J亚群禽白血病病毒

摘要： 为探明2021年龙岩市规模化鸡场鸡传染性贫血病病毒(CIAV)、圆圈病毒3型(GyV3)、鸡细小病毒(ChPV)、J亚群禽白血病病毒(ALV-J)等4种病毒的感染情况,对龙岩市32个规模化鸡场采集的297份病死鸡组织样品进行PCR或RT-PCR检测,并对检测结果进行统计分析.结果显示:CIAV、GyV3、ChPV和ALV-J均有检出,阳性检出率分别为34.34％、28.62％、18.86％、13.13％;从病原分布看,CIAV分布最广,除漳平市外其余6个区县均有检出,各区县检出率介于12.00％～98.00％;其他3种病原呈局限性分布,均只在4个区县有检出.共检出单一感染阳性样品79份,总单一感染阳性检出率为26.60％(79/297),单一感染阳性检出率从高到低依次为ChPV(14.81％)、CIAV(5.05％)、ALV-J(4.71％)、GyV3(2.02％).CIAV+ChPV双重感染阳性检出率为2.69％(8/297),CIAV+GyV3为18.18％(54/297);CIAV+ALV-J+GyV3三重感染阳性检出率为7.07％(21/297),CIAV+ChPV+ALV-J+GyV3四重感染为1.34％(4/297).结果表明:龙岩市鸡群中存在CIAV、ALV-J、ChPV和GyV34种病原的感染,且部分地区感染较为严重,混合感染现象普遍,提示龙岩市应积极开展疫病监测,加强鸡场的生物安全综合防控.

摘要： 为研究鸡巨噬细胞受体(MARCO)基因与J亚群禽白血病病毒(ALV-J)感染两者间的关联,先过表达ALV-J env基因不同结构域后通过RT-qPCR检测MARCO基因mRNA的转录水平,再构建MARCO真核表达载体并转染HD11细胞,通过RT-qPCR和Western blot检测MARCO过表达对ALV-J复制水平的影响,最后通过RT-qPCR检测MARCO过表达对巨噬细胞天然免疫相关基因TLR3和IFIH1转录水平的影响。结果表明:ALV-J env蛋白对MARCO基因mRNA转录水平有极显著抑制作用;过表达MARCO极显著抑制ALV-J病毒的复制;过表达MARCO后,TLR3和IFIH1基因mRNA转录水平均极显著上调。这一研究揭示了MARCO基因在ALV-J感染巨噬细胞后的动态转录水平规律及其抑制ALV-J增殖的功能,其可能通过诱导天然免疫基因TLR3、IFIH1高转录水平的途径来实现抗病毒作用,为今后研究MARCO的功能及治疗禽白血病提供了新的思路。

摘要： 为了解山东沂蒙草鸡禽白血病病毒(ALV)感染情况,本试验从2个沂蒙草鸡规模化养殖场采集血浆样品184份,经DF-1细胞分离后利用ELISA试剂盒检测ALV-p27抗原.结果 显示,有5份样品为ALV阳性(阳性率2.71％).经分型引物鉴定,4份样品为A亚群禽白血病病毒,1份样品为J亚群禽白血病病毒.对J亚群禽白血病病毒(命名为SDLYU1901)进行了全基因序列测定及分析,结果发现,J亚群病毒全基因组序列与江苏蛋鸡分离株JS09GY3相似性最高,为96.4％.分离株gag 、pol基因较为保守,而env基因和3'UTR基因变异程度较大.其中gp85基因与ALV-J参考株核苷酸相似性为89.7％～95.8％.3'UTR在rTM区以及DR1区域共出现205 bp的缺失.U3区序列分析结果显示,其与ALV-J原型株HPRS-103相似性最高,相似性为97.3％.试验结果表明沂蒙草鸡存在ALV感染,同时可为分析沂蒙草鸡ALV-J毒株分子特征及变异趋势提供数据支持.

