卵黄蛋白原

摘要： 环境内分泌干扰物(EEDCs)对鱼类生存和繁殖已构成严重威胁,评价水环境内分泌干扰物污染情况及对鱼类的影响,对于保护鱼类资源具有重要意义.选取草海湖中心水域作为对照组和周边严重污染水域作为试验组,表明草海严重污染水域可能存在环境内分泌干扰物污染,且该污染物明显抑制水中鲫鱼的正常生长,雄性肝脏组织中Vtg mRNA相对表达量异常高表达更适用于评估水体环境内分泌干扰物污染情况.为进一步分析确认草海环境内分泌干扰物种类及影响鱼类繁殖生长机制提供依据.

摘要： 环境内分泌干扰物(EEDCs)对鱼类生存和繁殖已构成严重威胁,评价水环境内分泌干扰物污染情况及对鱼类的影响,对于保护鱼类资源具有重要意义。选取草海湖中心水域作为对照组和周边严重污染水域作为试验组,表明草海严重污染水域可能存在环境内分泌干扰物污染,且该污染物明显抑制水中鲫鱼的正常生长,雄性肝脏组织中Vtg mRNA相对表达量异常高表达更适用于评估水体环境内分泌干扰物污染情况。为进一步分析确认草海环境内分泌干扰物种类及影响鱼类繁殖生长机制提供依据。

摘要： 海马因观赏和药用价值而具有较高的经济价值,而雌雄判别是进行海马繁育生产的必要流程。本研究以线纹海马为研究对象,通过测量不同发育时期血液中激素水平以及卵黄蛋白原含量来判别海马的性别。研究表明,在海马9 cm时,用ELISA实验可以准确地鉴定出海马的雌雄。海马在体长为9 cm体重约为5 g时,体内的雌二醇E2含量达到1.1 ng/L,而睾酮T的含量到25 ng/L,处于一个较为平稳的阶段,此时为测量分析性激素的含量、辨别雌雄的最佳时期;卵黄蛋白原含量测定的方法不适合鉴别体长9 cm以下的海马,不能用来作为海马早期雌雄鉴别的检测指标。本实验鉴别雌雄的方法便于更早地区分雌雄海马,有效提高配对率,对提高海马养殖场的经济效益具有一定的价值。

摘要： 以斑马鱼的卵黄蛋白原(Vtg)为生物标志物,研究芘对斑马鱼胚胎毒性.用100、200和300 μg ? L-13种不同浓度的芘和无水乙醇(空白对照)同时处理受精9h后的斑马鱼胚胎,暴露至72h与144h,观察并统计斑马鱼胚胎孵化率、死亡率以及畸形率数据以及Vtg基因表达的情况.实验结果表明:芘可以影响斑马鱼胚胎的发育,芘的暴露导致斑马鱼胚胎出现心包水肿、卵黄囊水肿、脊柱弯曲以及尾部弯曲等中毒症状.暴露72h和144h后,随着芘浓度升高斑马鱼胚胎孵化率下降,畸形率以及死亡率上升,而且中毒程度随暴露时间的延长而增加.与对照相比,芘对斑马鱼Vtg基因表达量均下降,Vtg基因均没有被显著诱导.

摘要： 在水温(21±1)°C下,给体重(592.5±52.5)g的日本鳗鲡(Anguilla japonica)雌亲鱼投喂每千克体重含0.034 g淫羊藿和0.034 g菟丝子浸膏的饲料90 d,对照组投喂人工配合饲料,研究淫羊藿和菟丝子对卵巢发育的影响.结果显示,饲料中添加淫羊藿和菟丝子的雌鱼卵巢大部分卵母细胞属第Ⅱ时相,性腺指数和肝体比均显著高于对照组(P<0.05);卵母细胞油滴明显增多,部分卵母细胞胞质已充满油滴,核仁变小增多;血清雌二醇(E2)和11-酮基睾酮(11-KT)水平显著升高(P<0.05),实验组11-KT含量约为对照组的4倍;肝脏卵黄蛋白原基因vtg表达量升高,实验组和对照组卵巢cyp19a1仅微量表达,肝脏未检测到erα 和erβ 的表达;实验组肌肉总脂肪酸、饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)和高度不饱和脂肪酸(HUFA)含量均显著高于对照组(P<0.05),最主要的高度不饱和脂肪酸花生四烯酸(AA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)含量均显著高于对照组(P<0.05).本研究表明,在亲鱼培育饲料中添加中草药淫羊藿和菟丝子促进了日本鳗鲡卵母细胞油滴和肝脏卵黄蛋白原增加,提高了肌肉高不饱和脂肪酸的积累,为卵黄生成和卵母细胞进一步发育做好更充分的准备.

