动物组织

摘要： 目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法同时测定猪肉、鸡肉和鱼肉中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺的分析方法。方法:样品经碱化乙酸乙酯提取,正己烷去除油脂,通过MCX固相萃取柱净化,经Waters BEH C_(18)柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,以0.1%氨水溶液-乙腈为流动相梯度洗脱,电喷雾正/负离子切换,多反应模式监测,同位素内标法定量。结果:氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考在0.5~100.0μg·L^(-1)具有良好的线性关系,相关系数(R^(2))均大于0.999,检出限均为0.1μg·kg^(-1),方法回收率为83%~112%,相对标准偏差小于10%;氟苯尼考胺在1~100μg·L^(-1)具有良好的线性关系,相关系数(R^(2))大于0.999,检出限为0.5μg·kg^(-1),方法回收率为81%~110%,相对标准偏差小于10%。结论:本方法重现性好、灵敏、准确,适用于日常大批量猪肉、鸡肉和鱼肉样品中氯霉素类药物及其代谢物残留的定性、定量分析。

摘要： 对促皮质素和硫酸鱼精蛋白两种动物组织提取生物制品进行病毒去除/灭活工艺验证。选择脂包膜病毒和非脂包膜病毒及不同的工艺步骤进行病毒去除/灭活验证。各工艺步骤均可使病毒滴度下降值大于4 logs,表明实际工艺中的丙酮沉淀工艺,低pH工艺对脂包膜指示病毒均具有快速灭活作用,加热步骤对非脂包膜病毒有快速灭活作用。

摘要： 建立了动物组织中9种多肽类抗生素残留的固相萃取-超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。样品经甲醇-0.1 mol/L盐酸(7:3,v/v)混合溶剂提取,酸性氧化铝除杂、正己烷去除油脂,亲水-亲脂平衡(hydrophilic-lipophilic balance,HLB)固相萃取柱净化,以0.2%的甲酸水溶液和乙腈为流动相,经过C_(8)色谱柱(100A,150 mm×2 mm,3μm)梯度洗脱分离,使用电喷雾正离子化和多反应监测模式检测。结果表明,万古霉素和去甲万古霉素、恩拉霉素A、恩拉霉素B、太古霉素在2~200μg/L范围内,粘杆菌素A、粘杆菌素B、杆菌肽A在5~500μg/L范围内,维吉尼霉素M1在0.1~20μg/L范围内,各化合物定量离子的峰面积和样品质量浓度之间呈现良好的线性关系(R^(2)>0.99),方法的定量限(S/N=10)为1~20μg/kg,检出限为0.3~6μg/kg;以鸡肉、猪肉、猪肝、猪肾为基质,在加标水平为1~200μg/kg时,各个化合物的平均加标回收率为74.2%~96.3%,相对标准偏差为4.3%~14.6%。该方法简便、灵敏、准确,可用于动物组织中多肽类抗生素残留的同时测定。

摘要： 兽药滥用是食品安全监督抽检重点关注的领域,更加高效准确地检测食品中的药物残留量,有助于食品全产业链规范和升级.本文参照《动物源性食品中氯霉素类药物残留检测》(GB 22338—2008)中液相色谱-质谱/质谱法测定动物组织中氯霉素的残留量,并评定检测过程的测量不确定度.该测量不确定度分析模型的建立,系统分析了检测过程不确定度的来源,并量化各个来源引入的相对标准不确定度,得到整个检测过程中的相对不确定度.通过UPLC-MS测定动物组织中氯霉素相对不确定度并进行评定,探讨检验过程中影响检测结果准确性的主要因素,为有效提高检测的准确度提供可靠依据.

