北细辛

摘要： 为进一步挖掘甲基丁香酚合成相关酶基因,解析北细辛次生代谢途径,根据北细辛转录组数据库信息,筛选和克隆了AhOMT1基因,并进行了相应的生物信息学分析及原核表达分析。结果表明,AhOMT1基因包含的开放阅读框为1089 bp,编码362个氨基酸,理论分子质量为40.23 ku,等电点为5.34,AhOMT1蛋白为亲水性蛋白,无跨膜结构,无信号肽序列;AhOMT1基因具有二聚化结构域与甲基转移酶结构域,AhOMT1与催化类黄酮、丁香酚类化合物的O-甲基转移酶的同源性较高;构建pET-32b-AhOMT1原核表达载体,成功诱导表达约60 ku的重组蛋白;确定了最佳诱导条件是0.2 mmol/L IPTG,16°C诱导16 h,该诱导条件下的重组蛋白多以可溶性蛋白形式存在;使用Ni^(2+)树脂分离纯化AhOMT1蛋白,以200 mmol/L咪唑洗脱可得到最大量的蛋白。该研究首次克隆了北细辛AhOMT1基因,构建原核表达载体,筛选出AhOMT1蛋白最佳诱导条件。

摘要： 综合评价不同产地北细辛药材的质量,为北细辛质量评价研究提供参考。以《中国药典》2020年版为依据,对不同产地的15批北细辛药材进行总灰分、挥发油含量、细辛脂素含量、醇溶性浸出物含量检测,采用熵权TOPSIS法分析各检测项的权重,综合评价不同产区细辛药材的整体质量。15批北细辛药材中水分含量为2.38%~3.57%,平均值为3.01%;总灰分为3.44%~5.54%,平均值为4.25%;醇溶性浸出物为8.96%~9.23%,平均值为9.09%;挥发油含量范围为2.06%~2.44%,平均值为2.26%;细辛脂素含量为0.22%~0.27%,平均值为0.24%。总灰分、醇溶性浸出物含量、挥发油含量和细辛脂素含量四项权重分别是0.169、0.256、0.385、0.190;15批北细辛药材相对贴近度为0.130~0.910,其中有6批药材超过0.6,其产地主要位于辽宁省和吉林省交界区域,其中辽宁省本溪市恒仁县的两批饮片排名前3。综上,采用熵权TOPSIS法可对北细辛药材质量进行综合评价;位于辽宁省和吉林省交界处的产地所生产的北细辛质量较优,其中辽宁省本溪市恒仁县所产的北细辛饮片质量最佳。

摘要： 丁香酚合成酶(eugenol synthase,EGS)是北细辛(Asarum heterotropoides)主要活性成分甲基丁香酚体内合成途径中的关键酶之一.该研究根据北细辛转录组数据库中筛选到的序列设计特异引物,以RT-PCR法扩增获得北细辛丁香酚合成酶基因(AhEGS)的开放阅读框(ORF)序列,进行了相应的生物信息学分析.同时运用实时定量PCR法分析AhEGS在不同发育时期(幼叶期、花期、果期)和不同组织部位(叶、根茎、根)中的表达谱,并进行原核表达分析.结果显示:(1)AhEGS基因ORF序列长为951 bp,编码316个氨基酸,理论分子量为34.93 kD,等电点为6.19,AhEGS蛋白为亲水性蛋白,无跨膜结构,无信号肽序列;同源序列比对发现,北细辛AhEGS与月季RcEGS(AFQ98278.1)同源性最高.(2)实时定量PCR分析表明,AhEGS基因在北细辛幼叶期的根中表达量最高.(3)成功构建了原核表达载体pET28a-AhEGS-BL21,经pET28a-AhEGS重组子转化E.coli BL21(DE3),SDS-PAGE检测显示在大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)中诱导产生了35 kD左右的特异性蛋白,与理论分子量一致;最佳诱导条件为16°C、14 h,IPTG浓度为0.2 mmol/L.该研究首次克隆了北细辛的EGS基因,构建了原核表达载体,筛选出该蛋白最佳诱导条件,研究结果为北细辛甲基丁香酚代谢工程的应用奠定基础.

摘要： 为了探究贮存时间对北细辛药材质量的影响,建立HPLC法测定北细辛中细辛脂素含量,在温度(15±2)°C的条件下放置12个月,分析北细辛中细辛脂素含量变化规律.研究结果表明,运用本文建立的含量测定方法,细辛脂素浓度在0.1～50μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.9996),平均加样回收率为98.76％,RSD值为1.81％.放置12个月内细辛脂素具有良好的稳定性,含量并无明显的降低或增加,为北细辛贮藏条件的深入研究提供参考.