摘要： 双酚AF(BPAF)、双酚AP(BPAP)、双酚B(BPB)、双酚F(BPF)、双酚S(BPS)和双酚Z(BPZ)是几种常用的双酚A替代物.目前,这些替代物的毒理学数据还比较匮乏,难以评估其是否为安全的替代物,因此,有必要开展双酚A替代物的毒理效应研究.考虑到双酚A具有较强的内分泌干扰效应,而这些双酚A替代物也是否具有内分泌干扰效应是亟待解决的重要科学问题.基于此,选用雄性斑马鱼成鱼作为研究对象,在质量浓度为0、0. 001、0. 01、0. 1 和1 mg/L下暴露21 d后,采用酶联免疫吸附测定法分析了斑马鱼头尾匀浆液中性激素水平和卵黄蛋白原含量的变化情况.结果表明,与空白对照相比,这6种双酚A替代物能够导致睾酮(T)水平出现不同程度的显著性降低,17β-雌二醇(E2)出现不同程度的显著性升高;卵黄蛋白原(VTG)的含量也呈现显著性升高的趋势.根据这几种受试物对卵黄蛋白原诱导作用的最低可观察效应浓度(LOEC)值可以看出,双酚AF、双酚AP和双酚Z的雌激素效应强于双酚A,双酚B与双酚A处于同一等级,双酚F和双酚S相对较弱.本研究结果可作为双酚A替代物风险评价的依据.

摘要： 卵黄蛋白原(Vitellogenin, Vtg)被认为是一种理想的雌激素和类雌激素标志物, 通过建立一种中华鲟Acipenser sinensis血浆Vtg水平的检测方法,进而开发一项中华鲟性腺成熟度的诊断技术.首先通过RACE-PCR方法扩增得到中华鲟vtg基因cDNA序列,氨基酸序列分析预测其蛋白分子量大小为196 kD.构建Vtg功能区段融合原核表达载体pET32a(+)-vtg并表达纯化重组蛋白, 并以重组蛋白免疫兔子获得多克隆抗血清, Western blotting检测显示抗血清的特异性较好.以纯化的中华鲟重组Vtg蛋白为抗原, 中华鲟Vtg多克隆抗血清为抗体, 建立了中华鲟血浆Vtg的间接竞争酶联免疫检测方法(ELISA), 标准曲线线性回归方程为y=–0.2916x+0.6794, 相关系数R2为0.9976.该方法检测的灵敏度为4.12 μg/mL, 最低检测限为0.3 μg/mL, 批内和批间变异系数分别为2.52%和3.42%.通过对不同发育时期雌性中华鲟血样检测, 表明此ELISA方法可初步用于雌性中华鲟性腺发育时期监测.%In this study, the cDNA sequence of Vitellogenin (Vtg) gene in Chinese sturgeon Acipenser sinensis was amplified with the rapid amplification of cDNA end (RACE) method, and its theoretical molecular mass is 196 kD. The antigenic site of the encoded amino acid sequence was cloned, which was used to construct recombinant plasmid and express recombinant protein. The polyclonal antiserum was obtained by immunizing rabbits with purified recombinant protein, and its specificity to Vtg was examined by western blotting. A competitive Enzyme-linked immunosorbent as-say (ELISA) was established to detect Vtg in the serum of A. sinensis using antiserum of Vtg as antibody and the puri-fied recombinant protein as antigen. The linear regression of the standard curve was y=–0.2916x+0.6794 (R2=0.9976). The sensitivity of this method was 4.12 μg/mL, and the lowest threshold for detection was 0.3 μg/mL. The inter- and in-tra-assay coefficients of variation was 2.52% (n=3) and 3.42% (n=3), respectively. The test results of blood sample for the female A. sinensis at different developmental stages showed that the method could be used to monitor the gonadal development of female Chinese sturgeon.

