副溶血性弧菌

摘要： 目的:研究山东沿海地区食物中毒的发病特征,基于发病特征开展相关的流行病学分析,并提出当前食物中毒事件防控的重点。方法:对山东沿海地区烟台市2018—2021年突发公共卫生事件监测系统报告中记录的食物中毒事件采用描述性流行病学分析,分别统计调查年限内食物中毒事件的高发月份、致病因素等。结果:2018—2021年该地区共报告食物中毒事件123起,中毒人数累计达到2 813人;食物中毒事件集中发生于每年的第二季度和第三季度;误食携带致病微生物或毒素的食物为最主要致病因素,其中副溶血性弧菌引发的细菌性食物中毒占比高于其他致病微生物或毒素类食物中毒事件占比(P<0.05)。结论:基于山东沿海地区食物中毒流行病学特征,相关部门应在夏秋季节加强对居民的食品安全宣教工作,努力提高食物中毒事件调查处置能力。

摘要： 目的:了解厦门市水产品中副溶血性弧菌和溶藻弧菌的污染状况以及毒力基因携带情况。方法:采集厦门市售的3类210批鲜活水产品,进行副溶血性弧菌及溶藻弧菌检测分析,并采用多重荧光PCR的方法对分离得到的弧菌菌株进行毒力基因(tdh、trh、tlh)分析。结果:市售鲜活水产品的副溶血性弧菌及溶藻弧菌的总检出率分别为81.9%(172/210)、81.4%(171/210)。贝类水产品的副溶血性弧菌及溶藻弧菌检出率均最高,分别为84.4%(76/90)、90.0%(81/90);贝类水产品、海水鱼溶藻弧菌检测率均显著高于淡水鱼(P<0.05)。批发企业的弧菌污染程度最高,检出率分别是88.6%(39/44)、86.49%(38/44),批发企业的副溶血性弧菌检出率显著高于零售店(P<0.05)。从水产品中分离得到的172株副溶血性弧菌均不携带tdh基因,1.2%(2/172)菌株携带trh基因,所有菌株均携带tlh基因;171株溶藻弧菌均不携带tdh、trh基因,5.3%(9/171)菌株携带tlh基因。结论:厦门市售鲜活水产品副溶血性弧菌和溶藻弧菌的污染程度较高,部分菌株携带毒力基因,提示水产品中存在一定的食品安全风险。

摘要： 以一锅法合成一种新型的铁-铜双金属有机骨架(Fe/Cu-MOFs)纳米材料,将其作为荧光猝灭平台,以革兰氏阳性菌-单增李斯特菌和革兰氏阴性菌-副溶血性弧菌为例进行研究,建立一种简单快速的食源性致病菌检测方法。该方法对单增李斯特菌的检出限为1.00×10^(6) CFU/mL,对副溶血性弧菌的检出限为1.00×10^(4) CFU/mL,将该方法应用于基围虾和八爪鱼中单增李斯特菌和副溶血性弧菌的分析,加标回收率为94.4%~111%和89.3%~101%。本方法具有简单、快速、准确的优点,适合革兰氏阳性和阴性菌的分析,具有一定的普适性,在实际样品的分析中具有一定的应用潜力。

摘要： 该文设计了以水产致病菌群体感应系统为靶点的新型防治策略实验,构建了群体感应淬灭酶AiiA酶的原核表达系统,测定了重组酶的酶学性质,探究了该酶对副溶血性弧菌群体感应系统的调控以及对其生长、生物膜、蛋白酶、运动能力和毒力基因tlh表达的影响。结果表明重组AiiA酶可抑制副溶血性弧菌胞外基质的产生,减少生物膜的形成,显著降低细菌蛋白酶活性、运动能力并减少毒力基因tlh的表达。该综合性实验结合了基因工程、酶工程、食品贮藏原理等多领域实验技术,有利于提升学生的创新思维和实验技能。

