mRNA差异显示技术

摘要： 为了解抗病小麦品种Brock对白粉菌的抗性机制,采用mRNA差异显示技术(DDRT-PCR)和反向Northern杂交技术分析小麦Brock在白粉菌诱导下的差异表达基因.对照组共获得5 072个片段,诱导组获得5 366个片段,反向Northern杂交筛选后,获得94个差异表达片段.基因测序和Blast比对后,共有71个片段得到功能注释,涉及抗病防御相关基因、能量代谢相关基因、转录因子、次级代谢相关基因以及信号转导基因等.选取与RPP13同源的片段7和与MY B44同源的片段10进行半定量表达模式分析,发现白粉菌诱导后这2个基因的表达明显上调,在染菌8 h后达到峰值,表明二者可能参与Brock白粉菌侵染的早期应答反应.

摘要： 为建立适用于大豆花芽的mRNA差异显示体系,以“吉农18”花芽突变体为材料,采用RNAiso Plus试剂盒提取了大豆花芽的总RNA,并对DDRT-PCR体系中的Mg2+、dNTP及Taq酶的用量进行了优化.试验结果表明:适合大豆花芽mRNA差异显示的PCR体系(25 μL)为反转录产物用量2.0μL,锚定引物50 pmol/L,随机引物50 pmol/L,Mg2+ 1.5 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L,Taq酶1.5U.%In this study,we chose the JN18 of flower buds,and established a high efficient mRNA differential display system.Using RNAiso Plus kit extraction soybean of flower buds total RNA,reverse transcriptase cDNA synthesis,chain DDRT-PCR amplification reaction system optimization,we established a system suitable for reverse transcription of mRNA differential analysis of soybean.Conditions appropriate to analyze the soybean PCR reactions (25 μL) were 2.0 μL RT reaction first strand,50 pmol/L anchor primer,50 pmol/L random primer,1.5 mmol/L Mg2+,0.2 mmol/L dNTP and 1.5 U Taq.

摘要： 以8份芸芥自交亲和系与4份芸芥自交不亲和系为试验材料,通过正交和反交方式共组配了18个不同的杂交组合,调查了F1群体的自交亲和性与否,及1424株F2群体和626株BC1群体的性状分离情况.同时,还采用mRNA差异显示技术研究了芸芥自交亲和基因的表达器官,分离、筛选了与自交亲和性相关的特异基因片段.结果表明:芸芥自交亲和性与细胞质遗传无关,而是由一对核基因控制的简单隐性遗传性状;芸芥自交亲和基因的表达不属于组成性表达,而属于组织特异性表达;在芸芥自交亲和系的柱头cDNA扩增中共得到3条差异cDNA片段,其与芸芥自交亲和基因有密切关系.%18 hybridized combinations were made between 8 self-compatible lines and 4 self-incompatible lines, and inheritance of self-compatibility in E. Sativa Mill was analysed. Furthermore, expresstion tissue of self-compatible genes was preliminary analysed, and specific cDNA fragments related to self-compatibility were isolated and screened by using mRNA differential display technique. The results showed that all the F1 plants were self-incompatible, and the F2 and BC1 population segregated in ratio. Through chi square test, the segregation ratios of self-incompatibility to self-compatibility in F2 and BC| population were coincided with the ratio of 1:3 and 1:1, respectively. Therefore, it was inferred that the hereditary of self-compatibility in Yunjie was controlled by one pair recessive nucleus gene. Self-compatible genes of Yunjie was not constitutive expression, but that belonged to specific tissue expression. Self-compatible lines had 3 differentially expressed bands which exhibited stably with different primers, these cDNA bands were closely related to self-compatibility of Yunjie.

