单核细胞增生李斯特氏菌

摘要： 目的:分析食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测结果,以及时发现食品安全隐患,为食品安全监管提供参考依据。方法:严格按照《全国食源性致病菌监测工作手册》中的单核细胞增生李斯特氏菌检验标准,对某市2021年1—12月定期采样的10类常用食品进行单核细胞增生李斯特氏菌检测,分析其阳性检出率。结果:897份10类常用食品中,检出单核细胞增生李斯特氏菌36份,阳性检出率为4.01%,结论:食品中存在单核细胞增生李斯特氏菌污染的风险,其中以凉拌菜及冷藏食品的污染风险最高,应加强该方面的防控,确保食品安全。

摘要： 单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)是一种人畜共患病的病原菌,是一种常见的土壤细菌,能引起严重食物中毒,感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。单核细胞增生李斯特氏菌广泛存在于自然界中,食品中存在的单核细胞增生李斯特氏菌对人类的安全具有一定的威胁,该菌在4°C的环境中仍可生长繁殖,是冷藏食品中威胁人类健康的主要病原菌之一。本文通过采用国家标准检测方法《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》(GB 4789.30—2016)对大量肉、奶、蛋和水产品等产品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测,总结了一些食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测经验,主要从试剂准备、增菌、划线分离及生化鉴定等方面阐述了对单核细胞增生李斯特检测的一些理解,以期为食品检测工作中单核细胞增生李斯特氏菌的检测提供部分参考。

摘要： 本文通过改变丙酮酸钠以及酵母浸膏添加量,对李氏增菌肉汤(LB_(1))进行了改良。通过吸光度法以及平板计数法测定不同优化条件下单核细胞增生李斯特氏菌生长曲线,并采用实时荧光PCR对增菌结果进行特异性验证。得到改良后的增菌液配方为:在商品化李氏增菌肉汤(LB_(1))的基础上,添加1 g·L^(-1)的丙酮酸钠,15 g·L^(-1)的酵母浸膏,此时前增菌时间可缩短至8 h,且经过验证,特异性良好。使用改良后的李氏增菌肉汤(LB_(1))大大缩短了增菌时间,特异性良好,值得推广和应用。

摘要： 单核细胞增生李斯特氏菌作为一种食源性致病菌,该菌可存在于各类食品中,尤其是即食类食品,也可在食品加工环境包括生产设备、用具、地板和排水沟等中长期生存。虽然发病率相对于其他食源性致病菌较低,但危害较大。因此,对加工环境中的单核细胞增生李斯特氏菌的污染控制尤为重要。加工环境中李斯特菌监控作为一种预警和验证手段,可以在终产品检出单核细胞增生李斯特氏菌之前做好预防措施。本文汇总分析了多个加工肉制品企业环境监测的经验,构建出肉制品加工过程环境中李斯特菌监控基础方案,包括较为详细的区域划分、采样分区、采样及检测方法、预防措施和纠正措施等,形成适合自身企业的环境李斯特菌监控方案,为肉制品加工行业卫生规范细化提供一定参考依据。

摘要： 为了提升食品检验检测机构对食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检验能力,提高微生物实验室外部质量控制水平。本实验室参加中国检验检疫科学研究院测试评估中心组织的ACAS-PT1108(2021)乳粉中单核细胞增生李斯特氏菌检测能力验证,参考参试指导书、《食品安全国家标准 食品微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验》(GB 4789.30—2016)、海博单增李斯特氏菌成套生化鉴定管和MicroScan WalkAway 40 Plus全自动微生物生化鉴定仪。结果表明,参试样品编号21-T031为单核细胞增生李斯特氏菌,样品编号21-U887未检出单核细胞增生李斯特氏菌,经鉴定为伊氏李斯特氏菌,最终能力验证结果评价为满意,可见本实验室具有成熟的单核细胞增生李斯特氏菌检验能力。

