分化能力

摘要： 目的探究微小RNA-26a-5p(miR-26a-5p)对第10染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(PTEN)的靶向作用及对成骨细胞分化及基质矿化的影响。方法通过在线软件预测miR-26a-5p与PTEN基因的结合位点,并经双荧光素酶报告基因检测验证。取生长状态良好的MC3T3-E1细胞,分为miR-26a-5p模拟物(mimic)组、miR-26a-5p mimic阴性对照(NC)组、pcDNA3.1-PTEN组、miR-26a-5p+pcDNA3.1-PTEN组,通过MTT法检测细胞增殖、碱性磷酸酶活性测定研究细胞分化情况、骨钙素定量检测分析和茜素红染色观察细胞基质矿化情况、Western blot检测成骨分化标志物和Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路蛋白表达变化。结果与NC组比较,miR-26a-5p mimic组miR-26a-5p水平、细胞增殖率、碱性磷酸酶活性、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、骨桥蛋白(OPN)、骨钙素、矿化率及β-catenin表达升高,PTEN mRNA及蛋白表达和糖原合成酶激酶-3b(Gsk-3b)表达降低(P<0.05),pcDNA3.1-PTEN组PTEN mRNA及蛋白表达和Gsk-3b表达升高,细胞增殖率、碱性磷酸酶活性、ColⅠ、OPN、骨钙素、矿化率及β-catenin表达降低(P<0.05);与miR-26a-5p mimic组比较,miR-26a-5p+pcDNA3.1-PTEN组PTEN mRNA及蛋白表达和Gsk-3b表达升高,细胞增殖率、碱性磷酸酶活性、ColⅠ、OPN、骨钙素、矿化率及β-catenin表达降低(P<0.05)。结论miR-26a-5p可靶向下调PTEN表达,调控Wnt/β-catenin信号通路,促进成骨细胞增殖、分化及基质矿化。

摘要： 一、造血干细胞造血干细胞是一群具有自我更新、增殖、分化能力的细胞,它可以分化为各类造血祖细胞,并在造血因子的调控下逐级分化发育为各类成熟的血细胞,如白细胞、红细胞、血小板等。二、造血干细胞移植造血干细胞移植,是患者先接受超大剂量放疗或化疗,以清除体内的肿瘤细胞、异常克隆细胞,同时破坏了自身的免疫系统,然后再回输采自自身或他人的造血干细胞,重建患者的造血功能和免疫功能,达到治疗某些疾病的目的。

摘要： 成体干细胞衰老是人体衰老和老年性疾病发生与发展的最新学说,传统中医学的“气血”理论与干细胞功能密切关系。前期研究我们已证明,人参皂苷Rg1是“补气要药”人参的重要抗衰老成分,它可以调控或延缓干细胞衰老。本文探讨人参皂苷Rg1通过调控Wnt/β-catenin信号通路提高衰老人骨髓间充质干细胞(hBM-MSC)分化能力。实验收集不同年龄段健康志愿者骨髓,分离、培养、纯化和鉴定符合国际认证的hBM-MSC。

摘要： 目的 研究雌性健康和绝经小鼠长骨及颌骨来源骨髓间充质干细胞(BMSCs)的增殖、分化能力.方法 18只小鼠通过双侧去卵巢法建立绝经小鼠动物模型(OVX组),另外18只小鼠仅剪去卵巢周围组织作为正常对照组(SHAM组),低钙饲养12周,取两组小鼠颌骨及长骨HE染色观察的组织形态变化;取两组小鼠长骨和下颌骨来源的BMSCs细胞(BMMSCs和JMMSCs),分为OVX-BMMSCs组、SHAM-BMMSCs组、OVX-JMMSCs组以及SHAM-JMMSCs组,培养1～7 d,采用CCK-8法检测4组BMSCs细胞的增殖特性,采用油红O和阿利新蓝染色并定量检测4组BMSCs细胞的脂滴含量和软骨基质含量.结果 与SHAM组相比,OVX组小鼠的骨小梁排列较紊乱,骨吸收明显,出现了较多大小规则不同的骨凹陷窝;CCK-8法检测结果 显示,4组BMSCs细胞随着培养时间的延长,细胞的增殖活性呈升高趋势(P=0.034),从培养第4天开始,JMMSCs的增殖能力明显强于BMMSCs组(P0.05).结论 雌性健康小鼠和绝经小鼠长骨与颌骨来源的BMSCs都显示出不同的生物学特性.

