分子生物学技术

摘要： 食品安全事关人们的生命健康,受到人们的广泛关注,食品检验是保证人们饮食安全的重要环节。近年来,现代分子生物学技术发展迅速,因其快速、灵敏、高效等特点,在食品检验方面的应用广泛。本文主要对分子生物学技术在食品检验领域中的应用进行探讨,以期为食品检验技术的发展提供依据。

摘要： 分子生物学技术是推动生命科学领域及其他多个相关领域学科发展的关键技术,是各个科学研究领域的必备工具。随着分子生物学的发展以及其重要性的逐渐提升,博士、硕士研究生及本科生对分子生物学技术教学的需求也日益明显且各有侧重。文章通过对研究生课程实践教学体系、教学模式、教学方法等进行教学体系构建的探索,提升实验技术课的教学效果,为培养高素质的医学院校研究生提供参考。

摘要： 【目的】瘤胫实蝇为我国进境植物检疫性有害生物。寄主范围广、危害大,形态与其同属近缘种相似,传统鉴定方法是将果蔬上的各虫态饲养至成虫后进行分类鉴定,鉴定周期较长,影响口岸进境果蔬快速通关,而采用分子鉴定不仅快速且不受虫态影响。【方法】选用瘤胫实蝇为鉴定靶标,番石榴实蝇、锈红果实蝇等19种实蝇作阴性对照,应用种特异性技术,基于mtDNA COⅠ线粒体基因序列,研究筛选并设计一对种特异性引物(SS-COⅠ)LJF400和LJR564,进行PCR扩增并将PCR产物进行电泳检测。【结果】种特异性引物仅对靶标种瘤胫实蝇的COⅠ基因有扩增能力,能扩增出一条单一的长度约165 bp清晰的条带,而对其余阴性对照种均不具有扩增效果,未出现任何条带。【结论】设计的种特异性引物具高特异性,能够快速准确鉴定瘤胫实蝇,适用于各种虫态,对瘤胫实蝇的检疫鉴定和进境果蔬的快速通关具有重要意义。

摘要： 分子生物学技术是当今几乎所有医学领域科学研究和临床应用的基础,医学领域的研究生均需要学习和掌握基本的分子生物学基础理论和操作技能,以利于科研课题的顺利开展和专业知识的深入理解。但因选课的研究生中既有刚刚本科毕业的硕士研究生,也有具有一定研究基础的博士研究生,其基础理论、操作技能和课题所需要学习和掌握的分子生物学方法各不相同。如何在有限的教学课时内让不同基础及不同需求的研一阶段的博士及硕士研究生学习和掌握分子生物学技术和方法,从而在有限的课时内最大限度的提高教学质量和学生学习效率,值得带教老师探索和研究。我们根据研一阶段研究生的分子生物学基础和个性化需求,进行课程理论和实验课程的个性化设置,全面增加了授课内容和授课方式的实践性、导向性和前沿性。经过4年的教学实践,极大增强了学生在分子生物学技术领域的理论认知和实践能力,同时提高了本课程的教学质量,取得了较好的学习效果,值得在分子生物学教学中推广。

摘要： 根据国家食品安全检测标准,食品内不得含有危害人体健康的物质与元素,必须做好食品内微生物的有效检测,从根本上保证食品安全。传统食品微生物检测步骤繁琐且工作效率低下,必须积极应用分子生物学技术,进一步提高食品微生物检测的质量与效果。食品微生物检测的重要性近年来,我国社会经济与科学技术发展迅速,市场竞争日益激烈。受各种因素的影响,食品安全问题时有发生,对食品安全检测和质量控制提出了更高的要求与标准。现阶段,在我国食品安全检测工作中,微生物检测属于食品检测的关键内容。食品微生物检测可以精准地检测出食品内各类微生物的类别和含量等,衡量食品内各类微生物的指标能否达到国家食品安全标准。此外,社会大众对食品安全重视程度的不断加深,也进一步促进了食品检测技术的发展与完善。