摘要： 目的 筛选和克隆黄花石蒜加兰他敏相关基因.方法 采用mRNA差异显示法(mRNA differential display PCR,DD-PCR),对7月份黄花石蒜产加兰他敏含量最高的部位花蕊和含量最低的部位花葶进行基因表达差异的研究,筛选其差异片段,再对差异片段进行回收、克隆、测序及序列分析和同源性比较.结果 黄花石蒜花蕊和花葶中存在明显的基因表达差异,发现差异条带44条,经序列分析和同源性比较,确认其中2个条带与黄花石蒜加兰他敏合成相关,另一条可能与加兰他敏运输代谢调控有关.结论 通过DD-PCR得到的3个同源序列为研究黄花石蒜中加兰他教的合成途径提供了有力依据.%Objective To isolate and clone the gene related to galantamine biosynthesis of Lycoris aurea Herb. Methods The specially expression cDNA fragments of the gene related to galantamine biosynthesis were screened by differential display polymerase chain reaction(DD-PCR) after extracting the total RNA from the pistils tissues and the scape tissues of the Lycoris aurea Herb cropped in July which had differential contents of the galantamine. Then these fragments were separately cloned to plasmid PMD19 -T and subsequently underwent sequence analysis and homogenous comparison. Results 44 differential display bands were found in gene expression between the pistils tissues and the scape tissues of the Lycoris aurea Herb. According to the sequence analysis and homologenous comparison, two of them were confirmed to related with galantamine biosynthesis, one of them was possible related with galantamine transport regulation. Conclusion The three homologous sequences of Lycoris aurea screened by DD-PCR provide strong basis of galantamine synthetic pathways.

摘要： 为了解草莓与恶疫霉互作的分子机制,以接种后3、5和7 d的感病草莓品种‘FDP821’的冠部为材料,利用mRNA差异显示技术研究‘FDP821’与恶疫霉亲和互作前后基因表达的差异,获得78条差异表达的cDNA片段,通过分析从中分离出恶疫霉侵染诱导表达的10个草莓基因cDNA片段。BLASTX在线分析表明,这些草莓基因的功能涉及呼吸作用、衰老和核苷运输与代谢等。为阐明草莓与恶疫霉互作的分子机制提供了重要的线索。

摘要： Comparative mRNA expression analysis of the ophthalmoplegia was made between Lantang ( one of the Chinese indigenous pig breeds) and Large White using mRNA differential display technology. Differential expression bands were recycled and re-amplified. Different expressions of five ESTss which were related to the meat quality traits were detected in the two pig breeds. ESTsp7 was expressed higher whereas ESTsp8, ESTsp9, ESTs10 and ESTsp11 were expressed lower in the Large White. Through the NC-BI, it was found that ESTsp7 and cytochrome oxidase subunit M gene in the range of 473 bp had 100% similarity. ESTsp9, ESTsp10, ESTsp11 and pig's SLN(Sarcolipin) gene had 94% -95% similarity. ESTsp8 was not matched with any other genes.%利用mRNA差异显示技术对广东省地方品种蓝塘猪和引进品种大白猪达到经济成熟时的眼肌组织mRNA进行比较分析,并对差异显示条带同收产物进行PCR扩增,检测到与肉质性状相关的5条ESTs在2个猪种中存在表达差异,其中ESTsp7在大白猪种中表达量高,而ESTsp8、ESTsp9、ESTsp10和ESTdp11在蓝塘猪中表达量高于大白猪.通过NCBI检索发现,ESTsp7序列与细胞色素c氧化酶亚单位Ⅲ基因在473 bp的范围内相似性达到100％,ESTsp9、ESTsp10和ESTsp11与猪SLN (Sarcolipin)基因相似性达到了94％～95％,而ESTsp8搜索不到相似基因.

摘要： [目的]探讨mRNA差异显示技术(DDRT)出现假阳性的原因.[方法]以大豆品种"吉林30"和"通农13"为材料,对DDRT分析中造成的假阳性进行了分析.[结果]DDRT假阳性的一个重要来源是由于单引物与cDNA组结合导致非特异性扩增造成的.在DDRT试验中,应平行设置单一引物的PCR试验以校正所得差异片段是否为假阳性或混杂有单引物PCR产物.[结论]为提高DDRT试验成功率奠定了基础.%[ Objective] The aim was to explore the reasons of false positives in Different Display Reverse Transcription (DDRT) analysis.[ Method] Soybean varieties “Jilin 30” and “Tongnong 13” were used as materials to carry out analysis on false positives in DDRT analysis.[ Result] An important origin of false positives appeared in DDRT analysis was the non-specific amplification caused by the combination of single primer and cDNA. The parallel PCR test of single primer should be set so as to verify whether the obtained fragments were the false positives or the PCR productions combined with single primer. [ Conclusion] This study had provided basis for improving the success rate of DDRT experiment.

