LY294002

摘要： 目的:探究LY294002调控Janus激酶(JAK)/信号传导及转录激活因子3(STAT3)通路对肝癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:培养人肝癌SMMC-7721细胞至对数生长期后,分为对照组、LY294002处理组(加入10、20、30μmol/L)、白介素6处理组(IL-6组)、IL-6+LY294002处理组(IL-6+30μmol/L LY294002),干预培养48 h后,通过四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测各组细胞活性,克隆形成实验检测各组细胞克隆形成能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中Janus激酶2/信号传导及转录激活因子3(JAK2/STAT3)通路相关蛋白JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)及凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果:与对照组相比,IL-6组细胞增殖抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达显著降低(P<0.05),细胞克隆形成率、Bcl-2、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3蛋白表达显著升高(P<0.05);与IL-6组相比,10、20、30μmol/L LY294002组、IL-6+30μmol/L LY294002组细胞增殖抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达显著升高(P<0.05),细胞克隆形成率、Bcl-2、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3蛋白表达显著降低(P<0.05);与10μmol/L、20μmol/L LY294002组相比,30μmol/L LY294002组细胞增殖抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达显著升高(P<0.05),细胞克隆形成率、Bcl-2、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3蛋白表达显著降低(P<0.05),IL-6+30μmol/L LY294002组细胞增殖抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达显著降低(P<0.05),细胞克隆形成率、Bcl-2、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:LY294002可能通过调控JAK/STAT3通路抑制STAT3激活,从而抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖,促进其凋亡。

摘要： 目的分析磷脂酰肌醇激酶3抑制剂2-(4-吗啉基)-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4酮(LY294002)联合利妥昔单抗注射液对白血病T细胞的作用机制。方法Jurtak细胞人外周血白血病T细胞按照排板顺序分为对照组、LY294002组、利妥昔单抗组、联合用药组。对照组不加药物,LY294002组加40μmol/L LY294002,利妥昔单抗组加375 mg/mm^(2)利妥昔单抗注射液,联合用药组加40μmol/L LY294002和375 mg/mm^(2)利妥昔单抗注射液。作用48 h后,用MTT比色测定3个干预组和对照组中Jurkat细胞的抑制情况,流式细胞仪测定Jurkat细胞的生长周期情况,Transwell和划痕实验检测Jurkat细胞侵袭能力和转移能力,RT-q PCR法测定PI3k、Akt mRNA的表达,使用蛋白质印迹法测定Caspase-3、Bcl-2蛋白和P-gp表达。结果分别干预24、48 h后,与对照组相比,3个干预组增殖率和被侵袭细胞数均显著减少,联合用药组也显著低于LY294002组和利妥昔单抗注射液组,差异均有统计学意义(P0.05)。与干预24 h相比,干预48 h后,LY294002组、利妥昔单抗注射液组和联合用药组增殖率和被侵袭细胞数均显著减少,差异均有统计学意义(P0.05)。结论相比单独用药,LY294002联合利妥昔单抗注射液用药对诱导Jurkat细胞凋亡,抑制P13K Akt信号转导通路的活性,抑制细胞的侵袭、增殖,有明显的促进作用。

摘要： 目的研究羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)与磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PKB或Akt)信号通路的抑制剂(LY294002)联合用药对人肝癌细胞HepG2裸鼠移植瘤的增殖、凋亡及血管生成的影响。方法体外培养肝癌细胞HepG2并建立裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组(Control组)、HSYA组、LY294002组及联合用药组(HSYA+LY294002组)。记录裸鼠的瘤重及移植瘤体积,HE染色观察移植瘤组织形态,免疫组织化学染色检测瘤组织Ki-67、Cleaved Caspase-3、VEGF、p-Akt的表达。结果与对照组比较,HSYA组肿瘤细胞异形性减少并出现点状坏死灶;LY294002组出现核固缩、核碎裂及明显坏死区;HSYA+LY294002组肿瘤组织内出现大片坏死区;HSYA+LY294002组瘤重和体积抑制率均高于HSYA组、LY294002组;HSYA组和LY294002组的Ki-67、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、p-Akt表达均下降,Cleaved Caspase-3表达均增高;但HSYA+LY294002组Ki-67、VEGF、p-Akt蛋白表达下降、Cleaved Caspase-3表达增高更显著。结论HSYA可能通过增强LY294002抑制PI3K/AKT信号通路的作用,抑制人肝癌细胞的增长和血管生成。