摘要： 目的 建立HPLC-FLD法测定北细辛中甲基丁香酚含量的方法.方法 采用Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈为流动相A,0.1％磷酸溶液为流动相B,梯度洗脱;激发波长为270 nm;发射波长为312nm;流速为1.0 mL/min;柱温为30°C;进样量为20μL.结果 甲基丁香酚浓度在1.01～101μg/mL范围与峰面积呈良好的线性关系,线性方程Y=4500X-1010.1,r=0.9997.精密度、稳定性、重复性试验RSD值均≤2％,平均加样回收率为98.44％,RSD值为1.87％.结论 本实验所建立的方法简便快捷、精密度和准确度高、测定结果稳定可靠,适用于北细辛药材中甲基丁香酚的定量分析.

摘要： 建立了北细辛挥发性成分的顶空固相微萃取/气相色谱-质谱法(HS-SPME/GC-MS)分析方法,并对6个不同产地北细辛进行分析,利用谱库检索和保留指数对挥发性成分进行鉴定,从6个产地的北细辛中共鉴定出68种挥发性成分,挥发性成分中甲基丁香酚的相对含量最高,峰面积百分比为17.20％～33.80％.将HS-SPME/GC-MS法应用于北细辛挥发性成分的研究不仅能反映不同产地北细辛挥发性成分的整体差异,且方法简单快速,为北细辛挥发性的质量评价提供新思路.

摘要： 为了探究贮存时间对北细辛药材质量的影响,建立HPLC法测定北细辛中细辛脂素含量,在温度(15±2)°C的条件下放置12个月,分析北细辛中细辛脂素含量变化规律。研究结果表明,运用本文建立的含量测定方法,细辛脂素浓度在0.1~50μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.9996),平均加样回收率为98.76%,RSD值为1.81%。放置12个月内细辛脂素具有良好的稳定性,含量并无明显的降低或增加,为北细辛贮藏条件的深入研究提供参考。

摘要： 目的 研究北细辛再生植株形态结构,并通过GC-MS法分析其挥发油成分.方法 常规石蜡切片法观察再生植株解剖结构.微波辅助萃取法提取挥发油后,GC-MS法对其进行分离鉴定.结果 北细辛再生植株无地上茎,具有多数不定根,2枚真叶基生;根为三原型,由表皮、皮层、中柱3部分组成;叶柄维管束由基部到上部具有3-5-3的规律.再生植株与原植株根中挥发油成分相同,均以甲基丁香酚和黄樟醚为主;两者叶中挥发油成分不相同,其中前者相对含有量较高的为黄樟醚和甲基丁香酚;后者黄樟醚相对含有量极低,并且未检测出甲基丁香酚.结论 北细辛再生植株未发生明显表型变异,其挥发油主要成分为黄樟醚和甲基丁香酚.

摘要： 目的测定北细辛不同部位黄樟醚含量方法:采用ZORBAX SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-水,流速1.0 mL·min-1,检测波长287 nm,柱温35°C.结果黄樟醚进样量在5～500μg·mL-1内线性关系良好(r=0.99970).平均回收率为99.58％,RSD值为1.304％.结论该方法简便、可行,重现性好,为细辛不同药用部位质量控制提供参考.

摘要： 过对东北三省野生北细辛资源的地理分布、生态环境、群落类型、单位面积蕴藏量等进行调查研究明确了北细辛适宜的生态条件,为北细辛的栽培和野生抚育提供了依据.

摘要： 选用北细辛不同的外植体,在不同的培养基上加入不同浓度配比的外源激素进行诱导,筛选北细辛愈伤组织诱导的适宜条件,将愈伤组织接种到分化培养基中,筛选北细辛分化芽培养基.结果表明:北细辛的根茎为最佳外植体,北细辛愈伤组织最适培养基为MS+6-BA(0.6mg/L) +NAA(0.15mg/L),北细辛分化芽最适培养基为MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.lmg/L.