摘要： 为建立有效鉴别副溶血性弧菌及携带耐热相关溶血毒素基因的毒性弧菌的方法,用副溶血性弧菌种属特异性基因tlh及毒性基因trh设计引物进行双重PCR检测,对双重PCR体系进行优化,并对其特异性及PCR灵敏度进行检测,验证双重PCR体系检测能力及对人工污染样品的灵敏度。结果表明,该方法对海产品中的副溶血性弧菌及携带trh毒性基因的弧菌具有检测特异性,且灵敏度较高,可为食品检测提供一定的参考依据。

摘要： 为了开发新型抗菌技术,本研究建立了一种高效的姜黄素介导的光动力技术(photodynamic technology,PDT)。以水产品中常见的致病菌(副溶血性弧菌)与腐败菌(腐败希瓦氏菌)为研究对象,通过表征PDT处理前后的菌落总数、再生长能力、细菌表面形态变化、活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生量以及定量生物被膜生物量、细胞活力,并进一步分析生物被膜的结构参数等,以此来探究PDT对副溶血性弧菌与腐败希瓦氏菌的杀灭效果。结果表明,当姜黄素浓度分别为3.0μmol/L与10μmol/L、光照时间为8 min时,副溶血性弧菌与腐败希瓦氏菌的菌落总数能降低7(lg(CFU/mL))以上。姜黄素介导的PDT抗菌机制是通过产生大量的ROS,最终导致细菌细胞壁破损进而裂解死亡。此外,当姜黄素终浓度分别为30μmol/L与50μmol/L、光照时间为60 min时,对副溶血性弧菌与腐败希瓦氏菌生物被膜总生物量的清除率分别为70%与62%。本研究为食品工业中新型PDT的设计提供了新的思路。

摘要： 为构建弧菌铁蛋白受体pvuA重组质粒,提高其在大肠杆菌BL21中的表达产量,优化表达条件,并为其免疫原性研究奠定基础,从副溶血弧菌基因组DNA扩增了弧菌铁蛋白受体pvuA基因,构建了重组质粒pET-28a(+)-ferric vibrioferrin receptor,转入大肠杆菌BL21并经异丙基硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达蛋白。在单因素试验的基础上,以菌体初始浓度、诱导时间、诱导温度、诱导剂浓度为自变量,菌体蛋白浓度为响应值,根据响应面法的Box-Benhnken中心设计原理,研究自变量及其交互作用对弧菌铁蛋白产量的影响,利用Design-Expert和响应面分析相结合的方法对诱导条件进行优化。IPTG诱导获得的重组蛋白以包涵体的形式存在,优化后最终确定重组弧菌铁蛋白受体pvuA最佳表达条件为菌体初始浓度OD600=0.6,诱导时间10 h,诱导温度37°C,IPTG浓度为1.0 mmol·L^(−1),此时包涵体沉淀中蛋白含量最高,为11.00 mg·mL^(−1)。构建了弧菌铁蛋白受体pvuA的大肠杆菌重组表达质粒,通过优化表达条件提高了纯化蛋白产率,为研究弧菌铁蛋白受体蛋白的多克隆抗体的制备和应用奠定了基础。

摘要： 副溶血性弧菌是水产品中主要的致病菌之一,既可造成养殖水产品的疾病与死亡,也可引起人类的胃肠炎等疾病,不仅具有潜在的食品安全隐患,也对消费者健康造成潜在危害。该文主要阐述了副溶血性弧菌的毒力因子耐热直接溶血素(thermostable direct hemolysin,TDH)以及分泌系统T3SS1、T3SS2在菌株体内的作用机理,并对副溶血性弧菌产生耐药性的5种机制——产生生物被膜、质粒介导耐药、产生灭活酶或钝化酶类、外排泵主动排出抗菌药物、药物靶点发生改变进行了综述。