摘要： 通过考察市售单增李斯特菌国标检验培养基对单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,LM,以下简称单增李斯特菌)和非单增李斯特菌的增菌检测效果,比较不同品牌培养基的质量。该研究采用螺旋涂布计数法,定量测定30株单增李斯特菌和9株非单增李斯特菌在4个品牌的李氏增菌肉汤(LB_(1)、LB_(2))和6个品牌的PALCAM琼脂培养基、李斯特氏菌显色培养基中的生长情况。实验结果表明:30株单增李斯特菌在4个品牌的LB;增菌肉汤中的浓度均值为2.04×10^(7)CFU/m L~4.59×10^(7)CFU/m L;在LB;增菌肉汤中的浓度为2.36×10^(7)CFU/m L~2.69×10^(7)CFU/m L;在D品牌的PALCAM琼脂培养基中的生长率均值为0.55,在其余5个品牌的PALCAM琼脂培养基和6个品牌的李斯特氏菌显色培养基中的生长率均值均超过0.85。30株单增李斯特菌在李氏增菌肉汤(LB_(1)、LB_(2))、PALCAM琼脂培养基、李斯特氏菌显色培养基中的增菌检测效果存在显著性差异(p<0.05)。4个品牌的李氏增菌肉汤的增菌效果和6个品牌PALCAM琼脂培养基、李斯特氏显色培养基的检测效果存在显著性差异(p<0.01)。该研究结果表明市售单增李斯特菌国标检验培养基质量差异大。

摘要： 目的:为掌握本实验室食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测能力情况,自愿参加中国食品药品检定研究院组织的食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测能力验证。方法:采用常规培养法、全自动酶联免疫荧光分析仪法和实时荧光PCR法3种检测方法进行食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测分析。结果:CODE034样品检出单核细胞增生李斯特氏菌,CODE164样品未检出。结论:3种方法均取得了较好的实验结果。以常规培养法为基础,以其他检测方法为辅助,能够准确、快速地取得实验结果,并应用于其他能力样品的检测。

摘要： 为研究X射线辐照对冷鲜猪肉品质的影响。该实验用0.1~1.0 kGy梯度的辐照剂量对纯培养细菌、冷鲜猪肉进行处理,评估不同辐照剂量和贮藏时间下微生物、理化指标和感官特性的变化。结果表明:微生物菌落数随辐照剂量的增加而减少。纯培养大肠杆菌和单核细胞增生李斯特氏菌的D10值分别为0.177 kGy和0.180 kGy。0.6 kGy X射线辐照处理时,纯培养细菌菌落数显著(p0.05)差异,后期感官评分下降缓慢;与对照相比TVB-N和pH值的上升速率在贮藏期内显著降低(p<0.05);辐照后冷鲜猪肉TBA值有所增加,但在贮藏中对照组TBA值上升速率大于辐照组。综合考虑,1.0 kGy X射线辐照处理冷鲜猪肉,在保证冷鲜猪肉符合国家食品安全标准规定的同时将货架期延长了4~5 d,为冷鲜猪肉的辐照保鲜技术提供科学依据。

摘要： 引言单核细胞增生李斯特氏菌是普遍存在于自然环境中的革兰氏阳性、嗜冷、兼性厌氧细菌。同时,也是一种食源性的人畜共患病的病原菌,欧美国家曾多次暴发由于食用了受单增李斯特氏菌污染的肉制品、奶制品、蔬菜及水果等而引发的严重的食物中毒事件。在《GB 29921-2021食品安全国家标准食品中致病菌限量》中,对乳制品、肉制品(包括熟肉制品和即食生肉制品)、水产制品、即食果蔬制品、冷冻饮品均有五份样品中均不得检出单增李斯特氏菌(n=5,c=0,m=0)的规定;同样,在2022年3月7日实施的《GB 31607-2021食品安全国家标准散装即食食品中致病菌限量》中“部分或未经热处理散装即食食品”:单核细胞增生李斯特氏菌限量为0/25g(mL)。由此类标准可见,国家对于食品中“单核细胞增生李斯特氏菌”的管理是十分严格的。

摘要： 目的 建立一种近红外荧光免疫法快速检测单增李斯特氏菌的方法 .方法 采用近红外荧光染料Dylight800标记单增李斯特菌单克隆抗体,结合免疫侧向流技术制备单增李斯特菌快速检测试纸条.结果 整个实验过程仅需45 min,对食品中单增李斯特氏菌最低检测限为500 CFU/mL,与其他5种食源性致病菌均无交叉反应.特异性为89.47％,敏感性为100％.采用近红外荧光免疫层析法和传统方法 对30份食品进行检测,结果 发现2种方法 符合性达93.3％.结论 所研制的单增李斯特菌的近红外快检试纸条具有特异性、敏感性较高的特点,适用于食品样本中单增李斯特菌的即时检测.