摘要： 目的研究雌性健康和绝经小鼠长骨及颌骨来源骨髓间充质干细胞(BMSCs)的增殖、分化能力。方法18只小鼠通过双侧去卵巢法建立绝经小鼠动物模型(OVX组),另外18只小鼠仅剪去卵巢周围组织作为正常对照组(SHAM组),低钙饲养12周,取两组小鼠颌骨及长骨HE染色观察的组织形态变化;取两组小鼠长骨和下颌骨来源的BMSCs细胞(BMMSCs和JMMSCs),分为OVX-BMMSCs组、SHAM-BMMSCs组、OVX-JMMSCs组以及SHAM-JMMSCs组,培养1~7 d,采用CCK-8法检测4组BMSCs细胞的增殖特性,采用油红O和阿利新蓝染色并定量检测4组BMSCs细胞的脂滴含量和软骨基质含量。结果与SHAM组相比,OVX组小鼠的骨小梁排列较紊乱,骨吸收明显,出现了较多大小规则不同的骨凹陷窝;CCK-8法检测结果显示,4组BMSCs细胞随着培养时间的延长,细胞的增殖活性呈升高趋势(P=0.034),从培养第4天开始,JMMSCs的增殖能力明显强于BMMSCs组(P0.05)。结论雌性健康小鼠和绝经小鼠长骨与颌骨来源的BMSCs都显示出不同的生物学特性。

摘要： 绵羊是我国农牧业生产中的重要家畜,建立绵羊诱导性多能干细胞系(induced pluripotent stem cells,iPSCs)在家畜培育后代及再生领域等方面具有特别重要的作用。本实验通过电转8个转录因子(oct4,sox2,klf4,c-myc,lin28,nanog,SV40大T和hTERT)重编程绵羊成体成纤维细胞获得iPSCs。依赖血清+白血病抑制因子(lif)+Doxycycline共建立雄性绵羊42个iPSCs系,建系效率为41.7%。iPSCs能正常冻存以及解冻。对其多能性进行一系列检测,并且把体内外分化作为重点研究对象,探究其分化能力。

摘要： 孕晚期胎儿脑白质易受如高糖、缺氧等氧化应激反应的影响,造成其损伤。核因子E2相关因子2(Nrf2)是调控细胞氧化应激反应的重要转录因子,能够通过调控生成解毒酶及抗氧化蛋白的表达,从而减少细胞的损伤。然而目前Nrf2在调节高糖环境下少突胶质前体细胞OPCs增殖、分化能力的研究尚少。

摘要： 为比较驴血清和胎牛血清对体外培养驴巨噬细胞的影响,采用含10％驴血清或胎牛血清的培养液进行驴巨噬细胞培养的对比试验,分别在培养的1、4、7、10 d时观察细胞的生长状况,并用MTT法通过细胞吸光度检测细胞活力;培养后4 d采用流式细胞仪检测巨噬细胞的纯度.结果表明,含10％驴血清培养液培养的驴巨噬细胞的分化能力优于胎牛血清;培养后1、4 d时,2种血清对巨噬细胞活力的影响没有显著差异,但培养后7、10 d,驴血清组的细胞活力显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于胎牛血清组;培养后4 d,2组试验中巨噬细胞的纯度分别为(92.72±0.45)％和(81.16±2.13)％.综上,驴血清组培养的巨噬细胞其分化能力、活力和纯度均优于胎牛血清组,故更适合用于驴巨噬细胞的体外培养.

摘要： 以继代培养0.5、1.5 a和3.5 a的抗性黑松37#家系胚性愈伤组织为材料,观察不同培养时间胚性细胞的形态和体胚成熟的过程,并对愈伤组织的增殖率、每克愈伤形成的体胚数量及体胚萌发率和植株成活率进行测定.结果 表明:在继代培养过程中,胚性胚柄细胞团(ESM)结构逐渐疏松,胚柄细胞呈现缩短、增粗的现象;培养时间对抗性黑松愈伤组织的增殖、分化、体胚萌发及植株成活率均有显著影响.3种不同培养时间愈伤组织的增殖率分别为200.37％、182.47％和111.63％,每克胚性愈伤组织形成成熟体细胞胚分别为77、31、5个,萌发率分别为84.43％、51.10％、11.13％;植株成活率分别为73.00％、50.00％、6.70％,均呈下降趋势;3种愈伤体胚成熟的时间也存在显著差异,继代培养时间越长,体胚分化成熟过程越慢,愈伤组织形成子叶胚的时间最短为46 d,最长为74 d.因此,抗性黑松胚性愈伤组织在继代培养过程中胚性逐步降低,体胚发生和植株再生能力下降,短期培养的胚性愈伤组织(0.5 a)为抗性黑松体胚发生较为理想的初始材料,且愈伤组织继代培养时间不宜超过1.5a.

