the parental cells and its spheroid were evaluated by clone formation assay.Western blot assay was performed to determine protein expressions.Results Serum-free medium was successfully applied to isolate the cancer stem cells with spherical properties.CD271 + in the spheroid cells was notable higher than that in the parent cells (t =3.81,P ＜ 0.05).After irradiation,the proliferation rate of parental cells was higher than that in spheroid cells.After the combination treatment of NS398 and irradiation,SF2 value of parental cells was lower than spheroid cells(t =2.91,P ＜ 0.05)and the SER of NS398 on parental cells was greater than spheroid cells.The expressions of Bmi-1,c-Myc,β-catenin and Cyclin D1 in spheroid cells were higher than those in parental cells (t =8.09,7.90,7.50,7.15,P＜0.05).Cyclin D1 expression levels under both cell situations increased after 4 Gy irradiation (t =9.74,6.67,P ＜0.05).Compared to the 4 Gy irradiation alone group,the β-catenin and Cyclin D1 expression levels in both parental cells (t =10.15,12.12,P ＜ 0.05) and spheroid cells (t =3.23,7.45,P ＜ 0.05) decreased in the combination group.Conclusions Esophageal cancer stem cells with high level of CD271 can be isolated with serum-free medium and it is radioresistant where β-catenin and its downstream proteins may be involved.

摘要： 目的：探讨选择性Cox-2抑制剂NS-398和生长抑素类似物奥曲肽对体外培养的人胃癌SGC-7901细胞株增殖、凋亡的影响及机制。方法取对数生长期人胃癌 SGC-7901细胞，随机分为空白组、对照组、NS-398组、奥曲肽组及联合用药组，空白组仅含培养液和等体积的 DMSO，对照组为 SGC7901细胞的单细胞悬液200μL ＋等体积的 DMSO，NS-398组给予 NS-398100μmol／L，奥曲肽组给予奥曲肽10μmol／L，联合用药组给予 NS-398100μmol／L ＋奥曲肽10μmol／L，分别培养24、48、72 h，采用 CCK-8法检测各组胃癌 SGC-7901细胞增殖抑制率，显微镜下观察细胞凋亡形态学变化，流式细胞仪检测细胞凋亡率，实时定量荧光 PCR 及蛋白印迹法检测 Cox-2蛋白表达。结果干预后72 h，NS-398组、奥曲肽组、联合用药组 SGC7901细胞增殖抑制率分别为（39．0±3．2）％、（41．3±1．8）％、（78．8±1．4）％，联合用药组与 NS-398组、奥曲肽组比较，P 均＜0．01。显微镜下观察 NS-398组、奥曲肽组、联合用药组可见典型的细胞凋亡形态改变，尤以联合用药组为著。NS-398组、奥曲肽组和联合用药组细胞凋亡率分别为（12．06±1．26）％、（19．87±1．45）％和（29．74±2．52）％，显著高于对照组的（2．13±0．28）％（P 均＜0．01），联合用药组细胞凋亡率显著高于 NS-398组、奥曲肽组（P 均＜0．01）。NS-398组、奥曲肽组、联合用药组Cox-2表达均显著下降（P 均＜0．01），尤以联合用药组降低更明显。结论NS-398联合奥曲肽可协同抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖并诱导其凋亡，其机制可能与下调 Cox-2表达有关。