摘要： 本刊2022年31卷第2期146页-151页《羟基红花黄色素A增强LY294002对人肝癌裸鼠移植瘤生长和血管生成的抑制》一文,作者为:宋浩然,林续涛,王东,王占青,吴娜,白咸勇,李京敏等,其中第二作者“林续涛”,应为“林绪涛”。

摘要： 目的探究苦参碱(Mat)联合LY294002对人髓系白血病K562细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响及可能机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度Mat单药和联合LY294002对K562细胞增殖的影响;将K562细胞分为对照组、Mat组、LY294002组和Mat+LY294002组,分别采用0.4 g/L Mat及10μmol/L LY294002单独或联合干预48 h后,应用光学显微镜观察细胞形态变化,流式细胞术annexinⅤ-FITC/PI双标记检测细胞凋亡,PI单标记检测细胞周期变化,Western blot法检测Mat联合LY294002对K562细胞p-mTOR、p-PI3K、Akt、p-Akt、CyclinD1、Bcl-2、Caspase-9蛋白表达的影响。结果CCK-8结果显示,不同浓度Mat单药和联合LY294002均可抑制K562细胞的增殖,具有时间和浓度依赖性,且联合组增殖抑制率比单药组明显升高(P<0.01)。形态学检查显示,联合用药组比单药组凋亡表现更明显。流式细胞结果显示,与对照组及单药组相比,联合组显著促进细胞凋亡[(42.50±2.63)%,P<0.01],显著增加了细胞周期G0/G1期细胞比率[(57.23±1.44)%,P<0.01]。Western blot结果表明,两药联合后K562细胞p-mTOR、CyclinD1、p-PI3K、p-Akt、Bcl-2蛋白表达水平明显增高(P<0.01),Caspase-9蛋白表达水平下降(P<0.01)。结论Mat和LY294002联合应用可以增强对K562细胞生长抑制的协同作用,其机制可能是通过有效下调PI3K/Akt信号通路中的p-Akt表达,使p-mTOR、CyclinD1和Bcl-2蛋白表达下调,Caspase-9蛋白表达上调来实现的。

摘要： 目的:探讨Ghrelin联合LY294002对脂肪间充质干细胞(ADSCs)神经分化的影响,并阐明其作用机制。方法:倒置相差显微镜下观察ADSCs形态表现,流式细胞术鉴定ADSCs表面抗体阳性表达率,将第4代ADSCs分为对照组(不进行干预)、LY294002组[给予40μmol·L^(-1)磷酸酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路特异抑制剂LY294002]、Ghrelin组(给予0.1μmol·L^(-1) Ghrelin)、Ghrelin+LY294002组(给予40μmol·L^(-1) LY294002+0.1μmol·L^(-1) Ghrelin)。倒置相差显微镜下观察各组ADSCs神经分化后的形态表现,免疫荧光染色法检测各组ADSCs中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白(Nestin)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞百分率,Western blotting法检测各组ADSCs中PI3K/Akt通路蛋白表达水平,并计算磷酸化PI3K(p-PI3K)/PI3K和磷酸化Akt(p-Akt)/Akt比值。结果:ADSCs表面抗体CD90和CD13高表达,CD34、CD45和CD106低表达。与对照组比较,LY294002组仅部分细胞由长梭形转变为类圆形胞体,突起较短、数量减少,而Ghrelin组细胞由长梭形转变为类圆形胞体速度增快;与LY294002组比较,Ghrelin+LY294002组细胞由长梭形转变为类圆形胞体速度增快,且突起数量增加。与对照组比较,LY294002组ADSCs中NSE和Nestin阳性细胞百分率及p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值明显降低(P0.05)。结论:Ghrelin通过激活PI3K/Akt通路促进ADSCs神经分化。