摘要： 目的:探讨年龄因素对人牙周膜干细胞(PDLSCs)多向分化能力的影响.方法:选取因阻生需要拔除的具有完整牙根的第三磨牙共14颗,根据患者年龄分为青少年组(16～19岁)和中老年组(38～50岁),分别刮取牙周膜组织,分离培养获得PDLSCs,用流式细胞术分析干细胞表面标记物;通过体外成骨、成脂诱导培养,比较两组PDLSCs的多向分化能力.结果:经过流式细胞术检测,两组PDLSCs均具有间充质干细胞的特性,但中老年组PDLSCs的成骨、成脂分化能力较青少年组明显减弱(P<0.05).结论:PDLSCs的多向分化能力随年龄的增加而降低.

摘要： 人类免疫缺陷病毒(HIV)和丙型肝炎病毒(HCV)有相似的传播途径，均可经静脉注射、使用血制品及性乱传播，因此在静脉药瘾者、同性恋者、血友病患者等特殊人群中存在严重的重叠感染现象。HN/HCV重叠感染加快丙型病毒性肝炎的病情进展，加速肝炎肝硬化的进展。rn 本文以HIV/HCV重叠感染者及单独HCV感染者为研究对象，综合分析细胞毒性T细胞(CTL)的增殖和分化能力在两组中的异同，探讨HIV/HCV重叠感染患者与单独HCV感染者CTL功能存在的差异，以及CTL的功能在病情进展中的作用。

摘要： 目的：为了明确小鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)自我更新能力及其分化能力,观察其增殖、凋亡,倍增能力及向成骨细胞和脂肪细胞分化能力等,我们需要寻求适宜有效的小鼠BM-MSCs体外培养方法.方法：我们利用全骨髓贴壁培养法分离培养2周龄的WT小鼠来源的BM-MSCs,倒置相差显微镜观察其形态特征.鉴定实验,一组用成骨细胞诱导剂诱导小鼠BMSCs向成骨细胞分化,通过碱性磷酸酶(ALP)染色和总克隆染色观察钙化结节.另一组加入成脂细胞诱导剂培养细胞,通过油红O染色观察脂肪细胞.结果：小鼠BM-MSCs形态呈梭形,可传代10代左右,具有增殖及多项分化能力,成骨及成脂实验均为阳性.

摘要： 本实验以无子西瓜"蜜童"无菌苗子叶为外植体,研究种子灭菌方法、子叶的取材部位、黑暗培养等对其不定芽诱导的影响.简化了种子表面灭菌操作,污染率为0,实验证明,相同培养条件下,"蜜童"无菌苗子叶不定芽的分化能力由近轴端至远轴端逐渐降低,外植体的离体黑暗培养不能促进、甚至抑制不定芽的诱导.

摘要： 以红掌品种"北京成功"嫩叶为外植体,在培养基1/2MS+6-BA0.5mg·L-1(单位下同)+2,4-D0.5上培养100d,愈伤组织诱导率达100％,愈伤组织在培养基MS+6-BA10+2,4-D00上经过100d培养完成小苗植株再生,再经丛生芽增殖途径达到快繁目的.试验也对"北京成功"和"亚利桑娜"两个品种的快繁体系进行了比较,结果表明:"北京成功"经丛生芽增殖途径,单芽茎段繁殖倍数为4.9,成苗健壮,但在同样的培养条件下,"亚利桑娜"的单芽茎段芽的诱导率及长势低于"北京成功";相反,适于"亚利桑娜"快繁的"二次脱分化再生团块发生"途径气生根诱导再生团块的培养基配方却不适合"北京成功",因此红掌不同品种的分化能力存在差异.

摘要： 本实验通过分子生物学手段构建了crrv-eGFP-gsg2-DsPed载体，并通过脂质体转染的方法将其转染到睾丸共培养体系中，得到既表达红荧光蛋白又表达绿荧光蛋白的生精细胞，证明了该载体的生物学活性与功能，将该载体通过一定的方法转染到精原干细胞，可以使该细胞在分化到细胞核分裂的次级精母细胞、圆形精子细胞、长形精子细胞的细胞中表达红荧光蛋白，结合其形态学标准，为精原干细胞分化能力的鉴定提供更为可靠的依据。将该载体通过一定的方法稳定整合到动物体内，可以制作睾丸中在细胞核分裂的次级精母细胞、圆形精子细胞和长形精子细胞中表达红荧光蛋白转基因动物，从而为精子发生过程的研究提供有力的工具。