摘要： 目的：研究不同浓度酸性电解水对副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌单增李斯特菌的杀菌作用,比较酸性电解水对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的杀菌效果. 方法：采用传统的平板计数法进行细菌计数,扫描电镜观察细菌细胞的形态变化,琼脂糖胶电泳检测细菌DNA变化和BSA法进行细菌蛋白质泄露测定. 结果：酸性电解水对副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌均具有很强的杀灭效果,其杀菌效果随着电解水浓度的增加而增强.较高浓度的电解水处理后,副溶血性弧菌几乎全部杀灭,单核细胞增生李斯特氏菌菌落总数降低了1.45log CFU/mL.扫描电镜实验表明,经酸性电解水处理的副溶血性弧菌坍塌明显,且随着酸性电解水浓度的升高,细胞形态崩解严重,细菌形状模糊. 结论：相较于单核细胞增生李斯特氏菌,酸性电解水对革兰氏阴性菌副溶血性弧菌有明显的杀菌效果.

摘要： 比较4种李斯特氏菌显色培养基在单核细胞增生李斯特氏菌检验中的检测效果,验证检测结果的准确性.分别按照国家标准GB4789.30-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》和GB4789.28-2013《食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求》检验方法,添加标准菌株单核细胞增生李斯特氏菌、英诺克李斯特氏菌、伊氏李斯特氏菌、斯氏李斯特氏菌、大肠埃希氏菌、粪肠球菌等,对4种李斯特氏菌显色培养基开展方法学验证.验证结果显示,Cl、H2、H3、L44种显色培养基目标菌生长率分别为0.94、0.88、0.87、0.85,非目标菌定量结果均小于1,非目标菌定性结果除伊氏李斯特氏菌外均能显著区分菌落形态;人工污染样品加入10CFU/mL单核细胞增生李斯特氏菌时,4种显色培养基均能准确分离出目标菌,均满足GB4789.30-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》对单核细胞增生李斯特氏菌分离检验的要求.

摘要： 采用自行建立和优化的依赖于核酸序列恒温扩增(Nucleic Acid Sequence-based Amplification，NASBA)检测体系，对单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)进行检测。采用单核细胞增生李斯特氏菌的iap基因为目的片段设计特异性引物，建成可快速检测单核细胞增生李斯特氏菌的NASBA检测法，并进行了特异性和灵敏度试验。结果表明：所建立起的NASBA检测方法，灵敏度为4.7×102 cfu/ml，高于普通PCR方法。

摘要： 目的:为掌握辽宁省食品中单核细胞增生李斯特氏菌污染状况,构建食品中单核细胞增生李斯特氏菌污染数据库.方法:在辽宁省选取6个具有代表性城市建立监测哨点,定期对6类食品进行采样,检验采用增菌液(LB1、LB2)增菌后,用科玛嘉显色培养基分离,再做相应的生化及API Listeria快速反应板鉴定.结果:检测6类490份食品样品,检出单核细胞增生李斯特氏菌13株,检出率为2.65％.结论:辽宁省食品均不同程度受到单核细胞增生李斯特氏菌的污染,尤以生禽肉污染严重,生畜肉次之,动物性水产品、生食蔬菜少见.

摘要： 选择AscⅠ制取限制性大片段, 对某糕点生产厂生产线上检出的43株单核细胞增生李斯特氏菌进行了限制性大片段脉冲场电泳分析,得到了6种型别,命名为A-F型,其中占主导的污染菌株为A型,其次为F型.对主要型别的菌株在生产区的分布和流动情况进行了分析.分析表明A和D型菌株在生产区域呈交叉污染情形;F型菌株的污染线路较为清晰,源头明确A和F型菌株为驻厂污染源.使用PFGE分型分析污染菌分布与源头能够体现出不同型别菌株在该食品生产中的分布规律,可宏观准确地反映食品生产过程中的单核细胞增生李斯特氏菌污染情况.

摘要： 运用响应面方法分析乳酸对水产品中单核细胞增生李斯特菌(LMO)的作用效果，并建立回归方程，从微生物指标、理化指标等方面探索乳酸对水产品中LMO的抑制作用。结果表明乳酸对水产品中LMO具有明显的抑制作用。

摘要： 本发明提供一种单核细胞增生李斯特菌和伊氏李斯特菌多重PCR检测试剂盒。试剂盒中包括基因lmo0601检测引物以及基因

摘要： 本发明公开了一种金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、志贺氏菌及单核细胞增生李斯特菌核酸筛查方法，属微生物检验领域。利用环介导等温扩增(LAMP)技术来进行，通过使用特异性引物，利用LAMP技术平台扩增靶基因的特定区域，在阳性和阴性质控和内对照检测体系的辅助下，从分子水平对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、志贺氏菌及单核细胞增生李斯特菌进行核酸筛查或检测。本发明的方法具有简便、经济、快速、灵敏和特异的特点，具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明提供一种单核细胞增生李斯特菌和伊氏李斯特菌多重PCR检测试剂盒。试剂盒中包括基因lmo0601检测引物以及基因