摘要： 目的:探讨选择性环氧合酶-2抑制剂NS398对人肺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其机制.方法:建立人肺癌A549细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,成瘤后20只裸鼠随机分为4组:对照组、NS398低剂量(1.5mg/kg)组、NS398中剂量(3.0mg/kg)组和NS398高剂量(4.5mg/kg)组.各组均采用腹腔注射给药,每周3次,共4周.给药期间每隔7日测量肿瘤体积.最后一次给药次日,处死裸鼠完整剥取肿瘤,测量肿瘤重量并计算抑瘤率.TUNEL法检测各组移植瘤标本细胞凋亡情况,免疫印迹法检测survivin、XIAP和cleaved caspase-3蛋白表达情况.结果:NS398各剂量组肺癌移植瘤生长速度均慢于对照组,各剂量组肿瘤重量显著低于对照组(P＜0.01,P=0.000),呈剂量依赖性.各剂量组的抑瘤率分别为30.18％、46.50％和53.87％.TUNEL法结果显示,与对照组比较,NS398各剂量组凋亡指数均显著增加(P＜0.01,P=0.000),并呈剂量依赖性.免疫印迹法结果显示,与对照组比较,NS398各剂量组survivin和XIAP蛋白表达量均显著减少,cleaved caspase-3蛋白表达量均显著增加(P =0.000),也呈明显剂量依赖性.结论:NS398能明显抑制人肺癌裸鼠移植瘤的生长,并诱导肿瘤细胞凋亡,其机制可能与下调survivin和XIAP蛋白表达,上调cleaved caspase-3蛋白表达有关.

摘要： 目的：观察选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398对肝星状细胞系HSC-T6细胞增殖的抑制作用,并探讨其可能的机制.rn 方法：采用不同浓度的NS-398作用于HSC-T6,四甲基偶氮唑盐法检测HSC-T6细胞增殖情况,乳酸脱氢酶法检测NS-398对HSC-T6细胞的毒性作用、流式细胞仪检测HSC-T6细胞周期的改变,以EliVisionTMplus细胞免疫化学法检测HSC-T6中COX-2、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的变化.多组数据间的比较采用单因素方差分析或独立样本T检验,计数资料采用χ2检验.rn 结果：在20～160μamol/L浓度范围内,NS-398以剂量和时间依赖性地抑制HSC-T6增殖(P0.05).rn 结论：NS-398可以显著抑制HSC-T6增殖,使其发生G2/M期阻滞,其作用具有剂量与时间依赖性,NS-398可能通过抑制HSC中PCNA的表达而抑制其增殖,但小影响COX-2的表达.

摘要： 目的：观察选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398对肝星状细胞系HSC-T6细胞增殖的抑制作用,并探讨其可能的机制.rn 方法：采用不同浓度的NS-398作用于HSC-T6,四甲基偶氮唑盐法检测HSC-T6细胞增殖情况,乳酸脱氢酶法检测NS-398对HSC-T6细胞的毒性作用、流式细胞仪检测HSC-T6细胞周期的改变,以EliVisionTMplus细胞免疫化学法检测HSC-T6中COX-2、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的变化.多组数据间的比较采用单因素方差分析或独立样本T检验,计数资料采用χ2检验.rn 结果：在20～160μamol/L浓度范围内,NS-398以剂量和时间依赖性地抑制HSC-T6增殖(P0.05).rn 结论：NS-398可以显著抑制HSC-T6增殖,使其发生G2/M期阻滞,其作用具有剂量与时间依赖性,NS-398可能通过抑制HSC中PCNA的表达而抑制其增殖,但小影响COX-2的表达.

摘要： 目的：观察选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398对肝星状细胞系HSC-T6细胞增殖的抑制作用,并探讨其可能的机制.rn 方法：采用不同浓度的NS-398作用于HSC-T6,四甲基偶氮唑盐法检测HSC-T6细胞增殖情况,乳酸脱氢酶法检测NS-398对HSC-T6细胞的毒性作用、流式细胞仪检测HSC-T6细胞周期的改变,以EliVisionTMplus细胞免疫化学法检测HSC-T6中COX-2、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的变化.多组数据间的比较采用单因素方差分析或独立样本T检验,计数资料采用χ2检验.rn 结果：在20～160μamol/L浓度范围内,NS-398以剂量和时间依赖性地抑制HSC-T6增殖(P0.05).rn 结论：NS-398可以显著抑制HSC-T6增殖,使其发生G2/M期阻滞,其作用具有剂量与时间依赖性,NS-398可能通过抑制HSC中PCNA的表达而抑制其增殖,但小影响COX-2的表达.