摘要： 目的:探讨小剂量多虑平(Doxepin)对大鼠应激性胃黏膜损伤(stress gastric mucosal damage,SGMD)的治疗作用,并就其可能机制初步研究.方法:采用浸水加束缚的方法制备大鼠应激性胃黏膜损伤模型.健康雄性SD大鼠50只,随机分为5组:假手术组(Sham组)、应激性胃黏膜损伤组(SGMD组)、溶剂对照组(Vehicle组)、多虑平预处理组(Doxepin组)、多虑平联合PI3K特异抑制剂LY294002组(Doxepin+LY组).记录各组大鼠胃黏膜损伤指数.测算大鼠胃黏膜组织中丙二醛(malonalldehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)活性.Western blot法检测胃黏膜组织淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax),磷酸化Akt1 (phosphorylated Akt1,p-Akt1)以及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)蛋白的表达.结果:成功制备大鼠应激性胃黏膜损伤SGMD模型.与大鼠应激性胃黏膜损伤组相比,多虑平组大鼠胃黏膜损伤指数降低,胃黏膜组织MDA含量降低,SOD活性增强,p-Akt1的蛋白表达水平增强,且Bcl-2蛋白表达增强,Bax蛋白表达减弱(P＜0.05).而LY294002可削弱多虑平的以上作用(P＜0.05).结论:小剂量多虑平对大鼠应激性胃黏膜损伤具有保护作用,这种保护作用可能与其上调PI3K/Akt信号通路活性,上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达活性作用密切相关.

摘要： 目的 探讨LY294002联合顺铂对卵巢癌细胞A2780和SKOV3的影响及机制研究.方法 将A2780和SKOV3细胞分为正常对照组、LY294002组、顺铂组和LY294002+顺铂组,采用CCK-8法检测不同浓度的LY294002(10、20、40、60)μmol/L和顺铂(5、15、25、40)μmol/L处理后各组细胞的增殖能力并计算两种药物对于两种细胞的IC50值,采用划痕实验观察细胞的增殖能力;采用Western Blot检测基质金属蛋白酶2(Matrix metalloproteinase2,MMP2)、MMP9以及蛋白激酶B(Pro-tein kinase B,Akt/PKB)蛋白表达情况.结果 使用LY294002和顺铂均能明显抑制A2780、SKOV3细胞的增殖,并且呈剂量依赖性;LY294002联合顺铂能够明显抑制卵巢癌细胞的迁移力(P<0.01),其抑制率优于单独使用LY294002或顺铂;MMP2、MMP9和AKT蛋白表达水平在正常对照组、LY294002组、顺铂组及LY294002+顺铂组呈逐渐降低趋势,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 LY294002和顺铂单独用药均可抑制卵巢癌细胞A2780和SKOV3增殖和侵袭,联合用药抑制增殖和侵袭的作用更加明显.

摘要： 目的 探讨miR-92b与信号通路PI3K/Akt在糖尿病肾病中的相关性.方法 选取8周龄的C57BL/6雄性小鼠12只,随机分为正常对照组和糖尿病肾病组,利用枸橼酸钠建立糖尿病肾病小鼠模型;选取人肾小管上皮HK-2细胞12瓶,随机分为高糖组、低糖组和左旋葡萄糖组,用高糖刺激建立糖尿病肾病细胞模型.利用实时荧光定量PCR检测小鼠肾脏组织和细胞中miR-92b表达水平,Western blot检测小鼠肾脏组织和细胞中Akt和P-Akt的表达水平.结果 糖尿病肾病组和高糖组miR-92b表达水平明显低于对照组(P＜0.05),而P-Akt/Akt表达水平明显高于对照组(P＜0.05).将信号通路PI3K/Akt抑制剂LY294002加入到高糖诱导的糖尿病肾病细胞模型中,信号通路PI3K/Akt被抑制的同时,miR-92b表达显著升高(P＜0.05).结论 糖尿病肾病时,miR-92b与PI3K/Akt的表达呈负相关.

摘要： 目的:探讨大蒜素诱导人子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的作用机制.方法:分别以二甲基亚砜(空白对照组)、大蒜素(12.5、25、50μg/mL)和LY2940025μg/mL干预对数生长期Ishikawa细胞.48 h后,用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术分析细胞凋亡状况,Western Blotting法检测p-PI3K、p-AKT、Cleaved Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达.结果:与空白对照组比较,经大蒜素12.5、25、50μg/mL或LY2940025μg/mL干预能够提高Ishikawa细胞增殖抑制率和凋亡率;经大蒜素25、50μg/mL或LY2940025μg/mL干预能够下调p-PI3K、p-AKT、Bcl-2表达并上调Cleaved Caspase-3、Bax表达,提高Bax/Bcl-2比值,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).与LY294002组比较,经大蒜素50μg/mL干预能够提高Ishikawa细胞增殖抑制率和凋亡率,下调p-PI3K、p-AKT表达并上调Cleaved Caspase-3、Bax表达,提高Bax/Bcl-2比值,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论:大蒜素能够诱导人子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡,可能与抑制PI3K/AKT信号通路活化而使其下游促凋亡蛋白表达上调有关.