摘要： 本发明公开了一种金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、志贺氏菌及单核细胞增生李斯特菌核酸筛查方法，属微生物检验领域。利用环介导等温扩增(LAMP)技术来进行，通过使用特异性引物，利用LAMP技术平台扩增靶基因的特定区域，在阳性和阴性质控和内对照检测体系的辅助下，从分子水平对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、志贺氏菌及单核细胞增生李斯特菌进行核酸筛查或检测。本发明的方法具有简便、经济、快速、灵敏和特异的特点，具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明涉及单核细胞增生李斯特氏菌检测技术领域，具体涉及一种单核细胞增生李斯特氏菌的多位点基因分型方法。本发明提供与单核细胞增生李斯特氏菌基因分型相关的7个SNP位点，利用这7个SNP位点的组合可以较为准确地进行单增李斯特菌的基因分型，对于单增李斯特菌的种间区分度较高，并且分型结果与传统的MLST分型结果可相互对应。本发明提供的多重PCR‑反向线点杂交对单增李斯特菌进行基因分型的方法能够实现高效快速的单增李斯特菌的基因分型，大大提高了单增李斯特菌检测和分型的工作效率。

摘要： 本发明提供了一种特异识别单核细胞增生李斯特氏菌的优化适配体序列及其应用，属于适配体应用生物技术领域。本发明方法以单核细胞增生李斯特氏菌为靶标，在SELEX筛选获得的原始适配体序列的基础上，利用剪裁手段获得可与靶细胞以高亲和性、高特异性结合的适配体。本发明的适配体是单核细胞增生李斯特氏菌的新型识别元件，具有灵敏度高、成本低、易制备、易修饰和标记的优势，并能应用于多种检测方法的构建。

摘要： 本发明公开了一组基于特异性靶标鉴定单核细胞增生李斯特氏菌血清型的多重PCR引物及其应用。所述特异性靶标通过比较基因组学和生物信息学挖掘获得，该组靶标具有准确度高和特异性好的特点。本发明针对新挖掘到的单增李斯特菌血清型的特异性靶标LMOf2365_2361、lmo1083、lmo1119、lmo0733基因设计特异性引物，使用特异性引物可对单增李斯特菌血清型进行PCR鉴定。本发明提供的血清型鉴定引物具有准确度高、特异性好的特点。

摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及鉴别单核细胞增生李斯特氏菌、伊氏李斯特氏菌和英诺克李斯特氏菌的方法。本发明通过对单核细胞增生李斯特氏菌、伊氏李斯特氏菌和英诺克李斯特氏菌的基因组序列进行分析，提供了用于高分辨熔解曲线技术鉴别单核细胞增生李斯特氏菌、伊氏李斯特氏菌和英诺克李斯特氏菌的特异性引物对，其序列如SEQ ID NO.1‑2所示。在此基础上，建立了利用高分辨熔解曲线技术鉴别三种李斯特氏菌的方法，具有较高的灵敏度、特异性和准确性，能够高效检出上述三种李斯特氏菌，具有操作简单、成本低、快速、高通量等优点，可用于临床检测、农业生产、食品安全等领域的李斯特氏菌的鉴别。

摘要： 本发明公开了一种双重LAMP同时检测志贺氏菌和单核细胞增生李斯特氏菌用引物组、试剂、试剂盒及方法，其通过独特的引物设计，可以实现志贺氏菌和单核细胞增生李斯特氏菌的同时检出，具有检测周期短，检测速度快等优点，本发明采用的双重LAMP检测方法可以定性分析肉制品中是否含有志贺氏菌和单核细胞增生李斯特氏菌，发挥了LAMP检测技术的优点，进一步完善肉制品中食源性致病菌的检测体系，加大对消费者利益的保护力度。

摘要： 本发明公开了一种快速富集分离单核细胞增生李斯特氏菌的检测试剂盒及制备方法。属于生物技术领域。试剂盒包括氨苄青霉素‑磁性纳米粒子复合物并提供了制备方法。本发明适用于从复杂样品基质中富集分离单核细胞增生李斯特氏菌，如食品样品等。食品样品包括各类新鲜或冷冻加工后的食品材质，如新鲜蔬菜、肉类、海鲜类等产品。