摘要： 卵黄蛋白原(Vitellogenin,Vg)是卵黄蛋白的前体,为卵生动物胚胎发育提供必需的营养物质.作为卵内重要的营养蛋白,物种之间的Vg在蛋白结构及蛋白修饰上有高度的保守性,一般包括VitN,DUF,vWD结构域及丝氨酸修饰区等.在卵黄发育期,在激素的诱导下,雌性成年个体内的Vg在脊椎动物的肝脏或昆虫脂肪体中大量表达,经过修饰及蛋白酶剪切后,形成Vg聚合体,分泌到血淋巴中并运输至卵巢,由卵巢上的Vg受体识别,通过内吞作用入卵,并在卵内进一步加工成为成熟的卵黄蛋白.除经典的营养运输外,Vg在入卵过程中发挥多重非营养功能.Vg与病毒的结构蛋白互作,可将病毒携带入卵实现其垂直传播过程;血淋巴中的Vg通过对病原微生物的识别,介导昆虫对微生物的免疫清除;Vg在非雌性个体中的表达对虫媒病毒的水平传播及社会型昆虫的行为调节发挥功能.综述了Vg的表达、修饰、运输及其在非营养功能方向的主要研究进展,以期为后续Vg的功能研究提供指导.%Vitellogenin(Vg)is the precursor of vitellin,providing essential nutrients and energy for the developing embryo in many oviparous animals. As an important nutrient protein in eggs,Vg's structure and modification are very conserved in different animals. The mature Vgs contain an N-terminal domain(Vitellogenin_N,VitN),a middle-region domain of unknown function(DUF),a von Willebrand factor type D(vWD)C-terminal domain,and a conserved polyserine tracks. During the vitellogenesis stage and under the induction of hermones,Vg is abundantly expressed in the liver of vertebrate animals or the fat body of insects. After modification and proteolytic cleavage, the Vg subunits are assembled in tissues,secreted into the hemolymph and taken up by oocytes via receptor-mediated endocytosis. In the ovaries,the Vg subunits are further processed into mature york proteins. In addition to the classic nutrient transport,Vg exerts multiple non-nutritinal function during its transport. When Vg interacts with the viral capsid protein,the virus might be transported into the insect ovary via the uptake of Vg by developing oocytes. In hemolymph,Vg is able to play roles in immune responses,either as a pattern recognition molecule to recognize bacteria,or as an opsonin to enhance macrophage phagocytosis. Moreover,Vg has also been reported to be expressed by non-females and works in behavior regulation of insects. Here,we will review the main research progresses in Vg's systhesis,processing, modification and its non-nutritional functions,including the functions in females and non-females. In order to provide the following Vg function.