摘要： 抗生素过度使用加速了细菌耐药性的发生发展。当前,细菌耐药性已成为威胁全球公共卫生健康的重要因素之一。细菌耐药性检测技术包括以经典方法为主的肉汤稀释法、琼脂稀释法、纸片扩散法和浓度梯度法等。随后出现了一系列物理、化学方法和分子生物学检测技术,包括微流控图像检测、飞行时间质谱等。随着高通量测序技术的发展,各类细菌耐药基因数据库的开发和完善,全基因组测序、宏基因组测序和微生物单细胞转录组测序等新技术已逐步应用于细菌耐药性检测领域。该文将细菌耐药性检测方法分为传统经典方法、分子生物学技术和高通量测序技术三大类,阐述各类技术方法的原理、优点和局限性。回顾和反思当前细菌耐药性检测的技术和方法,对于规范抗生素的使用至关重要,也为临床超级耐药菌的预防和监测提供新的技术支持。

摘要： 目的:研究评价分子生物学技术在检测结核分歧杆菌当中的应用效果与价值。方法:按照研究排除纳入标注选取我院在2020年6月至2021年6月内收治的疑似肺结核患者共220例,患者同时接受痰涂片与PCR结核分歧杆菌DNA检查,将检查结果分为对照组(n=220,痰涂片检查)与研究组(n=220,PCR检查),对比同一组患者在两种不同检查方法下的检查阳性率。结果:不同方法检查下,对照组数据结果为174例阳性(79.09%),研究组数据结果为199例(90.45%),两组数据差异有统计学意义(P<0.05)。同时对比细菌培养结果确定213例(96.82%)为结核分歧杆菌携带患者,研究组检查方法准确率显著高于对照组检查方法(P<0.05)。结论:在结核分歧杆菌的检查中,相较于常规痰涂片检查方法,应用PCR分子生物学检查技术能够进一步提高结核病菌的检出率,该方法的应用在临床结核病患者的诊断中起到重要作用,对于各地区的结核疾病控制有着重要意义,值得临床推广使用。

摘要： 马立克病(MD)是由马立克病病毒(MDV)早期感染雏鸡引起的一种重要的家禽免疫抑制病与肿瘤病。MDV以水平传播为主,具有高度接触性和传染性、高致病率以及高致死率等特征,给全球养禽业造成巨大经济损失。该病主要依赖MD疫苗免疫预防,近50年来在MD疫苗广泛使用和持续免疫压力下,MDV毒力不断增强,部分毒株已突破现有商品疫苗的免疫保护。尽早对MD疑似病例进行快速准确的鉴别诊断,可为生产企业和养殖户及时采取措施、减少和挽回部分经济损失提供重要依据。经典的诊断方法已难以满足当下对MD病例快速诊断的需要。本文重点对近十年中新建立的分子生物学技术,如聚合酶链式反应(PCR)、实时荧光定量PCR(qPCR)、环介导等温扩增(LAMP)、重组酶聚合酶扩增(RPA)、多重PCR及液相芯片等在MDV检测和MD诊断中的研究及应用进行了综述,以期为今后研究建立用于MD流行病学调查、临床病例早期诊断和流行毒株分型鉴定的鉴别诊断技术提供参考。

摘要： 微生物分子生态学是分子生物学与微生物生态学交叉而形成的学科,对于认识微生物生态系统组成结构、功能、微生物之间以及微生物与环境之间的相互关系具有重要意义。本文以微生物分子生态学研究方法作为切入点,对目前广泛使用的微生物分子生态学研究技术和方法进行综合介绍、分析和总结,对各种方法的优缺点和应用进行评论,以期为认识和调控生态系统的微生物群落提供参考。

摘要： 伴随生物学技术快速发展,我国食品检验技术也转变为分子检测等先进技术。本研究分别从微生物检测技术的特点及应用食品检验的可行性、微生物检测技术在食品检验中的应用以及新型微生物检测技术在食品检验中的应用方面进行分析,以期为提升食品微生物检测水平提供参考。

摘要： 文献综述了分子生物学技术在环境微生物多样性方面的研究,并对末端限制性片段多态性(T-RFLP),克隆文库及高通量测序技术进行重点介绍介绍,指出这三种技术在环境微生物群落结构分析中以非传统纯培养的方法进行直接分析微生物的多样具有快速、准确等优势,可较为真实地反映环境样品中微生物群落结构组成.T-RFLP技术可提供微生物的种类和相对数量的信息;克隆文库技术在环境微生物群落分析中准确度高;高通量测序技术广泛的应用于宏基因组学,可对混合样品基因组直接测序,无需构建克隆文库.