摘要： [目的]探讨mRNA差异显示技术（DDRT）出现假阳性的原因。[方法]以大豆品种＂吉林30＂和＂通农13＂为材料,对DDR分析中造成的假阳性进行了分析。[结果]DDRT假阳性的一个重要来源是由于单引物与cDNA组结合导致非特异性扩增造成的。在DDT试验中,应平行设置单一引物的PCR试验以校正所得差异片段是否为假阳性或混杂有单引物PCR产物。[结论]为提高DDRT实验成功率奠定了基础。

摘要： 为了分析中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)抗白斑综合征病毒(WSSV)相关的分子机理,本研究以中国对虾"黄海2号"作为实验材料,进行白斑综合征病毒感染实验,感染20 d后获得了59尾存活的对虾.采用mRNA差异显示技术(DDRT-PCR)分析感染实验中早期濒死中国对虾和感染20d后仍存活对虾基因表达的差异,共回收到46个阳性差异片段.差异片段序列同源性功能分析的结果表明,差异片段所编码的蛋白主要参与氧化磷酸化、蛋白质合成、糖酵解、信号转导等生物过程.以上结果初步反映了中国对虾抗白斑综合征病毒相关基因的表达特征,为研究对虾抗白斑综合征病毒的作用机制及培育抗白斑综合征病毒对虾新品种提供了基础数据.

摘要： mRNA差异显示技术是分离差异表达基因的强有力的工具,在生命科学领域具有广泛的应用.本文介绍了mRNA差异显示技术的基本原理、优缺点,为了降低假阳性率,总结了在引物长度及特异性设计、PCR反应体系及条件优化、显示方法、假阳性的鉴定方法等方面所做的改进.分析了该技术尤其是改进了的技术在比较不同品种间的差异、寻找数量性状QTL侯选基因、研究杂种优势机制、比较世代间的差异等动物育种领域中的应用现状,并对其前景进行了展望.

摘要： mRNA差异显示技术是分离差异表达基因的强有力的工具,在生命科学领域具有广泛的应用.本文介绍了mRNA差异显示技术的基本原理、优缺点,为了降低假阳性率,总结了在引物长度及特异性设计、PCR反应体系及条件优化、显示方法、假阳性的鉴定方法等方面所做的改进.分析了该技术尤其是改进了的技术在比较不同品种间的差异、寻找数量性状QTL侯选基因、研究杂种优势机制、比较世代间的差异等动物育种领域中的应用现状,并对其前景进行了展望.

摘要： mRNA差异显示技术是分离差异表达基因的强有力的工具,在生命科学领域具有广泛的应用.本文介绍了mRNA差异显示技术的基本原理、优缺点,为了降低假阳性率,总结了在引物长度及特异性设计、PCR反应体系及条件优化、显示方法、假阳性的鉴定方法等方面所做的改进.分析了该技术尤其是改进了的技术在比较不同品种间的差异、寻找数量性状QTL侯选基因、研究杂种优势机制、比较世代间的差异等动物育种领域中的应用现状,并对其前景进行了展望.

摘要： mRNA差异显示技术是分离差异表达基因的强有力的工具,在生命科学领域具有广泛的应用.本文介绍了mRNA差异显示技术的基本原理、优缺点,为了降低假阳性率,总结了在引物长度及特异性设计、PCR反应体系及条件优化、显示方法、假阳性的鉴定方法等方面所做的改进.分析了该技术尤其是改进了的技术在比较不同品种间的差异、寻找数量性状QTL侯选基因、研究杂种优势机制、比较世代间的差异等动物育种领域中的应用现状,并对其前景进行了展望.