摘要： A 12-week experiment was conducted to evaluate the effects of dietary soy lecithin on ovary develop-ment, gonadal histology and vitellogenin mRNA expression of swimming crab. 2×2 double-factor random block design was used to arrange 0% or 4% soy lecithin for mated or unmated female swimming crab, respectively. The results indicated that crabs fed the diets containing 4% soy lecithin had significantly higher gonadosomatic index (GSI), oocyte diameter, the levels of serum vitellogenin and sex steroids than those fed the unsupplemented with soy lecithin diets. Hepatopancreatic vitellogenin mRNA expression increasesed with dietary soy lecithin increas-ing from 0% to 4%. The results of hepatosomatic index (HSI) showed a reverse trend with GSI. Mated female crabs exhibited higher hepatopancreatic vitellogenin mRNA expression than unmated female crabs. Furthermore, the mated female crabs had higher ovarian yolk granules in number and size than those unmated female crabs. Mating treatment did not affect HSI, serum vitellogenin (VG) and progesterone (PG) contents. The interaction of dietary soy lecithin and mating on serum progesterone (PG) and estradiol (E2) contents was identified. In conclu-sion, the dietary soy lecithin and mating stimulated had a positive effect on ovarian development in swimming crab broodstock, and mating stimulated had a more beneficial effect on promoting oocyte maturation.%为探讨饲料磷脂对已交配和未交配雌性三疣梭子蟹卵巢发育、组织学结构和卵黄蛋白原基因表达的影响,本研究采用2×2双因子随机区组设计(日粮类型:0%和4%大豆卵磷脂;三疣梭子蟹交配处理:已交配和未交配),共4个处理组,以大豆卵磷脂0%和4%两种人工配合饲料分别投喂交配和未交配两组三疣梭子蟹雌蟹,进行了为期12周的饲养实验.结果显示,无论三疣梭子蟹是否交配,饲料中添加4%大豆卵磷脂可显著增加三疣梭子蟹的卵巢指数,提高血清中卵黄蛋白原、孕酮和雌二醇的浓度,增大卵母细胞直径;同时上调肝胰腺卵黄蛋白原mRNA相对表达量,但无显著性差异,肝胰腺指数呈现出和卵巢指数相反的趋势;交配后的三疣梭子蟹卵巢指数、肝胰腺卵黄蛋白原mRNA表达量显著高于未交配组.组织学观察显示,交配使得三疣梭子蟹卵母细胞沉积更丰富的卵黄颗粒,促进卵母细胞成熟,交配处理对肝胰腺指数和血清中卵黄蛋白原及孕酮的水平无显著性影响.此外,饲料磷脂水平和交配处理的交互作用显著影响了三疣梭子蟹血清中类固醇激素孕酮和雌二醇的浓度.本实验结果显示,饲料中大豆磷脂和交配处理均能促进雌性三疣梭子蟹的卵巢发育,交配处理对卵母细胞成熟的促进作用更为明显.

摘要： 巴氏新小绥螨Neoseiulus barkeri(Hughes)是叶螨、粉虱及蓟马的重要天敌.选育捕食螨抗药性品系可有效协调捕食螨释放和化学农药施用的矛盾.在筛选出巴氏新小绥螨敏感和抗性品系基础上,本研究比较了巴氏新小绥螨甲氰菊酯抗/敏品系的产卵量,采用RT-PCR和RACE法对巴氏新小绥螨卵黄蛋白原进行了克隆,采用实时荧光定量PCR法对抗/敏品系卵黄蛋白原表达量进行了测定.结果表明,甲氰菊酯抗性品系的产卵量显著增加.通过克隆首次得到了巴氏新小绥螨N.barkeri3条卵黄蛋白原基因NbVg1、NbVg2、NbVg3cDNA全长,保守结构域分析结果表明其均具备卵黄蛋白原典型结构域即氨基端的Vitellogenin_N结构域或脂蛋白N端结构域(LPD_N),未知功能的结构域(domain of unknown function)DUF1943和位于羧基端的VWD结构域(von-Willebrand factor type D domain).荧光定量PCR发现,NbVg1、NbVg2在巴氏新小绥螨甲氰菊酯抗性品系中表达量显著高于敏感品系,而NbVg3则在甲氰菊酯抗性品系中表达下降且显著低于敏感品系.因此推测卵黄蛋白原基因的表达变化可能与巴氏新小绥螨甲氰菊酯抗性品系产卵量增加有关.

摘要： 本文对在mRNA水平对日本囊对虾卵黄蛋白原的表达进行定量分析。本实验首先根据卵巢的外观结合组织学切片观察，将日本囊对虾的卵巢发育分为6个时期:即卵原细胞增殖期、卵黄发生前期、初级卵黄发生期、次级卵黄发生期、成熟期和恢复期。再分别对6个不同时期的对虾分别取卵巢和肝胰腺样品，分别测定其卵黄蛋白原mRNA的表达情况，以最终搞清楚日本囊对虾卵黄蛋白原的具体合成部位及其相对表达量。研究表明:在日本囊对虾卵黄蛋白原的合成过程中，卵巢和肝胰腺均有mRNA存在，说明二者都是其合成部位;从卵黄蛋白原mRNA的相对表达量来看，卵巢在卵黄蛋白原的合成过程中其贡献比肝胰腺稍大一些。