摘要： 副溶血性弧菌是一种常见的食源性病原菌和水产致病菌。该研究通过琼脂扩散法从芦潮港海泥中筛选对副溶血性弧菌具有较强抑制作用的菌株,对其进行形态观察和16S rDNA分子鉴定,并对其所产抑菌物质进行抑菌谱和理化特性研究。结果表明,筛选出的枯草芽胞杆菌H5对副溶血性弧菌ATCC 17802具有强烈的抑制作用,抑菌圈直径达(32.05±0.10)mm,其产生的抑菌物质具有广谱抑菌活性,对革兰氏阳性菌的抑制作用大于革兰氏阴性菌。通过理化性质研究发现,H5所产抑菌物质在121°C处理30 min和较宽的pH值范围内(2~12)可保持良好的稳定性,并具有良好的紫外线稳定性和有机溶剂稳定性,且Mn^(2+)和Zn^(2+)可提高其抑菌活性而Ca^(2+)和Mg^(2+)可抑制其活性。H5所产抑菌物质经过蛋白酶处理后活性下降,证明其是一种抗菌肽。综上所述,枯草芽胞杆菌H5所产抗菌肽不仅具有良好的稳定性,而且抑菌谱广、抑菌活性强,在食品工业和医药行业具有广阔的开发和应用前景。

摘要： 以致急性肝胰腺坏死病的副溶血性弧菌(VP_(AHPND)急性肝胰腺坏死病)为靶标菌,用LB、2216E和高氏一号三种培养基分离细菌,通过滤纸片法自江苏沿海海域沉积物及海洋生物分离的152株细菌中筛选出一株对VP_(AHPND)具有显著抑制作用的拮抗菌H36。通过菌体形态观察、生理生化特征及16S rDNA和gyrB序列分析,发现菌株H36与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)聚为一支,且形态特征、培养特征和生理生化特征也与枯草芽孢杆菌相符。H36对5株不同来源的VP_(AHPND)的抑菌圈直径达13.25~24.15 mm,具有良好的拮抗效果,并初步判断其活性物质为胞外产物,包含蛋白类物质。结果表明,该菌株具有开发成为副溶血性弧菌(VP_(AHPND))生物防治菌株的潜在价值。

摘要： 目的：研究不同浓度酸性电解水对副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌单增李斯特菌的杀菌作用,比较酸性电解水对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的杀菌效果. 方法：采用传统的平板计数法进行细菌计数,扫描电镜观察细菌细胞的形态变化,琼脂糖胶电泳检测细菌DNA变化和BSA法进行细菌蛋白质泄露测定. 结果：酸性电解水对副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌均具有很强的杀灭效果,其杀菌效果随着电解水浓度的增加而增强.较高浓度的电解水处理后,副溶血性弧菌几乎全部杀灭,单核细胞增生李斯特氏菌菌落总数降低了1.45log CFU/mL.扫描电镜实验表明,经酸性电解水处理的副溶血性弧菌坍塌明显,且随着酸性电解水浓度的升高,细胞形态崩解严重,细菌形状模糊. 结论：相较于单核细胞增生李斯特氏菌,酸性电解水对革兰氏阴性菌副溶血性弧菌有明显的杀菌效果.

摘要： 目的：分析引起本次食物中毒的副溶血性弧菌的特征.方法：采集患者肛拭、剩余食物和水样进行致病菌检测,对分离的可疑致病菌进行鉴定、PCR毒力基因检测和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型.结果：从27份样品中分离出16株副溶血性弧菌;经PFGE分子分型,16株菌共产生11种带型;12株菌携带TDH基因,所有菌株均不带有TRH基因.结论：此次食物中毒是由多种副溶血性弧菌混合感染所引起.

摘要： 副溶血弧菌(Vibrio Parahaemolyticus,Vp),革兰氏阴性嗜盐杆菌,是一种引起食源性疾病的重要病原,可导致患者出现腹泻、肠痉挛、恶心、呕吐、发烧等典型胃肠炎反应,是中国主要的食源性致病菌.随着测序技术的快速发展,本文综述了高通量测序技术在副溶血性弧菌致病机理中的应用,包括了此菌的全基因组和转录组测序的研究成果和展望,旨在为研究者们提供副溶血性弧菌的高通量测序研究提供参考依据.