摘要： 目的：观察选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398对肝星状细胞系HSC-T6细胞增殖的抑制作用,并探讨其可能的机制.rn 方法：采用不同浓度的NS-398作用于HSC-T6,四甲基偶氮唑盐法检测HSC-T6细胞增殖情况,乳酸脱氢酶法检测NS-398对HSC-T6细胞的毒性作用、流式细胞仪检测HSC-T6细胞周期的改变,以EliVisionTMplus细胞免疫化学法检测HSC-T6中COX-2、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的变化.多组数据间的比较采用单因素方差分析或独立样本T检验,计数资料采用χ2检验.rn 结果：在20～160μamol/L浓度范围内,NS-398以剂量和时间依赖性地抑制HSC-T6增殖(P0.05).rn 结论：NS-398可以显著抑制HSC-T6增殖,使其发生G2/M期阻滞,其作用具有剂量与时间依赖性,NS-398可能通过抑制HSC中PCNA的表达而抑制其增殖,但小影响COX-2的表达.

摘要： 目的：观察选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398对肝星状细胞系HSC-T6细胞增殖的抑制作用,并探讨其可能的机制.rn 方法：采用不同浓度的NS-398作用于HSC-T6,四甲基偶氮唑盐法检测HSC-T6细胞增殖情况,乳酸脱氢酶法检测NS-398对HSC-T6细胞的毒性作用、流式细胞仪检测HSC-T6细胞周期的改变,以EliVisionTMplus细胞免疫化学法检测HSC-T6中COX-2、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的变化.多组数据间的比较采用单因素方差分析或独立样本T检验,计数资料采用χ2检验.rn 结果：在20～160μamol/L浓度范围内,NS-398以剂量和时间依赖性地抑制HSC-T6增殖(P0.05).rn 结论：NS-398可以显著抑制HSC-T6增殖,使其发生G2/M期阻滞,其作用具有剂量与时间依赖性,NS-398可能通过抑制HSC中PCNA的表达而抑制其增殖,但小影响COX-2的表达.

摘要： 目的：观察选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398对肝星状细胞系HSC-T6细胞增殖的抑制作用,并探讨其可能的机制.rn 方法：采用不同浓度的NS-398作用于HSC-T6,四甲基偶氮唑盐法检测HSC-T6细胞增殖情况,乳酸脱氢酶法检测NS-398对HSC-T6细胞的毒性作用、流式细胞仪检测HSC-T6细胞周期的改变,以EliVisionTMplus细胞免疫化学法检测HSC-T6中COX-2、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的变化.多组数据间的比较采用单因素方差分析或独立样本T检验,计数资料采用χ2检验.rn 结果：在20～160μamol/L浓度范围内,NS-398以剂量和时间依赖性地抑制HSC-T6增殖(P0.05).rn 结论：NS-398可以显著抑制HSC-T6增殖,使其发生G2/M期阻滞,其作用具有剂量与时间依赖性,NS-398可能通过抑制HSC中PCNA的表达而抑制其增殖,但小影响COX-2的表达.

摘要： 本发明涉及一种肽组合物，其含有丙型肝炎病毒的多蛋白NS3/NS4和丙型肝炎病毒的多肽NS5b。本发明还涉及插入了编码多蛋白NS3/NS4和多肽NS5b的核酸序列的表达载体如腺病毒和痘病毒。本发明的组合物可用于治疗用途。

摘要： 本发明涉及橡胶促进剂的制备领域的一种制备橡胶促进剂NS的方法及橡胶促进剂NS。所述方法包括以下步骤：a、氧化过程：在反应原料中滴加双氧水进行氧化至反应结束，得到物料；所述反应原料包含促进剂M、叔丁胺、稀土化合物催化剂；b、反应物后处理：将物料处理回收得到叔丁胺；剩余物料处理得到促进剂NS成品。所述促进剂M、叔丁胺、双氧水的摩尔比为1：(5～15)：(1～2)；该方法除参与反应的双氧水外，无添加水及有机溶剂，能有效提高反应效率；选择使用具有高活泼性、高选择性的稀土化合物做催化剂，产物纯度高，色泽好，几乎无副产物及废水生成，工艺简单，清洁环保。