摘要： 真核生物mRNA差异显示技术的创立及其对该技术的一系列改进,为研究胚胎发育过程中有关基因的差异表达,以及有关基因的分子克隆提供了有效工具.文章概述了差显技术的原理及其在动物早期胚胎发育基因方面的研究进展.

摘要： 真核生物mRNA差异显示技术的创立及其对该技术的一系列改进,为研究胚胎发育过程中有关基因的差异表达,以及有关基因的分子克隆提供了有效工具.文章概述了差显技术的原理及其在动物早期胚胎发育基因方面的研究进展.

摘要： 真核生物mRNA差异显示技术的创立及其对该技术的一系列改进,为研究胚胎发育过程中有关基因的差异表达,以及有关基因的分子克隆提供了有效工具.文章概述了差显技术的原理及其在动物早期胚胎发育基因方面的研究进展.

摘要： 真核生物mRNA差异显示技术的创立及其对该技术的一系列改进,为研究胚胎发育过程中有关基因的差异表达,以及有关基因的分子克隆提供了有效工具.文章概述了差显技术的原理及其在动物早期胚胎发育基因方面的研究进展.

摘要： 本发明公开了一种鲁棒有序的mRNA差异显示的方法，步骤是：A、提取总RNA，利用设计的带5′-端生物素标记和AcuI酶切位点的poly(T)引物反转录合成cDNA第一链，进一步用切口平移法合成双链；B、纯化回收cDNA，利用MspI进行酶切，再利用T4连接酶连接MspI接头；C、利用磁珠法分离带生物素的酶切片段，洗脱其余片段；D、利用AcuI对带生物素的酶切片段进行再次酶切，通过T4连接酶连接AcuI假接头；E、常规cDNA-AFLP的预扩增和选择性扩增；F、尿素变性PAGE凝胶电泳及差异扩增片段显示。差异片段可被切下回收、重扩、克隆和测序，供进一步分析。本法具有较高灵敏度、精确度、覆盖率、高通量和重复性，适于常规分子生物学实验室进行各种差异表达研究。

摘要： 本发明公开了一种差异核酸酶切方法及其在LC‑MS法检测mRNA内部修饰中的应用。本发明利用S1核酸酶和磷酸二酯酶I对mRNA的5’端帽子结构的酶切具有差异性的特点，使用S1核酸酶和磷酸二酯酶I分别将mRNA酶解为核苷后进行LC‑MS检测分析，结合这两种酶酶解的检测结果可以区分出mRNA帽子和mRNA内部的

摘要： 本发明实施例涉及图像显示技术领域，公开了一种显示装置的显示差异判定方法、系统及显示装置，显示差异判定方法包括：获取在不同灰阶下屏下摄像区域的多个第一显示亮度，以及非屏下摄像区域的多个第二显示亮度；根据多个第一显示亮度，得到用于表征屏下摄像区域显示效果的多个第一特征参数；根据多个第二显示亮度，得到用于表征非屏下摄像区域显示效果的多个第二特征参数；计算多个第一特征参数和多个第二特征参数在相同灰阶下的多个差异值，并根据多个差异值判定屏下摄像区域和非屏下摄像区域的显示差异。本发明提供的显示装置的显示差异判定方法、系统及显示装置能够降低显示装置的显示差异判定难度，提高显示差异判定的准确性。

摘要： 本发明公开涉及一种沉浸式LED显示屏的显示差异校正方法及装置，该方法包括：对该LED显示屏中各个显示面在不同观察角度下所显示的亮度值进行测量，获取亮度值与观察角度之间的映射关系；根据各个显示面的尺寸和用户的视线高度，确定用户在每一个显示面上的视野范围；根据映射关系在各个显示面中确定该视野范围内包含的目标观察角度和目标亮度值；根据最小目标亮度值和每个灯点的原始亮度值，确定显示面上每个显示区域的目标校正系数；根据目标校正系数对每个显示区域内的灯点进行校正。能够根据用户针对于各个显示面的视野范围以及观察角度与显示亮度的映射关系，对用户视野范围内每个显示区域的亮度进行校正，提高沉浸式LED显示屏的显示效果。