摘要： 目的：了解成都市副溶血性弧菌食物中毒疫情分离菌株和生鲜冻水产品分离菌株血清型分布、耐药性及毒力基因携带状况,为成都市副溶血弧菌疾病防治提供科学依据.rn 方法：对检出的副溶血性弧菌采用血清凝结实验血清分型;采用E-test药敏试验进行耐药性检测;用荧光PCR检测菌株的tdh、trh、tlh毒力基因.rn 结果：91株菌分属于8个群26个血清型,主要为O1群,其次是O4群和O2群;疫情患者肛拭分离株O4、O1群为主;鲜冻海产品分离株O1群为主;生鲜淡水产品分离株O2群为主.91株副溶血性弧菌均检出tlh,检出tdh基因均为食物中毒患者肛拭菌株,仅有1株食物中毒患者肛拭菌株检出trh基因.E-test实验结果显示,除青霉素和氨苄西林外的其他12种试验抗生素均敏感.rn 结论：成都市引起食物中毒疫情的副溶血性弧菌主要为携带tdh基因的O4、O1群菌株.

摘要： 目的：了解郑州市水产品市场副溶血性弧菌的污染情况。方法：收集副溶血性弧菌可疑阳性病料30份，共分离出30株疑似菌株，对所分离的疑似菌株进行了形态学观察、生化鉴定、耐盐性试验，并对其中5株在分子水平上进行了16S rRNA序列分析。结果：所分离30株疑似菌株均判为副溶血性弧菌，所选5株副溶血性弧菌有很高的同源性。结论：推断可能由同种菌株进化而来。

摘要： 首先依据RIMD2210633株的全基因组序列，研制了全基因组DNA芯片。并基于DNA芯片，建立了比较基因组和比较转录组技术平台，建立了一套系统的芯片数据分析方法。然后针对174株副溶血性弧菌代表菌株，比较了基因组的差异，初步探明了大流行菌群的进化史，并进行了DNA测序分析。再然后对基于差异分布的大片段基因簇(LUPC)、可变数目串联重复序列(VNTR)的副溶血性弧菌基因分型进行了介绍了，并研究了基于LVPC与VN下R的二级基因分型法。最后对副溶血性弧菌的全基因测序与微进化进行了分析。

摘要： 采用K-B法检测18株副溶血性弧菌分离株30种常用抗生素的药敏性，结果表明，副溶血性弧菌对青霉素类、1代头孢类、林可霉素几乎全耐药，对氨基糖苷类、多肽类、磺胺类、呋喃类、大环内酯类表现出不同程度的耐受，对3代头孢类、喹诺酮类、四环素类、氯霉素则基本表现为敏感，且所有菌株存在多重耐药。碱裂解法抽提质粒，18株菌株含有1-3个质粒。采用高温(43°C)高浓度(0.025-0.4%)SDS双重处理交替培养法进行质粒消除试验，有4株消除了质粒，质粒消除后W25对青霉素G、羧苄西林、哌拉西林、头孢氨苄和头孢噻吩的敏感性增加，其余菌株耐药表型无变化，表明分离的副溶血性弧菌的耐药基因大多不在质粒上。

摘要： 为建立快速准确的副溶血性弧菌的检测体系。本文根据滚环扩增方法的原理设计引物、锁式探针以及反应体系。试验证明了RCA检测体系具有很好的特异性、灵敏度和稳定性，适用于副溶血性弧菌的检测和鉴定。