摘要： 建立了一种采用液相色谱-四极杆飞行时间质谱(LC-Q-TOF/MS)用于快速筛查动物组织中多种激素残留的检测方法.样品通过乙腈和乙酸乙酯分步提取,提取液经增强型脂质去除吸附剂(EMR)净化,盐析后经N-丙基乙二胺(PSA)和官能化聚苯乙烯/二乙烯苯(PEP-2)进一步净化,以0.1％甲酸水?0.1％甲酸乙睛作为流动相进行梯度洗脱,在EclipsePlus-C18(3.0 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱上进行分离,在Q-TOF/MS正离子全扫描模式下采集质谱数据,以保留时间、精确分子质量数、同位素丰度比和二级特征碎片离子定性,待测物准分子离子峰面积定量.结果表明,所有药物在各自浓度范围内线性良好,相关系数大于0.995,在10、50、100μg/kg添加水平下,平均回收率在70.3％～116.2％之间,相对标准偏差为0.87％～8.97％,方法检测限为1～10μg/kg,定量限为3～30μg/kg.该方法通过构建一级精确质量数据库和二级谱库,结合保留时间、精确分子质量数、同位素丰度比和二级特征碎片离子,实现对目标化合物快速筛查和确证,具有简单快速、高灵敏度,高选择性和良好精密度的优势,适用于动物组织多种激素的快速筛查和定量测定.

摘要： 实验目的旨在从三种提取方法中筛选出一种经济适用、操作简单、快速且能满足后续PCR扩增检测技术的动物肌肉组织中的DNA提取方法.分别采用SDS法、试剂盒法、异硫氰酸胍法提取猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉、草鱼肉的生鲜肌肉组织以及高压肌肉组织的基因组DNA.通过酶标仪、琼脂糖凝胶电泳对提取的DNA进行质量检测,然后根据五种动物的线粒体细胞色素B基因(cytb)保守序列设计特异性引物,进行PCR扩增结果来验证方法的可行性.结果显示,异硫氰酸胍法在生鲜和高压肉中提取DNA的浓度和纯度高于SDS法,且此方法经济适用、操作简便、快速,所提取DNA质量能满足后续PCR实验的要求.

摘要： 胶原蛋白是哺乳动物各组织器官中含量最丰富、覆盖面最广,与生物体组织和器官功能息息相关的蛋白质,胶原蛋白经蛋白酶水解可形成胶原蛋白肽.本文综述了酶提胶原蛋白的原材料、所用酶的种类、相关酶提辅助技术和产物性质的检测方法,从而为胶原蛋白及胶原蛋白肽提取工艺的优化和应用市场的扩展提供理论依据.

摘要： 有限元法是指通过对医学组织图像(CT)的三维重建,将其转换为具有直观立体效果的三维有限元模型,通过对有限元模型进行材料选取、施加载荷、求解等操作,得到有限元组织模型的力学特性,从而更清楚的观察组织的应力、应变过程.该技术可以更好地处理复杂的生物力学问题而被广泛应用于生物医学领域,目前把有限元法和动物组织结合起来的研究逐渐成为了热点.论文对有限元法在动物组织模型构建上的研究前景和应用优势进行综述,为动物组织模型构建方面的研究提供新的方法和思路.

摘要： 针对最常用的两种动物抗病毒药物金刚烷胺和利巴韦林,阐述了其抗病毒作用机理及在动物体内的残留,归纳总结了药物残留仪器分析法和生物分析法检测技术的进展,结合抗病毒药物残留检测重要性和实践应用前景提出应发展ELISA检测方法.

摘要： 建立了LC-MS-MS法测定动物组织中苯乙醇胺A残留的方法.采用了高效液相色谱-串联质谱法,流动相为乙腈-0.2％甲酸水溶液(65∶35),流速为0.3ml/min,柱温为30°C,离子源为ESI+.苯乙醇胺A在2.0～100.0ng/mL的范围内呈现良好的线性,r为0.9996.方法的检测限为0.2μg/kg,定量限为0.5μg/kg.苯乙醇胺A在0.2μg/kg～10μg/kg的添加范围内平均回收率为75.2％～108.2％,批内、批间RSD均小于20％.本方法简便快捷、灵敏度高、定性准确,能满足动物性食品安全检测有关法规的要求.