摘要： 2004年至2005年作者对长白山不同产区北细辛进行了动态研究，采样共26份，并对其进行了理化分析，含水分在5.8～12.7％之间;总灰分在6.6～12.7％之间，酸不溶性灰分在0.9～5.6％之间;砷盐均未过百万分之二;重金属均未过百万分之二十;水溶性浸出物在19.4～29.8％之间，醇溶性浸出物在8.9～19.2％之间;有机氯类农药残留量，∑BHC在0～0.0429之间;总DDT为零;PCNB在0～0.0013之间。26批样品挥发油含量在1.6～2.7％之间，对其中6批样品挥发油含量做了深入分析，全草挥发油含量在2.61％～2.43％(ml/g)之间;根及根茎的挥发油在3.20％～3.04％(ml/g)之间;茎和叶的挥发油含量为0.36％～0.31％(ml/g)之间;并应用气相色谱-质谱分析的方法对北细辛根和根茎中的挥发性成分进行了化学成分鉴定;而后又应用高效液相色谱法对不同产地细辛中马兜铃酸的含量进行了测定。

摘要： 北细辛(Asarum heterotropoides Fr.Schmidt.Var.mand shricum(Maxim) kitag.)是我国北方大宗地道药材,同时也是香料及油精及化工业的重要原料，并于2000年被列为吉林省首批十种道地药材GAP基地建设品种，近些年随着对北细辛的深入研究其药用价值及经济价值不断提高，市场需求量不断扩增，自20世纪70年代起便开始了细辛野生驯化栽培技术研究，并取得了较全面的成功，栽培面积逐渐扩大，但栽培技术参差不齐，使北细辛产量不高质量不稳。关于北细辛的常用栽培技术早有学者报导，可是关于营养积累及合理施肥等方面的研究尚未见报导，本研究旨在分析北细辛不同年生不同生育时期各器官中氮、磷、钾三要素含量变化及累积动态，探明其营养积累特性，为北细辛的优质高产栽培合理施肥提供理论依据。

摘要： 本发明属于药材质量检测技术领域，具体涉及一种用于治疗偏头痛的细辛或细辛提取物的质量检测方法。本发明通过网络药理学的方法研究了中药材细辛治疗偏头痛的物质基础，并基于此提出了通过检测细辛或细辛提取物中去甲乌药碱和樱桃苷的含量对其进行质量检测的方法。利用本发明的质量检测方法，能够有效选择出对偏头痛治疗效果更好的细辛提取物、细辛药材或细辛炮制品，在临床应用中具有很好的前景。

摘要： 本发明提供了一种检测辽细辛DNA条形码的试剂及辽细辛的荧光检测方法。本发明所述试剂包括包括AuNPs修饰的辽细辛特异性上游引物、荧光标记物修饰的辽细辛特异性下游引物，所述辽细辛引物特异性上游引物、荧光标记物修饰的辽细辛特异性下游引物序列分别：5’‑SH‑(CH

摘要： 本发明公开了乙酸α‑细辛醇酯与α‑细辛醇的合成方法。所公开的乙酸α‑细辛醇酯合成方法包括：在钯催化剂和配体存在条件下，1,2,4‑三甲氧基苯在与乙酸烯丙酯反应生成乙酸α‑细辛醇酯，所述配体选自乙酰甘氨酸、乙酰脯氨酸和烟酰甘氨酸中一种或两种以上的组合。所公开的α‑细辛醇的合成方法包括：在碱性条件下乙酸α‑细辛醇酯水解得α‑细辛醇。本发明具有原料简单易得，原子经济性与步骤经济性高，产率高，适合大规模工业化生产。

摘要： 本发明提供一种北细辛专用叶面肥及其施用方法。依照北细辛生长发育及增产规律，在北细辛生长的关键3年里，给予足够的养分，能有效促进北细辛充分生长，据此，本发明提供一种水溶性的北细辛营养及功能型叶面肥，所述叶面肥选择尿素、磷酸二氢钾作为速效氮磷钾；硫酸镁、硫酸亚铁、硼酸、硫酸锰、硫酸锌提供中量元素和微量元素；黄腐酸钾、复硝酚钠、水杨酸作为生长调节剂；柠檬酸、乙二胺四乙酸二钠、吐温‑80作为助剂。这些试剂组合使得各组分产生协同作用，从而有效促进北细辛根系生长和营养吸收，保护北细辛光合器官，促进北细辛光合作用。