摘要： 副溶血性弧菌、溶藻弧菌、创伤弧菌均是食源性致病菌,灵敏、快速的检测方法对水产品安全以及保护人类健康极为重要.本文主要综述了水产品中副溶血性弧菌、溶藻弧菌、创伤弧菌的分子生物学检测研究进展.rn 研究表明，对于副溶血性弧菌，荧光定量PCR技术检测的灵敏度可达102CFU/mL;多重PCR技术检测的灵敏度可达2.32×103CFU/mL;但常规PCR技术有的比较高，有的比较低，如李志锋等检测的灵敏度为2.4×l02CFU/mL，而黄晨阳等检测的灵敏度达到了1.161×102CFU/mL。对于溶藻弧菌，目前的研究还是比较少的，韩一凡等利用常规PCR技术检测的灵敏度为3.7×103CFU/mL;刘阳等利用多重PCR技术检测的灵敏度为2.56×103CFU/mL;王海波等主要是利用荧光定量PCR技术优化反应体系，发现其检测下限比常规PCR高出100倍。对于创伤弧菌，石琰璟等利用常规PCR技术检测的灵敏度达3.6×102CFU/mL;潘军航等利用荧光定量PCR技术检测的灵敏度达1.4CFU/mL。rn 通过上述研究，也可发现荧光定量PCR技术的灵敏度比较高，但是它的成本比较高，对于基层单位使用负担比较大，与其它两种技术相比其省去了凝胶电泳的繁琐操作，避免了实验过程中污染，既减少了假阳性的发生率，又缩短了检测时间，近年来己被广泛应用于临床、食品等样品中致病菌的检测；而常规PCR技术虽然成本低，但是它不能定量，灵敏性相对较低；多重PCR技术的体系比较复杂，需要花费更多的时间去摸索稳定的体系，以及要避免引物之间形成二聚体，干扰实验结果，但它消耗的时间和试剂比较少，而且还可减少或避免因操作步骤过多而污染所带来的假阳性等问题。

摘要： 为建立多重PCR方法用于同时快速检测海产品中的副溶血弧菌和溶藻弧菌，本研究根据副溶血弧菌(VP)和溶藻弧菌(VA)的toxR基因序列应用Primer Premier6.0设计了针对这2种细菌的2对特异性引物，建立了能快速同时检测这两种细菌的多重PCR方法，并对该反应体系的特异性和灵敏度进行分析。结果显示纯培养细菌的检测灵敏度分别为VP 2.32×103 cfu/mL和VA 2.56×103cfu/mL，临床病料检测灵敏度分别可达VP 2cfu/mL和VA3cfu/mL；与枸橼酸杆菌、沙门氏菌、美人鱼弧菌、霍乱弧菌、麦氏弧菌没有交叉反应。研究表明本实验方法操作简便快速、特异性强、灵敏度高、稳定性好，并且经济实惠每个PCR反应成本不到1元，值得推广应用。

摘要： 本发明公开了一种副溶血性弧菌基因缺失弱毒株以及以此为基础的疫苗。本发明所述的副溶血性弧菌基因缺失弱毒株为不含有tdhA、vcrD1和vcrD2基因且外膜上高效表达lptD蛋白的菌株。本发明所述的疫苗为含有副溶血性弧菌基因缺失弱毒株和药学上可以接受的稀释液，所述的疫苗的含量为每头份含菌株浓度为108CFU，所述的稀释液为过0.22μm滤膜的PBS缓冲液或过0.22μm滤膜的生理盐水。本发明构建的副溶血性弧菌基因缺失弱毒株的安全性实验表明，该菌株的毒力显著降低，对实验动物无毒性；而该菌株的免疫保护性分析表明其具有高效的免疫保护作用，可以100％保护实验动物免于死亡。

摘要： 本发明提供了海巴戟提取物作为副溶血性弧菌抑制剂的应用、副溶血性弧菌抑制剂及其制备方法。本发明提供的副溶血性弧菌抑制剂的制备方法，包括以下步骤：a)将海巴戟与水混合煮沸后，固液分离，得到分离液；b)将所述分离液浓缩，得到副溶血性弧菌抑制剂。本发明先将海巴戟与水混合煮沸提取，再浓缩得到提取液，能够作为副溶血性弧菌抑制剂，有效抑制副溶血性弧菌；而且本发明的制备方法简单易行，且水提即可，无需使用有机溶剂，大大降低了成本。

摘要： 本发明公开了一种副溶血性弧菌噬菌体VppYZU84及其在检测副溶血性弧菌大流行株活细胞含量中的应用，所述副溶血性弧菌噬菌体VppYZU84保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为：CCTCC M 2020242，保藏日期为2020年06月28日。相比传统平板计数和qPCR定量检测技术，本发明利用噬菌体VppYZU84检测副溶血性弧菌大流行株活细胞含量的方法具有选择性，对死亡细胞和其他菌株无交叉反应，本发明方法操作简便快速，适合于食品或环境样本中副溶血性弧菌大流行株存活细胞的快速定量检测。