摘要： 本研究应用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR法检测凡纳滨对虾和罗氏沼虾卵巢不同发育时期的卵巢和肝胰腺中卵黄蛋白原mRNA的表达水平.根据卵巢发育情况把凡纳滨对虾的卵巢分为6个期:卵原细胞增殖期,卵黄发生前期,初级卵黄发生期,次级卵黄发生期,成熟期,恢复期.把罗氏沼虾的卵巢分为5个发育阶段:卵黄发生前期,初级卵黄发生期,次级卵黄发生期,成熟期,抱卵期.雌性凡纳滨对虾和罗氏沼虾分别提取卵巢和肝胰腺的总RNA,设计特异性引物进行荧光定量PCR扩增,对卵黄蛋白原mRNA表达进行相对定量分析.凡纳滨对虾的研究结果表明:在卵巢和肝胰腺中都有卵黄蛋白原mRNA的表达.在卵巢中,随着卵巢的发育,卵黄蛋白原mRNA的相对表达量不断增加,分别为:1.1,5.9,10.4,26.9,85.0,产卵以后急剧减少,为1.6.在肝胰腺中,随着卵巢发育,相对表达量不断增加,分别为:1.3,3.3,7.1,37.3,51.6,产卵以后急剧减少,为1.0.肝胰腺在次级卵黄发生期卵黄蛋白原mRNA增加明显,卵巢在成熟期卵黄蛋白原mRNA增加明显.罗氏沼虾的研究表明:在卵巢和肝胰腺中都有卵黄蛋白原mRNA的表达.随着卵巢的发育,肝胰腺中卵黄蛋白原mRNA的相对表达量不断增加,分别为:3.4,12.6,15.2,并在成熟期达到最大,为38.9,产卵以后为2.9,而卵巢在整个发育过程中对卵黄蛋白原合成的贡献比较小,分别为1.0,1.3,1.7,4.8,1.5,除成熟期外,其他各期差异不显著.

摘要： 以牛蛙为实验对象,在实验室腹腔注射17β-雌二醇(E2)诱导卵黄蛋白原(VTG),检测牛蛙血清中VTG浓度变化.以2mg/kg,浓度为100ng/L腹腔注射E2,2周后血清SDS-PAGE,west-em Blot除雄性空白对照组外E2诱导的雄性、雌性牛蛙及纯化的VTG均诱导出VTG.经ELISA方法检测E2诱导的雄性、雌性VTG浓度分别为213.7μg/L1和411.9μg/L1,诱导组明显高于对照组P＜0.01.为此可以认为在环境雌激素(EEs)筛选中牛蛙VTG是较为敏感的指标,可对环境中的雌激素效应物质进行评价.

摘要： 鱼类卵黄蛋白原（VTGs）是一种含有多个结构域的大分子载脂蛋白，长期一来被认为是主要卵黄蛋白的雌激素反应前体，主要在肝组织中合成。VTG的可诱导性使它们成为最常用的一种体内及体外雌激素活性物质生物标志物。最近的研究中，笔者意外地发现了在斑马鱼心脏组织中发现了可观的vtgAo1表达。（vtgAo1是VTG雌激素应答的一种主要存在形式）。在使用肾上腺素类似物获得患有心肌肥大的斑马鱼的过程中，发现心脏vtgAo1起到运载心肌细胞内多余血脂的作用。这种作用类似于在哺乳动物中发现的脂类运输蛋白的“反向甘油三酯运输”作用。研究结果还表明，vtgAo1 mRNA在斑马鱼心脏中的表达可以被phenylephrine（PE）,anα-adrenergic agonist,或者isoproterenol（ISO）,aβ-adrenergic agonist所抑制。此外，酶联免疫试验（ELISA）也证明了一种β-肾上腺素受体拮抗剂Moxisylyl可以强烈刺激斑马鱼vtgAo1在血浆中含量的升高。然而，这样的刺激却无法被三苯氧胺，一种雌激素受体拮抗剂所抑制。

摘要： 本文在纯化稀有鮈鲫卵黄蛋白原的基础上，制备了该蛋白的单克隆抗体，得到了能够稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株，并制备了含有该单克隆抗体的小鼠腹水。并基于稀有鮈鲫卵黄蛋白原单克隆抗体，建立了间接竞争酶联免疫吸附方法（ELISA）定量检测稀有鮈鲫血清中的卵黄蛋白原。