摘要： 本发明描述了经修饰的丙型肝炎病毒多肽。多肽包括HCV NS4a结构域和经修饰的NS3结构域。多肽保留构象表位。还描述了包括多肽的HCV免疫测定。

摘要： 提供了通过施用NS5A抑制剂、NS5B抑制剂、NS3抑制剂或其组合而治疗乙型肝炎病毒感染的方法。

摘要： 本发明公开了一种包含滨麦3Ns，6Ns和7Ns染色体的小麦-滨麦多重异代换系的培育方法，包括下述步骤：1)四倍体硬粒小麦与八倍体小滨麦杂交，在F1，F2，F3和F4世代均进行鉴定，筛选出染色体数目为2n=42，且含有滨麦Ns基因组染色体的单株；2)筛选出的单株均套袋自交，在F5世代，选育出含有6条滨麦Ns基因组染色体(3Ns，6Ns和7Ns)的小麦-滨麦多重异代换系。本发明公开了上述小麦-滨麦多重异代换系的鉴定方法。本发明公开的小麦-滨麦多重异代换系在株高、穗长、分蘖数等农艺性状方面得到了明显的改善。

摘要： 一种包含滨麦1Ns、5Ns和6Ns染色体的小麦-滨麦多重异代换系的创制：通过利用八倍体小滨麦M842-12(2n＝8x＝56，AABBDDNsNs)与硬粒小麦(2n＝4x＝28，AABB)品种Trs-372杂交，在F1，F2，F3和F4世代均进行细胞学染色体镜检和基因组原位杂交(GISH)鉴定，筛选染色体数目为2n＝42，且含有滨麦Ns基因组染色体的单株，对筛选出的单株均套袋自交，在F5世代，选育出1个含有滨麦1Ns、5Ns和6Ns染色体的小麦-滨麦多重异代换系05DM6。

摘要： 本发明涉及一种肽组合物，其含有丙型肝炎病毒的多蛋白NS3/NS4和丙型肝炎病毒的多肽NS5b。本发明还涉及插入了编码多蛋白NS3/NS4和多肽NS5b的核酸序列的表达载体如腺病毒和痘病毒。本发明的组合物可用于治疗用途。

摘要： 本发明属于分子生物学技术领域，公开了稳定表达NS1蛋白的犬肾细胞系MDCK‑pCDH‑NS1及其构建方法和应用，本发明构建了pCDH‑NS1过表达质粒，通过慢病毒三质粒共转染至人胚胎肾上皮细胞(HEK293T)中进行慢病毒的包装，收集慢病毒，感染MDCK细胞，利用嘌呤霉素筛选方法成功获得稳定表达细胞系经嘌呤霉素培养液筛选进而建立了稳定表达NS1蛋白的MDCK‑pCDH‑NS1细胞系，为筛选参与特定功能的未知蛋白提供参考。

摘要： 本发明涉及橡胶促进剂的制备领域的一种制备橡胶促进剂NS的方法及橡胶促进剂NS。所述方法包括以下步骤：a、氧化过程：在反应原料中滴加双氧水进行氧化至反应结束，得到物料；所述反应原料包含促进剂M、叔丁胺、稀土化合物催化剂；b、反应物后处理：将物料处理回收得到叔丁胺；剩余物料处理得到促进剂NS成品。所述促进剂M、叔丁胺、双氧水的摩尔比为1：(5～15)：(1～2)；该方法除参与反应的双氧水外，无添加水及有机溶剂，能有效提高反应效率；选择使用具有高活泼性、高选择性的稀土化合物做催化剂，产物纯度高，色泽好，几乎无副产物及废水生成，工艺简单，清洁环保。

摘要： 本文报道了具有减毒表型的新型重组呼吸道合胞病毒(RSV)，其中RSV基因组中NS1和/或NS2基因的天然位置被迁移到更高的位置，即位于更远离启动子的位置。基因位置的变化可以与其他基因座的突变组合存在，以达到所需的减毒和免疫原性水平。本文描述的重组RSV株适合用作减毒活RSV疫苗。还提供了能够编码所述病毒的多核苷酸序列，以及产生和使用该病毒的方法。