摘要： 目的：对糜蛋白酶、玻璃酸酶、硫酸鱼精蛋白三种动物组织提取生物制品进行病毒去除/灭活工艺验证.方法：选择非脂包膜病毒(PPV、EMCV)进行病毒去除工艺验证,选择脂包膜病毒(X-Mulv、PRV)进行病毒灭活工艺验证.结果：病毒去除工艺验证中糜蛋白酶、玻璃酸酶、硫酸鱼精蛋白纳米膜过滤的最大滤过量分别为33mL、33mL、44mL;病毒灭活工艺验证中三种制品的灭活工艺均可有效灭活脂包膜病毒,病毒降低量均大于4Logs.结论：三种动物组织提取制品的病毒去除/灭活工艺可均保证制品的安全性.

摘要： 目的:比较酶联免疫法(ELISA)和液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定动物组织中克仑特罗残留量的准确度、精密度及检测限.方法:样品经过处理后,分别采用ELISA法和LC-MS/MS法进行测定;用ELISA法对组织样品进行初筛,测出阳性样品利用LC-MS/MS法进行确证.结果:应用ELISA测定样品猪肉样品中克仑特罗的回收率为67.0％～99.6％,批内变异系数3.4％～8.7％,批间变异系数6.1％～9.6％,灵敏度为0.025μg/L,最低检测限0.025 μg/kg; LC-MS/MS检测方法回收率88.62％～107.41％,批内变异系数4.4％～7.4％,最低检测限0.5 μg/kg;用ELISA法对50份猪肉和50份猪肝样品进行检测,筛选出3个阳性样品,经LC-MS/MS确证为阳性,两种方法检测结果一致.结论:ELISA法灵敏度和准确度较高,样品处理方法简单,成本低,适合组织中克仑特罗残留大规模筛查:LC-MS/MS准确度高,适合于阳性样品精确定量.

摘要： 建立了超高压液相色谱-电喷雾串联质谱(UPLC-MS/MS)联用同时测定动物组织中13种磺胺和6种喹诺酮类兽药的残留量的确证方法.根据样品基质和药物性质特征,对样品提取、净化方法和仪器条件进行了细致的考察,确定了以乙腈为提取溶剂,正己烷净化的前处理条件,采用梯度洗脱方式进行液相色谱分离,多反应监测模式(MRM)检测,外标法定量.在添加水平范围0.01～0.2mgkg-1内,各兽药线形相关系数均大于0.996.通过实际样品的添加回收试验,3个添加水平的回收率为70.6％～106.1％,相对标准偏差(n=5)为1.02％～9.01％,方法检出限3S/N为0.5 gkg-1.

摘要： 动物组织中药物残留是指在养殖过程中，为防治疾病而人为使用的、在生物体内产生积累或代谢不完全的药物。动物组织中的药物残留主要包括兽药的残留和激素类药物的残留，用于畜禽生产的药物种类很多，对动物组织中兽药来源及残留危害等进行概括介绍。

摘要： 建立一种可同时检测猪、牛组织(肌肉、肝脏、肾脏、脂肪、牛奶)中氟苯达唑及代谢物2-氨基氟苯达唑、噻苯达唑及代谢物5-羟基噻苯达唑药物残留的高效液相色谱—紫外检测法.猪、牛组织样品经乙腈提取,加入Na2SO4盐析去杂质,异辛烷去脂肪,MCX柱净化.以0.02mol/L乙酸铵溶液和乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长306nm.结果表明氟苯达唑及代谢物2-氨基氟苯达唑、噻苯达唑及代谢物5-羟基噻苯达唑在0.01-2.0μg/mL呈良好的线性关系,r均大于0.99.猪、牛组织中方法的最低定量限分别为5μg/kg、20μg/kg.猪、牛组织中氟苯达唑及代谢物2-氨基氟苯达唑、噻苯达唑及代谢物5-羟基噻苯达唑分别在5～200μg/kg、20～200μg/kg的浓度添加水平上,其回收率范围在60～100％之间,批内相对标准偏差小于15％、批间相对标准偏差小于20％.