摘要： 分子生物学技术在环境污染监测与治理中的应用已经成为各国研究的热点.本文综述了基因工程技术、DNA序列计算分析、电泳分离纯化技术、核酸探针检测技术等几种分子生物学技术的原理,及其在监测环境污染物变化、治理环境污染过程中的应用.

摘要： 本文首先介绍了油气勘探技术的发展，其次介绍了DNA提取纯化技术、分子标记物等分子生物学基础，然后介绍了PCR技术、RT-PCR技术、FISH技术等常见的分子生物学技术，指出油气微生物勘探技术应朝着简单、高效、灵敏度高、成本低的方向发展，基因芯片技术最有可能实现这一目标。

摘要： 目的:分析A1B3亚型家系成员的血型血清学特点及分子机制.方法:应用常规血型血清学方法进行血型鉴定;采用PCR-SSP法进行ABO初步基因分型的检测,并对ABO基因第6和第7外显子的核苷酸序列进行扩增、测序和分析.结果:本家系中2人为A1B3亚型,血清中含有抗-B抗体;3人为B3亚型,血清中不含抗-B抗体.基因分析第7外显子上存在1054C＞T突变,导致多肽链第352位精氨酸被色氨酸替换.结论:基因点突变1054C＞T是导致B3亚型的分子遗传基础,且在家系中能够稳定遗传,采用分子生物学技术和人源抗血清可正确鉴定B3亚型.

摘要： 目前。随着分子生物学技术的发展及其在临床领域中的应用，已发现许多基因与甲状腺癌的发生，发展，转移及预后有关，基因诊断及相关治疗逐渐成为肿瘤生物学干预中的重要组成部分。并重点从BRAF基因、p53基因、ras基因、ret基因、Bcl-2基因家族、erbB2基因、p27基因、Maspin基因、p16基因、PAXB-PPARγ融合基因等相关基因对甲状腺癌的研究进展作了阐述。

摘要： 脑炎是感染性疾病中较严重的一种,病毒是急性脑炎中最常见的感染源.病毒性脑炎是指病毒直接侵犯脑实质而引起的原发性脑炎,临床表现主要为发热、头痛、意识障碍、癫痫、精神行为异常及神经系统定位体征.病毒性脑炎是中枢神经系统常见的感染性疾病，严重的颅内病毒感染可能会导致死亡，患者往往遗留永久性的神经后遗症。目前，支持对症治疗超过抗病毒治疗。因此，病毒性脑炎的病原学检测尤为重要。通过对样本的抗原、抗体及免疫复合物检测以及分子生物学技术应用，为病毒性脑炎的诊断提供病原学依据，帮助诊断和治疗病毒性脑炎患者。

摘要： 昆虫气味结合蛋白(odorant-binding protein简称,OBP)广泛存在于昆虫各种化学感受器的淋巴液中,是昆虫在长期进化过程中所形成的一类分子量较小的、酸性的、可溶性蛋白.研究表明,这类蛋白对于昆虫的觅食、栖息、交配、产卵以及聚集、警戒等各种行为起到十分重要的作用.本文对以往和近期的相关研究结果进行简要总结,对昆虫OBP的种类、OBP的分布、生化特点、生理功能进行了简单介绍,其早期的研究方法是直接从昆虫触角中分离纯化OBP，近年来：分子生物学技术以及基因工程学科的迅速发展，通过基因克隆，体外表达的方法，解决了直接分离纯化蛋白产生的难题。目前，OBP的研究在鳞翅目昆中比较广泛，但在其他种类的昆虫中则鲜有报道。而且一些表达量较低的OBP蛋白还难以被测定。然而，随着分子生物学技术、电生理技术、基因工程技术、化学分析技术等的发展，越来越多新的OBP将不断被发现，其功能也将进一步被揭示。这对于探明昆虫的嗅觉反应机理，揭示昆虫、植物和天敌三者间的化学信息联系，以及开发害虫治理的新途径都具有重大的理论和实践意义。

摘要： 蚊科Culicidae是重要的疾病传播媒介昆虫，蚊科分类研究已有近300年的发展历程，且分类系统在不断更新和完善。2000年以后,Reinert和Harbach等对现代蚊科特别是伊蚊族Aedini分类系统进行了大幅调整，更加细化了蚊科分类系统。另外，现代蚊科分类离不开分子技术手段的介入，当前研究蚊科分类中常用的分子生物学技术主要包括DNA探针技术、RAPD技术、PCR-RFLP技术、鉴别PCR技术、分子标记和DNA测序分析等技术。形态分类与分子分类技术在蚊科分类中相辅相成,充分发挥各自优势。为蚊科分类研究拓展了良好的应用前景，为更全面更系统的分类系统创建提供了技术保证。

摘要： 要推进中国酒业持续健康发展,就必须深入研究酒体风味物质的生成机理、酿酒微生物多样性特征及特殊功能微生物的选育与应用.利用现代分子生物技术和风味化学分析技术揭示中国白酒的奥秘,构建白酒核心技术体系,增强产品市场竞争力.