摘要： 本发明公开了一种北细辛种子的贮藏方法，包括如下步骤：种子处理：对采收后的北细辛种子进行处理使其含水量为60-65%；混合：将处理后的种子与含水量为60-65%的辅料混合，其中所述辅料为河沙与锯末的混合物；种子贮藏：将种子与辅料的混合物置于能够透气的容器中在4°C下贮藏，贮藏期间维持种子的含水量始终为60-65%。本发明在果实、种子处理和种子贮藏过程中严格控制温度，有效防止了种子劣变，保证了贮藏后的种子活力接近于鲜种子的活力水平；可使北细辛种子贮藏4年以上，贮藏后的种子萌发率高达90%以上；有效地延长了北细辛种子寿命，显著延长了北细辛作为短命种子的存活年限；贮藏种子方法简单，贮藏投入成本较低。

摘要： 本发明属于医药技术领域，涉及中草药有毒有害成分的去除、有效成分的制备工艺，特别是一种从北细辛中制备无毒提取物的制备工艺。本发明包括将北细辛全草用热水煎煮提取，滤液冷却，加入HCl、NaOH调节pH值。并通过阳离子、阴离子交换树脂等提纯步骤，将北细辛药材中挥发性的黄樟醚、非挥发性成分马兜铃酸、乌头碱和去甲乌头碱等有毒成分去除，而有效保留其中的有效成分的方法。本发明可同时将北细辛药材中的多种有毒有害成分一并去除，可明显缩短生产周期、降低生产成本。脱毒工艺兼顾性强、工艺简单、能源消耗低、节约资源、生产过程中不对环境造成污染。

摘要： 本发明提供一种北细辛专用叶面肥及其施用方法。依照北细辛生长发育及增产规律，在北细辛生长的关键3年里，给予足够的养分，能有效促进北细辛充分生长，据此，本发明提供一种水溶性的北细辛营养及功能型叶面肥，所述叶面肥选择尿素、磷酸二氢钾作为速效氮磷钾；硫酸镁、硫酸亚铁、硼酸、硫酸锰、硫酸锌提供中量元素和微量元素；黄腐酸钾、复硝酚钠、水杨酸作为生长调节剂；柠檬酸、乙二胺四乙酸二钠、吐温‑80作为助剂。这些试剂组合使得各组分产生协同作用，从而有效促进北细辛根系生长和营养吸收，保护北细辛光合器官，促进北细辛光合作用。

摘要： 本发明公开了一种北细辛种子的贮藏方法，包括如下步骤：种子处理：对采收后的北细辛种子进行处理使其含水量为60-65%；混合：将处理后的种子与含水量为60-65%的辅料混合，其中所述辅料为河沙与锯末的混合物；种子贮藏：将种子与辅料的混合物置于能够透气的容器中在4°C下贮藏，贮藏期间维持种子的含水量始终为60-65%。本发明在果实、种子处理和种子贮藏过程中严格控制温度，有效防止了种子劣变，保证了贮藏后的种子活力接近于鲜种子的活力水平；可使北细辛种子贮藏4年以上，贮藏后的种子萌发率高达90%以上；有效地延长了北细辛种子寿命，显著延长了北细辛作为短命种子的存活年限；贮藏种子方法简单，贮藏投入成本较低。

摘要： 本发明涉及用气流吹扫微注射器萃取技术与GC-MS联用检测北细辛药材的方法，包括以下几个步骤，（1）北细辛供试品溶液的制备；（2）色谱条件；（3）建立北细辛药材指纹图谱共有模式图谱；（4）指纹图谱质量控制；将所测得的供试品图谱与对照指纹图谱进行比较，并输入计算机辅助相似性评价系统进行相似度计算，得出相关系数，便可作出检测结论。本方法具有以下特点：①可以从整体上、宏观上表征北细辛药材的质量；②具有较好的专属性和重现性；可操作性强；③可用于鉴别北细辛药材的真伪。

摘要： 本发明属于医药技术领域，涉及中草药有毒有害成分的去除、有效成分的制备工艺，特别是一种从北细辛中制备无毒提取物的制备工艺。本发明包括将北细辛全草用热水煎煮提取，滤液冷却，加入HCl、NaOH调节pH值。并通过阳离子、阴离子交换树脂等提纯步骤，将北细辛药材中挥发性的黄樟醚、非挥发性成分马兜铃酸、乌头碱和去甲乌头碱等有毒成分去除，而有效保留其中的有效成分的方法。本发明可同时将北细辛药材中的多种有毒有害成分一并去除，可明显缩短生产周期、降低生产成本。脱毒工艺兼顾性强、工艺简单、能源消耗低、节约资源、生产过程中不对环境造成污染。