摘要： 本文以3组同一基因型不同倍性的西瓜为试材，运用组织培养方法，研究其在组培体系中生长发育的差异和特点。研究指出组培条件下四倍体发芽率、分化能力优于二倍体的现象与生产上表现不一致，除了种子大小外，四倍体的芽结构在组培条件下形成的早可能是原因之一。

摘要： 以切花月季‘Pepita'和‘Red Champ'的茎段进行组织培养，诱导愈伤组织，进而分化不定芽。试验结果表明:只有在含有2，4-D 的培养基中诱导的愈伤才具有不定芽的分化能力，合适的分化培养基为MS+BA6.0+NAA0.0+GA 3 0.1，但有一定的畸形苗，有可能是2，4-D 的致畸作用。

摘要： 汗腺是皮肤的重要附属器官,在体温调节方面具有重要的作用.深度超过深Ⅱ度的烧伤创面皮肤附属器官被破坏,无论自体皮移植或组织工程皮肤封闭创面均无法重建汗腺,导致创面愈合后散热功能丧失,能否应用干细胞技术实现大面积深度烧伤创面汗腺再生,近年来成为烧伤领域研究的一个热点.许多研究都证实间充质干细胞(MSCs)能够分化为中、外胚层的多种细胞,在再生医学和组织工程学中具有很大的应用潜能和治疗价值.在给予其一定的诱导剂或微环境后,MSCs可以分化为多种人体细胞,在其跨胚层分化的过程中,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路发挥了重要作用.本研究的目的是探索UC-MSCs向汗腺细胞分化的能力,以及ERK通路在分化过程中的作用、EGF对其分化过程的影响,为临床应用UC-MSCs实现烧伤后汗腺重再生提供依据.

摘要： 汗腺是皮肤的重要附属器官,在体温调节方面具有重要的作用.深度超过深Ⅱ度的烧伤创面皮肤附属器官被破坏,无论自体皮移植或组织工程皮肤封闭创面均无法重建汗腺,导致创面愈合后散热功能丧失,能否应用干细胞技术实现大面积深度烧伤创面汗腺再生,近年来成为烧伤领域研究的一个热点.许多研究都证实间充质干细胞(MSCs)能够分化为中、外胚层的多种细胞,在再生医学和组织工程学中具有很大的应用潜能和治疗价值.在给予其一定的诱导剂或微环境后,MSCs可以分化为多种人体细胞,在其跨胚层分化的过程中,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路发挥了重要作用.本研究的目的是探索UC-MSCs向汗腺细胞分化的能力,以及ERK通路在分化过程中的作用、EGF对其分化过程的影响,为临床应用UC-MSCs实现烧伤后汗腺重再生提供依据.

摘要： 汗腺是皮肤的重要附属器官,在体温调节方面具有重要的作用.深度超过深Ⅱ度的烧伤创面皮肤附属器官被破坏,无论自体皮移植或组织工程皮肤封闭创面均无法重建汗腺,导致创面愈合后散热功能丧失,能否应用干细胞技术实现大面积深度烧伤创面汗腺再生,近年来成为烧伤领域研究的一个热点.许多研究都证实间充质干细胞(MSCs)能够分化为中、外胚层的多种细胞,在再生医学和组织工程学中具有很大的应用潜能和治疗价值.在给予其一定的诱导剂或微环境后,MSCs可以分化为多种人体细胞,在其跨胚层分化的过程中,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路发挥了重要作用.本研究的目的是探索UC-MSCs向汗腺细胞分化的能力,以及ERK通路在分化过程中的作用、EGF对其分化过程的影响,为临床应用UC-MSCs实现烧伤后汗腺重再生提供依据.

摘要： 本发明的由序列表中序列1或序列表中序列2形成的肽呈现造骨细胞的增殖、分化促进及牙周韧带成纤维细胞的增殖和活性促进功效。本发明的肽通过使如smad1/5/8磷酸化等骨形态发生蛋白(BMP)信号转导增加，来使造骨细胞的生长及如COL1A1、骨唾液酸蛋白、碱性磷酸酶等分化标记的表达增加，从而最终呈现造骨活性。本发明的肽通过磷脂酰肌醇3‑激酶及蛋白激酶B磷酸化，来促进牙周韧带成纤维细胞的生长，并且增加如COL1A1及牙本质涎磷蛋白等活性标记的表达，从而最终呈现牙周组织再生活性。本发明提供包含上述的肽的骨疾病的预防或治疗用组合物及牙周疾病的预防或治疗用组合物。