摘要： 本发明公开了N‑(3S‑6,7‑二羟基‑1,1‑二甲基‑1,2,3,4‑四氢异喹啉‑3‑甲酰)‑Lys(Ala‑Lys),公开了它的制备方法，公开了它的抗血栓活性，公开了它的溶血栓活性，公开了它治疗脑缺血大鼠的作用，因而本发明公开了它在制备抗血栓药物,溶血栓药物和治疗缺血性中风药物中的应用。

摘要： 本发明公开了通式I的4种伪肽，式中R1为H或CH3、R2为Lys或Lys(Pro-Ala-Lys)。本发明进一步公开了它们的制备方法和用途。本发明的伪肽具有优秀的溶血栓活性、抗血栓活性、抗炎活性、OH自由基清除活性以及纳米结构。

摘要： 本发明提供了溶血栓寡肽及其制备方法和应用。本发明提供了结构式为通式I所示的具有溶血栓活性的寡肽，式中n＝6、8、10、12、14或16。溶血栓活性实验表明，本发明通式I所示的寡肽具有优秀的溶血栓活性，能作为溶血栓药物应用。

摘要： 本发明公开了具有溶血栓活性的寡肽及其合成方法和用途。本发明提供了结构式为通式I所示的具有溶血栓活性的寡肽，式中n＝6、8、10、12、14或16。体外和体内溶血栓活性试验表明，本发明通式I所示的寡肽化合物具有优秀的溶血栓活性，可作为溶血栓药物应用。

摘要： 本发明公开下式的N‑[3S‑6,7‑二羟基‑1,1‑二甲基‑1,2,3,4‑四氢异喹啉‑3‑甲酰]‑Lys(Lys),公开了它的制备方法，公开了它的抗血栓活性，公开了它的溶血栓活性，公开了它治疗脑缺血大鼠的作用，因而本发明公开了它在制备抗血栓药物,溶血栓药物和治疗缺血性中风药物中的应用。

摘要： 本发明公开了N‑(3S‑6,7‑二羟基‑1,1‑二甲基‑1,2,3,4‑四氢异喹啉‑3‑甲酰)‑Lys(Ala‑Lys),公开了它的制备方法，公开了它的抗血栓活性，公开了它的溶血栓活性，公开了它治疗脑缺血大鼠的作用，因而本发明公开了它在制备抗血栓药物,溶血栓药物和治疗缺血性中风药物中的应用。

摘要： 本发明公开了通式I的4种伪肽，式中R1为H或CH3、R2为Lys或Lys(Pro-Ala-Lys)。本发明进一步公开了它们的制备方法和用途。本发明的伪肽具有优秀的溶血栓活性、抗血栓活性、抗炎活性、OH自由基清除活性以及纳米结构。

摘要： 本发明公开了具有溶血栓活性的寡肽及其合成方法和用途。本发明提供了结构式为通式I所示的具有溶血栓活性的寡肽，式中n＝6、8、10、12、14或16。体外和体内溶血栓活性试验表明，本发明通式I所示的寡肽化合物具有优秀的溶血栓活性，可作为溶血栓药物应用。

摘要： 本发明提供了溶血栓寡肽及其制备方法和应用。本发明提供了结构式为通式I所示的具有溶血栓活性的寡肽，式中n＝6、8、10、12、14或16。溶血栓活性实验表明，本发明通式I所示的寡肽具有优秀的溶血栓活性，能作为溶血栓药物应用。

摘要： 本发明公开了下式结构的D(+)‑β‑(3,4‑二羟基苯基)‑乳酰‑Pro‑Ala‑Lys,公开了它的制备方法,进一步公开了它的抗栓活性,溶栓活性以及治疗缺血性中风作用。因而本发明公开了它在制备抗栓剂,溶栓剂以及治疗缺血性中风药物中的应用。