摘要： 要推进中国酒业持续健康发展,就必须深入研究酒体风味物质的生成机理、酿酒微生物多样性特征及特殊功能微生物的选育与应用.利用现代分子生物技术和风味化学分析技术揭示中国白酒的奥秘,构建白酒核心技术体系,增强产品市场竞争力.

摘要： 本发明涉及生物技术专业实验装置技术领域，具体是：一种生物技术专业分子生物学实验课程用试管清洗消毒烘干装置，包括机壳，所述机壳内转动设置有管轴，管轴的四周环绕设置有若干个可翻转夹具，可翻转夹具通过支架与管轴连接，且可翻转夹具的一侧连接有径向翻转机构；每一个所述可翻转夹具的下方都对应设置有可旋转伸缩刷杆，可旋转伸缩刷杆通过横架与管轴连接；所述机壳的一侧设置有放入口，放入口的位置与可翻转夹具的位置相对应，所述机壳的一侧设置有试管推出输送带机，本发明能够实现独立的连续放入试管，先产生的试管清洗需求不会和后产生的试管清洗需求发生冲突，更加符合满足实验课程中的实际情况，让清洗更加高效。

摘要： 本发明涉及一种海水养殖贝类的种类鉴定技术领域，尤其是一种利用形态学和分子遗传学技术对贝类样品进行种类鉴定的方法，该方法采用分子生物学方法与形态学方法相结合的方法对贝类进行鉴定，通过分子生物学方法对具有一定形态特征的贝类样品进行准确鉴定，总结可用于种类鉴定的形态特征，建立形态特征检索表，再利用形态特征检索表对其他样品进行种类识别，并采用分子生物学方法进行验证，能显著提高贝类种质资源鉴定的准确率，解决先前种类鉴定的诸多难点。

摘要： 本发明公开了一种分子生物学与形态学相结合鉴定鱼类早期个体的方法，其步骤：A、数据库建立：采集可以准确鉴定种类的样品保存于乙醇中，建立鱼类的barcoding数据库；B、样品保存：将采集的样品保存在添加硼酸钠或乙酸钠的4%甲醛保存液中；C、样品形态分组：在解剖镜下将不能准确确定种类的样品依据形态特征归类，记录形态特征；D、分子生物学鉴定：将选出的样品提取DNA、扩增mtDNA的COI基因片段并测序，确定种类；E、形态学鉴定：依据步骤C中记录的样品形态特征，进行种类鉴定；F、鉴定结果的分子生物学验证。方法易行，操作简便，准确性极高，解决了种类鉴定的技术难题，为鱼类早期资源的提供了技术支持。

摘要： 本实用新型公开了一种生物标本和分子生物学试剂保温盒，包括箱体，箱体的内壁固定连接有保温层，保温层的内壁活动连接有活动板，活动板的内壁固定连接有支撑杆，支撑杆的表面活动连接有第一活动块，第一活动块的底部固定连接有第一固定块，第一固定块的正面通过销轴活动连接有移动杆，移动杆的另一端通过销轴活动连接有第二固定块，第二固定块的底部固定连接有第二活动块，第二活动块的内部螺纹连接有螺杆，螺杆的一端通过轴承活动连接有固定板。本实用新型解决了现有的生物标本和分子生物学试剂保温盒对存放的东西不方便拿取，且支座不具有减震效果，在搬运过程中容易导致试剂和标本的损坏，不方便人们的使用的问题。

摘要： 本发明涉及一种利用分子生物学技术定量检测纳米材料生物安全性的方法，该方法是通过检测纳米材料对体外基因扩增的影响，从而实现定量衡量不同类型纳米材料的生物安全性。本发明利用体外基因扩增技术和基因重组技术，可对于纳米材料所引起的体外基因突变率进行精确地计算；此外，利用高效的rpsl基因正向选择系统，可在进行大规模分析时节省大量的原材料和劳动力。