摘要： 十足目是甲壳动物中种类最多(8000～10000种)、进化位阶最高、经济价值最大的一个生物类群,目前开展人工养殖的种类几乎全都出自十足目,如枝鳃亚目的对虾类、腹胚亚目的真虾类(沼虾、白虾)、螯龙虾类以及蟹类等.一个非常值得关注的现象是属于枝鳃亚目(Dendrobranchiata)的对虾类(Penaeiodea)中的多数种类,如斑节对虾(Penaeus monodon)、日本囊对虾(Marsapenaeus japonicus)、凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)等,在人工控制条件下卵巢发育非常困难,生产上通常需要切除眼柄才能促使亲虾卵巢发育成熟,而腹胚亚目的种类,如真虾类(Caridea)、螯虾类(Astacidea)、龙虾类(Palinura)、短尾类(Brachyura)卵巢很容易成熟,生产上还常因为其卵巢过早成熟,需要通过控制温度和营养来调控.

摘要： 近20年来,环境内分泌干扰物 ( Endocrine Disrupting Chemicals, EDCs)对人类及野生动物特别是鱼类的影响一直是研究的热点[1,2]。其中,污水处理厂汇集了大量的生活污水和工、农业废水,其中含有的EDCs不可能被完全除尽,因而被认为是水环境中EDCs的主要来源。近年来污水处理厂出水成为EDCs研究的重点和热点[3,4]。由于EDCs在环境中的浓度很低,直接监测往往困难很大,也不能准确反映其对生物体的毒害效应, 因而以卵黄蛋白原 ( Vitellogenin,vtg)作为生物标志物来检测环境中EDCs得到了广泛的应用[3]。

摘要： 医药和个人护理用品(PPCPs)是一类新型环境污染物,近年引起国内外研究者的广泛关注。从污水、地表水、地下水、甚至饮用水中检出的药品已超过80种,浓度达到 ppb级[1],也发现该类污染物诱导野生雄性鱼体中卵黄蛋白原增加而出现雌性化、青蛙畸形[2]等不正常现象。

摘要： 本研究在纯化稀有鮈鲫卵黄蛋白原的基础上，制备了该蛋白的单克隆抗体，得到了能够稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株，并制备了含有该单克隆抗体的小鼠腹水。基于稀有鮈鲫卵黄蛋白原单克隆抗体，建立了间接竞争酶联免疫吸附方法(ELISA)定量检测稀有鮈鲫血清中的卵黄蛋白原。

摘要： 本发明涉及多棘海盘车卵黄蛋白原的基因、蛋白、多克隆抗体及应用，属于分子生物学领域，所述多棘海盘车卵黄蛋白原的基因序列为SEQ ID NO：1，蛋白如SEQ ID NO：2所述。利用所述多棘海盘车Vg抗体的ELISA方法，通过鉴定生物体中Vg的含量进而预警海洋生态系统中EEs的污染状况，利用多棘海盘车Vg抗体制备的检测试剂盒能够检测某一海区的雌激素污染程度，检测结果准确可靠。

摘要： 本发明公开一种青虾卵黄蛋白原Vg基因、编码蛋白及应用。利用本发明提供的引物组从青虾肝胰腺中克隆到了一种Vg基因全长cDNA序列，该基因dsRNA注入雌性青虾围心腔后可以沉默卵巢和肝脏内的卵黄蛋白原基因的表达，使青虾卵巢发育显著延缓。本发明为解决青虾性早熟现象，培育优良品种提供新的思路和有效手段。

摘要： 中华乌塘鳢卵黄蛋白原重组表达及纯化方法，涉及融合蛋白表达纯化方法技术领域，提供一种基于中华乌塘鳢卵黄蛋白原基因，克隆其部分基因并体外重组质粒，转入大肠杆菌进行原核表达，IPTG诱导温度为16°C条件下获得高效融合表达，并且表达目的蛋白以可溶性状态存在，目的蛋白占细菌可溶性蛋白总量25％以上。应用纯化技术获得融合蛋白MNP‑VTG，通过蔗糖酶酶切将标签MNP从融合蛋白中分离获得目的蛋白VTG单体。该方法表达高效纯化VTG简便，因是可溶性，分离比包涵体简单，无需复性。获得的重组VTG为后续应用提供了稳定均一的原料基础。给重组蛋白可以用于生物活性功能研究，亦可以制备相应抗体开展检测研究。