摘要： 本发明提供了一种副溶血性弧菌的核酸适配体及其应用以及检测副溶血性弧菌的试剂盒和方法，涉及生物传感器的技术领域。本发明提供的核酸适配体，能够特异性的识别副溶血性弧菌，能够用于副溶血性弧菌的检测；本发明提供的试剂盒，具有很高的灵敏度与特异性，操作简单，检测快速，结果肉眼可见，适合所有实验室进行推广，无需专业培训即可实现对副溶血性弧菌的实时现场分析。

摘要： 本发明提供了海巴戟提取物作为副溶血性弧菌抑制剂的应用、副溶血性弧菌抑制剂及其制备方法。本发明提供的副溶血性弧菌抑制剂的制备方法，包括以下步骤：a)将海巴戟与水混合煮沸后，固液分离，得到分离液；b)将所述分离液浓缩，得到副溶血性弧菌抑制剂。本发明先将海巴戟与水混合煮沸提取，再浓缩得到提取液，能够作为副溶血性弧菌抑制剂，有效抑制副溶血性弧菌；而且本发明的制备方法简单易行，且水提即可，无需使用有机溶剂，大大降低了成本。

摘要： 本发明公开了一种副溶血性弧菌基因缺失弱毒株以及以此为基础的疫苗。本发明所述的副溶血性弧菌基因缺失弱毒株为不含有tdhA、vcrD1和vcrD2基因且外膜上高效表达lptD蛋白的菌株。本发明所述的疫苗为含有副溶血性弧菌基因缺失弱毒株和药学上可以接受的稀释液，所述的疫苗的含量为每头份含菌株浓度为108CFU，所述的稀释液为过0.22μm滤膜的PBS缓冲液或过0.22μm滤膜的生理盐水。本发明构建的副溶血性弧菌基因缺失弱毒株的安全性实验表明，该菌株的毒力显著降低，对实验动物无毒性；而该菌株的免疫保护性分析表明其具有高效的免疫保护作用，可以100％保护实验动物免于死亡。

摘要： 本发明公开了一种副溶血性弧菌噬菌体VppYZU84及其在检测副溶血性弧菌大流行株活细胞含量中的应用，所述副溶血性弧菌噬菌体VppYZU84保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为：CCTCC M 2020242，保藏日期为2020年06月28日。相比传统平板计数和qPCR定量检测技术，本发明利用噬菌体VppYZU84检测副溶血性弧菌大流行株活细胞含量的方法具有选择性，对死亡细胞和其他菌株无交叉反应，本发明方法操作简便快速，适合于食品或环境样本中副溶血性弧菌大流行株存活细胞的快速定量检测。

摘要： 本发明提供了一种副溶血性弧菌的核酸适配体及其应用以及检测副溶血性弧菌的试剂盒和方法，涉及生物传感器的技术领域。本发明提供的核酸适配体，能够特异性的识别副溶血性弧菌，能够用于副溶血性弧菌的检测；本发明提供的试剂盒，具有很高的灵敏度与特异性，操作简单，检测快速，结果肉眼可见，适合所有实验室进行推广，无需专业培训即可实现对副溶血性弧菌的实时现场分析。

摘要： 本发明提供一种可快速特异检测溶藻弧菌(VA)、副溶血性弧菌(VP)及创伤弧菌(VV)的多重降落PCR检测及方法。它包括：10×PCR缓冲液，MgCl

摘要： 本发明属于生物检测技术领域，涉及一种同步检测食品中霍乱弧菌和副溶血性弧菌的GeXP分析方法，其中检测所用的引物包括1对霍乱弧菌特异性引物、1对副溶血性弧菌特异性引物和1对通用引物。本发明通过对待检样品增菌培养后，提取核酸，应用异性引物对及荧光标记引物进行PCR扩增，将扩增产物用遗传分析系统检测，并与标准分子量相对照，根据检测图谱来判断检测样品中是否存在霍乱弧菌和副溶血性弧菌污染。经验证，本发明的检测体系具有特异性高、稳定性好和检验周期短等特点。