摘要： 本发明涉及一种利用分子生物学技术定量检测纳米材料生物安全性的方法，该方法是通过检测纳米材料对体外基因扩增的影响，从而实现定量衡量不同类型纳米材料的生物安全性。本发明利用体外基因扩增技术和基因重组技术，可对于纳米材料所引起的体外基因突变率进行精确地计算；此外，利用高效的rpsl基因正向选择系统，可在进行大规模分析时节省大量的原材料和劳动力。

摘要： 本发明公开了一种利用分子生物学技术定量检测设备，其结构包括料筒、支架、导料板、扶把、门吸、入料口，料筒上连接有支架和入料口，入料口上滑动配合有导料板，导料板通过扶把与门吸间接配合，门吸包括磁铁、框架、助力组件、固定座、安装板，磁铁连接在框架和固定座之间，固定座内通过安装板设置有助力组件，框架连接在入料口上，在助力组件上设置有活结和控位装置，利用活结和控位装置在撑板之间相配合，当导料板在料筒和门吸之间以不同加速度抖动时，将会通过控位装置快速按压住撑板，使得撑板剖开缩套，快速承接住活结，两者交叉对接相互借力，阻挡和锁紧住扶把，保证导料板高处的稳定性。

摘要： 一种以分子生物学技术分析并定量益生菌和病原菌菌体数量的方法，包含下列步骤：步骤1:取一检品溶解于无菌水中，以高速离心，将菌体离下，加入无菌水稀释，作为待测菌样品；步骤2:待测菌样品以实时定量聚合酶连锁反应搭配目标菌专一性引物组；其中该目标菌专一性引物组是以目标菌的保守基因，包括16S rDNA、23S rDNA,16S‑23S rDNA的内转录区或持家基因序列片段作为扩增目标，其中该目标菌为益生菌或病原菌；以扩增片段的熔解曲线有无专一性波峰，确定该待测菌样品是否含有非目标菌种；步骤3:将获得的检品Ct值带入标准品制得的标准曲线的回归方程式，可以得知待测菌样品的菌体数量。

摘要： 本发明涉及一种基于分子生物学技术的蛹虫草子囊孢子杂交育种方法，具体包括：在无菌环境中诱导并分离蛹虫草单孢子并培养形成菌落；利用PCR技术对分离的单孢子形成的菌落进行交配型基因MAT1‑1‑1、MAT1‑1‑2和MAT1‑2‑1进行检测；选取含有交配型基因MAT1‑1‑1和MAT1‑1‑2却不含有MAT1‑2‑1的单孢子形成的菌落，与含有交配型基因MAT1‑2‑1却不含有MAT1‑1‑1和MAT1‑1‑2的单孢子形成的菌落分别取适当大小的菌丝体置于培养液中进行暗培养；将适当浓度的组合培养后的菌液接种到蛹虫草人工培养基，经过培养一段时间后，人工培养基上长出新品种的蛹虫草子实体。本方法培育的蛹虫草新品种更容易获得较好的产量以及子实体活性物质含量，通过统计不同组合培养出的子实体产量和活性物质含量，可以获得能稳定生产出优质蛹虫草子实体的组合，本方法周期较短，工作量较小，是一种高效的蛹虫草育种方法。

摘要： 本发明公开了老陈醋醋化阶段不同微生物菌株分子生物学鉴定试验方法，实验材料包括采集的老陈醋醋化阶段74株不同菌株(Y1‑Y74)，实验包括如下步骤：引物设计及合成；老陈醋醋化阶段不同菌株DNA提取及浓度测定；老陈醋醋化阶段不同菌株26S rDNA片段扩增；PCR扩增产物纯化与回收；目的片段和pEASY‑T1载体连接；转化；蓝白斑筛选与菌液PCR；测序；数据处理。本发明应用分子生物学技术，对看家基因26S rDNA测序鉴定，对老陈醋醋化阶段74株不同菌株进行分子生物学鉴定，结果显示Y1‑Y25、Y27‑Y29、Y31‑Y67、Y69、Y72‑Y74为酿酒酵母；Y26为毕赤酵母；Y30、Y71为毕赤酵母；Y68为红酵母；Y70为盔形毕赤酵母，为增香酵母的筛选鉴定提供依据。