摘要： 以分泌抗链霉素(SM)单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株的建立为基础,应用胶体金免疫层析技术成功研制出SM残留快速检测试纸,并对其敏感性、特异性、重复性、符合性等特性进行了测定.结果表明,检测试纸的检测限为8μg/L;检测上线为100μg/L;与双氢链霉素的交叉反应为100％,与其它抗生素类药无交叉反应;其敏感性与ELISA试剂盒相当,与ELISA试剂盒的检测结果符合率为100％;检测试纸在10min内显示结果。

摘要： 以分泌抗链霉素(SM)单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株的建立为基础,应用胶体金免疫层析技术成功研制出SM残留快速检测试纸,并对其敏感性、特异性、重复性、符合性等特性进行了测定.结果表明,检测试纸的检测限为8μg/L;检测上线为100μg/L;与双氢链霉素的交叉反应为100％,与其它抗生素类药无交叉反应;其敏感性与ELISA试剂盒相当,与ELISA试剂盒的检测结果符合率为100％;检测试纸在10min内显示结果。

摘要： 以分泌抗链霉素(SM)单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株的建立为基础,应用胶体金免疫层析技术成功研制出SM残留快速检测试纸,并对其敏感性、特异性、重复性、符合性等特性进行了测定.结果表明,检测试纸的检测限为8μg/L;检测上线为100μg/L;与双氢链霉素的交叉反应为100％,与其它抗生素类药无交叉反应;其敏感性与ELISA试剂盒相当,与ELISA试剂盒的检测结果符合率为100％;检测试纸在10min内显示结果。

摘要： 以分泌抗链霉素(SM)单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株的建立为基础,应用胶体金免疫层析技术成功研制出SM残留快速检测试纸,并对其敏感性、特异性、重复性、符合性等特性进行了测定.结果表明,检测试纸的检测限为8μg/L;检测上线为100μg/L;与双氢链霉素的交叉反应为100％,与其它抗生素类药无交叉反应;其敏感性与ELISA试剂盒相当,与ELISA试剂盒的检测结果符合率为100％;检测试纸在10min内显示结果。

摘要： 本发明涉及用于标记动物并从所述动物采样组织的耳标(1)。

摘要： 本发明提供：一种细胞外基质，其通过脂肪去除和脱细胞化大大提高了其生物相容性，并含有生长因子以控制细胞的生理活动；及用于制备该细胞外基质的方法。此外，通过使用超临界流体的溶剂提取法可以有效地获得细胞外基质，并且包含该细胞外基质的保存液可以通过防止污染而长期保存，并且具有增加的可管理性，从而可以使细胞外基质的可用性大大提高。

摘要： 本发明公开了一种家畜组织细胞制备动物细胞培养液的方法，包括以下步骤：将牛、羊、马、猪或其他家畜组织器官绞碎匀浆，制成单细胞悬液，采用反复冻融法裂解细胞，离心收集上清液，经微孔滤膜过滤后得到组织细胞提取液。本发明还公开了一种由该方法其制得的动物细胞培养液的应用，即培养动物细胞时，将由所述方法制得的组织细胞提取物作为动物细胞培养液完全或部分替代牛血清，以5％‑30％的比例添加到商品化的基本培养基中。与胎牛血清和新生牛血清相比，本发明制备的细胞培养基不但能有效的促进细胞增殖，而且批次间一致性高，价格低廉，来源广泛，不存在动物伦理的争议。

摘要： 本发明涉及基于在纯合性或杂合性的情况下对β-蛋白的2位的点状突变Ala＞Val(对应于含有770个氨基酸的β-蛋白的Ala673Val突变前体)的研究，对从人和/或动物有机体分离的生物材料进行筛选以确定表现为β-淀粉和/或淀粉样物质在人和/或动物器官和组织中异常沉积的人和/或动物病理的风险的方法。本专利提供下列可行性：(1)产生表达Ala673Val突变的单细胞或多细胞转基因有机体；(2)合成或制备具有这种突变的肽和/或它们的衍生物、和/或含有相同突变的核酸；(3)使用这些产物研究特征为β-淀粉和/或淀粉物质的异常沉积的病理的发病机理以及这些疾病的预防、诊断和护理。