摘要： 本发明提供一种显示控制方法，包括：在所述显示面板显示的灰阶为预设的灰阶集合中第i个灰阶的情况下，采集所述第二显示区域中的目标区域以及所述第一显示区域显示预设的颜色集合中的第j种颜色的区域的颜色数据；根据所述颜色数据确定所述目标区域显示所述第j种颜色的色坐标与所述第二显示区域显示所述第j种颜色的色坐标的差异信息；根据所述差异信息确定第ij调整信息并存储。根据本公开的实施例，当显示面板在第一显示区域和第二显示区域显示相同颜色的图像时，第一显示区域和第二显示区域显示的颜色不会存在色偏，保证显示面板整体上具有良好的显示效果，进而保证用户良好的观看效果，以便提升用户观看体验。

摘要： 本发明公开了一种鲁棒有序的mRNA差异显示的方法，步骤是：A.提取总RNA，利用设计的带5′－端生物素标记和AcuI酶切位点的poly(T)引物反转录合成cDNA第一链，进一步用切口平移法合成双链；B.纯化回收cDNA，利用MspI进行酶切，再利用T4连接酶连接MspI接头；C.利用磁珠法分离带生物素的酶切片段，洗脱其余片段；D.利用AcuI对带生物素的酶切片段进行再次酶切，通过T4连接酶连接AcuI假接头；E.常规cDNA－AFLP的预扩增和选择性扩增；F.尿素变性PAGE凝胶电泳及差异扩增片段显示。差异片段可被切下回收、重扩、克隆和测序，供进一步分析。本法具有较高灵敏度、精确度、覆盖率、高通量和重复性，适于常规分子生物学实验室进行各种差异表达研究。

摘要： 本发明公开了一种mRNA 5’3’末端差异的快速检测方法。所述方法先利用HISAT2将对照组与实验组测得的read比对到GRCh38参考序列上，通过序列注释信息，选取基因间区的片段进行后续分析，然后利用read间的重叠序列，将read逐一组装在一起，形成基因的5’或3’延长序列，之后根据基因的mRNA5’或3’延长序列，形成同种型转录本，比较实验组与对照组，如果满足实验组的长度长于对照组的长度200nt以上且FPKM实验组/FPKM对照组的比值大于等于2的条件，则提取实验组相对于对照组特有的转录本，作为下游分析数据。本发明有效解决了现有mRNA片段组装的错误问题，提高了差异分析的可信性，实现了对实验组特定转录本的快速查找，使转录组数据进一步反应了研究对象的客观真实性。

摘要： 本发明公开了一种差异核酸酶切方法及其在LC‑MS法检测mRNA内部修饰中的应用。本发明利用S1核酸酶和磷酸二酯酶I对mRNA的5’端帽子结构的酶切具有差异性的特点，使用S1核酸酶和磷酸二酯酶I分别将mRNA酶解为核苷后进行LC‑MS检测分析，结合这两种酶酶解的检测结果可以区分出mRNA帽子和mRNA内部的

摘要： 给出了一种定性和定量测定在人体生物组织中人淀粉样蛋白的前体蛋白质(APP)的各种mRNA的表达的方法。该方法可用于测定与正常组织有差异的表达。

摘要： 本发明实施例涉及图像显示技术领域，公开了一种显示装置的显示差异判定方法、系统及显示装置，显示差异判定方法包括：获取在不同灰阶下屏下摄像区域的多个第一显示亮度，以及非屏下摄像区域的多个第二显示亮度；根据多个第一显示亮度，得到用于表征屏下摄像区域显示效果的多个第一特征参数；根据多个第二显示亮度，得到用于表征非屏下摄像区域显示效果的多个第二特征参数；计算多个第一特征参数和多个第二特征参数在相同灰阶下的多个差异值，并根据多个差异值判定屏下摄像区域和非屏下摄像区域的显示差异。本发明提供的显示装置的显示差异判定方法、系统及显示装置能够降低显示装置的显示差异判定难度，提高显示差异判定的准确性。