摘要： 本发明的由序列表中序列1或序列表中序列2形成的肽呈现造骨细胞的增殖、分化促进及牙周韧带成纤维细胞的增殖和活性促进功效。本发明的肽通过使如smad1/5/8磷酸化等骨形态发生蛋白(BMP)信号转导增加，来使造骨细胞的生长及如COL1A1、骨唾液酸蛋白、碱性磷酸酶等分化标记的表达增加，从而最终呈现造骨活性。本发明的肽通过磷脂酰肌醇3‑激酶及蛋白激酶B磷酸化，来促进牙周韧带成纤维细胞的生长，并且增加如COL1A1及牙本质涎磷蛋白等活性标记的表达，从而最终呈现牙周组织再生活性。本发明提供包含上述的肽的骨疾病的预防或治疗用组合物及牙周疾病的预防或治疗用组合物。

摘要： 本发明公开了一种用于扩增并维持造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs)自我更新能力和分化潜能的培养基组合物、细胞群体及其应用。所述培养基组合物包括造血干细胞培养基和PDGFR靶点的小分子抑制剂。申请人首次证明了PDGFR的抑制剂能够在体外培养过程中显著扩增HSCs，同时保持HSCs高比例的自我更新能力。申请人发现的PDGFR抑制剂扩增LT‑HSCs的效果显著优于已报道的化学小分子。这是首次证明并报道了PDGF/PDGFR信号通路在造血干细胞扩增并维持自我更新能力方面发挥重要作用。申请人的研究结果可以实现HSCs的体外扩增的同时维持细胞较高比例的干性，在此基础上进行HSCs移植的临床应用，可广泛治疗一系列血液系统疾病。

摘要： 本发明提供仅在动物细胞的适当的发育阶段，使该细胞与细胞因子接触的细胞的分化诱导方法，以及在动物细胞的培养增殖时组合使用2种或2种以上细胞因子的控制动物细胞的分化能力的体系。

摘要： 本发明公开了一种能够调控MSCs成脂肪分化能力的基因，所述基因为Wip1基因，所述Wip1基因正向调控MSCs成脂肪分化能力。本发明人通过实验发现，Wip1基因通过PP2A‑PPAR‑γ信号通路调节MSCs成脂分化的能力，为MSCs生物学特性的研究及临床应用提供了理论与实验依据，也为临床研究应用MSCs治疗疾病提供新靶标。

摘要： 本发明公开了一种经过改良的干细胞培养基及利用该培养基获得具有高分化能力和扩增效率的间充质干细胞的方法，属于细胞培养技术领域，所述培养基含有：胎牛血清、聚乙烯吡咯烷酮和维生素C磷酸酯镁。本发明提供的培养基适用于干细胞的体外培养，其优势在于血清以极低的浓度存在，但是在维持干细胞特性和增殖效率方面具有显著优于10％血清培养的效果，与现有技术相比取得了显著的进步。

摘要： 本发明涉及干细胞的分化诱导及分化能力的控制。本发明提供仅在动物细胞的适当的发育阶段，使该细胞与细胞因子接触的细胞的分化诱导方法，以及在动物细胞的培养增殖时组合使用2种或2种以上细胞因子的控制动物细胞的分化能力的体系。

摘要： 本发明提供用于控制动物细胞的分化能力的体系，其中仅在在动物细胞培养或增殖过程中动物细胞的适当的发育阶段，使该细胞与细胞因子2种或2种以上细胞因子的组合接触的细胞的分化诱导。

摘要： 本发明公开了一种经过改良的干细胞培养基及利用该培养基获得具有高分化能力和扩增效率的间充质干细胞的方法，属于细胞培养技术领域，所述培养基含有：胎牛血清、聚乙烯吡咯烷酮和维生素C磷酸酯镁。本发明提供的培养基适用于干细胞的体外培养，其优势在于血清以极低的浓度存在，但是在维持干细胞特性和增殖效率方面具有显著优于10％血清培养的效果，与现有技术相比取得了显著的进步。

摘要： 本发明涉及干细胞领域，尤其涉及一种评估多能干细胞体外特异分化能力的实验方法及其应用。具体步骤包括：S1.准备人间充质干细胞，对照细胞A和对照细胞B；S2.制备下层培养基；S3.制备上层培养基；S4.对S1准备好的人间充质干细胞，对照细胞A和对照细胞B进行接种，培养。本发明提供了一种评估多能干细胞体外特异分化能力的实验方法，该方法解决了现有技术中对照组细胞生长状态差、与样品对比不明显导致的假阳性结果，以及缺少统一评判标准容易因主观因素差异导致误判的问题，实现了一种对比明显、评判标准统一的人间充质干细胞体外成瘤检测方法。