摘要： 本发明属于生物组织处理和组织基质材料制备技术领域，公开了一种动物组织材料的消毒灭菌方法以及相应的动物组织浸泡溶液。采用本发明的方法和溶液，至少可使制备的动物组织材料减少细菌数量10的6次方，同时不破坏动物细胞外基质材料原有组织的基本支架结构、主要生物化学成分和生物力学性能。经本发明方法预处理的动物组织，细胞已经破碎，大部分蛋白酶已经去除，有利于组织的保存和进一步脱细胞处理，制备成完整的组织基质支架材料。

摘要： 本发明公开了一种动物肿瘤组织、临床肿瘤组织及活检肿瘤组织样本的长期冻存及复苏方法，属于动物细胞冻存技术领域。冻存方法是将新鲜组织清洗处理，用特殊的冻存液冻存；复苏方法是将冻存的组织水浴融化，用特殊的复苏液进行漂洗，用红细胞裂解液处理，离心后再用复苏液漂洗，最后得到复苏的组织细胞。本发明提供的上述方法，针对不同种类的动物组织细胞均能实现非常好的冻存和复苏效果；经过最多长达两年的冻存，复苏后仍然具有非常好的传代活性。

摘要： 本发明公开了一种在动物细胞或动物组织中表达外源基因的方法。本发明提供了一种将外源基因导入哺乳动物细胞或组织中进行基因呈递的家蚕杆状病毒载体，包括骨架载体家蚕杆状病毒BmNPV以及重组到骨架载体上的外源基因的表达盒；所述外源基因的表达盒由哺乳动物启动子、外源基因和终止子组成。本发明进一步公开了一种在动物细胞或动物组织中表达外源基因的方法，包括：将构建的家蚕杆状病毒载体感染昆虫宿主或昆虫细胞；培养被感染的昆虫宿主或昆虫细胞对家蚕杆状病毒载体进行扩增；收获并纯化所扩增产物。本发明所构建的家蚕杆状病毒基因呈递载体在动物细胞中具有不可扩增、不会与动物细胞基因组进行重组、体外大量扩增方便、安全性高等优点。

摘要： 本公开涉及一种动物组织来源的生物材料的制备方法、由其制备的动物组织来源的生物材料和使用该生物材料的3D打印方法，动物组织来源的生物材料的制备方法包括：从组织中去除细胞的脱细胞步骤；液化从液化步骤获得的细胞外基质溶液的液化步骤；和对从过滤步骤中获得的混合物进行灭菌的灭菌步骤。本公开的动物组织来源的生物材料表现出优异的生物相容性和储存稳定性。

摘要： 本发明属于生物组织处理和组织基质材料制备技术领域，公开了一种动物组织材料的消毒灭菌方法以及相应的动物组织浸泡溶液。采用本发明的方法和溶液，至少可使制备的动物组织材料减少细菌数量10的6次方，同时不破坏动物细胞外基质材料原有组织的基本支架结构、主要生物化学成分和生物力学性能。经本发明方法预处理的动物组织，细胞已经破碎，大部分蛋白酶已经去除，有利于组织的保存和进一步脱细胞处理，制备成完整的组织基质支架材料。

摘要： 本发明公开了一种在动物细胞或动物组织中表达外源基因的方法。本发明提供了一种将外源基因导入哺乳动物细胞或组织中进行基因呈递的家蚕杆状病毒载体，包括骨架载体家蚕杆状病毒BmNPV以及重组到骨架载体上的外源基因的表达盒；所述外源基因的表达盒由哺乳动物启动子、外源基因和终止子组成。本发明进一步公开了一种在动物细胞或动物组织中表达外源基因的方法，包括：将构建的家蚕杆状病毒载体感染昆虫宿主或昆虫细胞；培养被感染的昆虫宿主或昆虫细胞对家蚕杆状病毒载体进行扩增；收获并纯化所扩增产物。本发明所构建的家蚕杆状病毒基因呈递载体在动物细胞中具有不可扩增、不会与动物细胞基因组进行重组、体外大量扩增方便、安全性高等优点。