摘要： 本发明涉及分子生物学和环境科学领域，公开了一种中华乌塘鳢卵黄蛋白原全长基因及其克隆方法与应用，具有VTG基因序列如SEQ1所示和氨基酸序列如SEQ2。本发明首次获得对环境变化敏感的中华乌塘鳢卵黄蛋白原全长基因，填补了中华乌塘鳢基因组的空白，同时由于该基因是在E2刺激下诱导雄鱼获得的VTG基因，因此，该基因的表达与环境激素的刺激直接相关，该基因的调控和蛋白更能够反应环境激素的污染现状。因此，该基因及蛋白作为环境雌激素的生物标记物对环境监测和评价更准确和实用。同时对更深入研究VTG蛋白在环境激素作用下的表达作用和应用具有理论和实践意义。

摘要： 本发明公开了一种基于弹涂鱼卵黄蛋白原的水体雌激素污染检测方法，属于分子生物学及环境污染检测领域；所述弹涂鱼卵黄蛋白原的氨基酸序列如SEQ ID N0.2所示。目前尚未有滩涂鱼类用于环境雌激素的生物活体检测，其相应的生物检测技术缺乏。本发明选择滩涂定居性强对生境敏感的弹涂鱼Periophthalmus modestus活体模型，设计引物，采用实时定量荧光PCR法检测其卵黄蛋白原VtgAa的表达，该检测方法可用于海水，河流入海口等水域环境雌激素污染程度的检测。

摘要： 本发明公开了一种弹涂鱼多型卵黄蛋白原Vtg基因全长序列及其克隆方法；所述弹涂鱼卵黄蛋白原的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，或如SEQ ID NO.4所示，或如SEQ ID NO.6所示。其对应的基因包括VtgAa基因、VtgAb基因或VtgC基因。本发明获得了弹涂鱼Vtg家族中三型Vtg基因全长CDS序列，填补了弹涂鱼Vtg基因家族的空白，对于更准确指示相应水域污染状况，以及更深入探究水生生物在污染水域的蛋白表达等问题具有重要意义。

摘要： 本发明涉及多棘海盘车卵黄蛋白原的基因、蛋白、多克隆抗体及应用，属于分子生物学领域，所述多棘海盘车卵黄蛋白原的基因序列为SEQ ID NO：1，蛋白如SEQ ID NO：2所述。利用所述多棘海盘车Vg抗体的ELISA方法，通过鉴定生物体中Vg的含量进而预警海洋生态系统中EEs的污染状况，利用多棘海盘车Vg抗体制备的检测试剂盒能够检测某一海区的雌激素污染程度，检测结果准确可靠。

摘要： 本发明公开一种青虾卵黄蛋白原Vg基因、编码蛋白及应用。利用本发明提供的引物组从青虾肝胰腺中克隆到了一种Vg基因全长cDNA序列，该基因dsRNA注入雌性青虾围心腔后可以沉默卵巢和肝脏内的卵黄蛋白原基因的表达，使青虾卵巢发育显著延缓。本发明为解决青虾性早熟现象，培育优良品种提供新的思路和有效手段。

摘要： 本发明公开了用于结合河豚毒素的卵黄蛋白原肽段

摘要： 中华乌塘鳢卵黄蛋白原重组表达及纯化方法，涉及融合蛋白表达纯化方法技术领域，提供一种基于中华乌塘鳢卵黄蛋白原基因，克隆其部分基因并体外重组质粒，转入大肠杆菌进行原核表达，IPTG诱导温度为16°C条件下获得高效融合表达，并且表达目的蛋白以可溶性状态存在，目的蛋白占细菌可溶性蛋白总量25％以上。应用纯化技术获得融合蛋白MNP‑VTG，通过蔗糖酶酶切将标签MNP从融合蛋白中分离获得目的蛋白VTG单体。该方法表达高效纯化VTG简便，因是可溶性，分离比包涵体简单，无需复性。获得的重组VTG为后续应用提供了稳定均一的原料基础。给重组蛋白可以用于生物活性功能研究，亦可以制备相应抗体开展检测研究。