摘要： 禽白血病是由禽白血病病毒引起的一种肿瘤性免疫抑制病,J亚群禽白血病病毒可以引起鸡的髓样细胞瘤等多种类型肿瘤,也可以引起免疫抑制,继发其他致病性病原的共感染.2019年,内蒙古某养殖合作社送检一批海兰褐蛋鸡,发病鸡出现精神沉郁、消瘦虚弱、鸡冠发白.为了明确病因,本研究综合运用临床剖检、组织学检查、病原学和分子生物学检测等方法进行系统检测与分析,最终确诊为J亚型禽白血病病毒与大肠杆菌的共感染,揭示了J亚型禽白血病病毒与大肠杆菌共感染所导致的致病特征及两者之间的关联性.

摘要： J亚群禽白血病病毒(ALV-J)是一种严重危害养禽业的肿瘤疾病之一,因目前尚无可供广泛使用的有效疫苗和特效药,防控主要依靠种群净化。本试验以ALV-J原型毒株的gp37基因序列为参照,设计荧光引物,成功建立了特异性较强的ALV-J荧光定量PCR检测方法。随后,将ALV-J病毒液与黄芪提取液先后或同时作用于DF-1细胞,培养72 h后,提取细胞总RNA,用建立的荧光定量PCR方法检测病毒对照组与直接灭活组、预防组、治疗组之间gp37基因表达量的差异,以此探索黄芪对gp37基因转录的影响。结果显示,病毒对照组与直接灭活组、预防组、治疗组的gp37基因表达量均有显著差异(P<0.05),其中预防组的gp37基因表达量与病毒对照组差异最大,表明黄芪能明显下调gp37基因的表达。因此,黄芪可能对J亚型禽白血病的防治有一定作用。

摘要： 2018年以来,某进口品种肉种鸡发生疑似禽白血病病例,流行范围广,危害严重,为确定该次疫情的病原,本研究从辽宁、山东等地发病鸡场采集55份疑似禽白血病病料样品.病理组织切片观察显示,病料样品肝脏和脾脏均有髓细胞样肿瘤细胞增生.针对禽白血病病毒-(ALV)、鸡马立克氏病病-毒(MDV)和网状内皮组织增生症病毒(REV)的特异性PCR检测结果显示,55份病料样品中ALV阳性样品12份(21.8％),MDV阳性样品1份(1.82％),REV均为阴性.将12份ALV阳性病料样品经处理后接种DF-1细胞进行病毒分离,ELISA检测结果显示有8份ALV群特异性抗原阳性.ALV多重PCR检测结果表明,8个分离株均为J亚群ALV (ALV-J),测序结果显示,8个分离株之间核苷酸序列同源性为99.5％～100％,与A、B、C、D、E亚群ALV的同源性仅为56.5％～58.8％,与ALV-J的同源性为90.7％～96.6％,进一步表明所有分离株均为ALV-J.上述结果表明,引起该次进口白羽父母代肉种鸡发生禽白血病的病原主要以ALV-J为主,该研究结果为疫情的溯源和有效防控奠定了基础.

摘要： To investigate the antiviral effects of ginkgo biloba exocarp polysaccharide (GBEP) on the replication of Avian leukosis virus subgroup J (ALV-J), DF-1 cells were treated with GBEP at different time points. The results indicated that GBEP strongly inhibited viral gene transcription, protein expression and virus titers through dose and time dependent manners as detected using qRT-PCR, Western blot and TCID50assays. We also noted that GBEP greatly down-regulated the expression of IL-1β, TNFα and other immune related cytokines. Overall, this study highlighted that GBEP exerted its anti-avian leukosis virus activity and might be developed as a preventive drug for ALV-J infection in the future.%为研究银杏外种皮多糖抑制J亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virus subgroup J,ALV-J)复制的能力,在不同时间点加入银杏外种皮多糖处理DF-1细胞,利用qRT-PCR、免疫蛋白印迹以及病毒滴度检测等方法,观察银杏外种皮多糖对ALV-J复制的影响,结果表明银杏外种皮多糖就能够显著地抑制病毒基因表达、蛋白合成以及病毒在细胞内的增殖,并且这种抑制作用具有时间和剂量依赖性.同时银杏外种皮多糖处理还明显抑制病毒感染细胞中的IL-1β、TNFα等细胞因子的表达.银杏外种皮多糖在DF-1细胞中具有抑制ALV-J复制的能力,具有作为抗ALV-J药物的潜力.

摘要： gp85 is the surface unit (SU) of avian leukosis virus (ALV) envelop which mediates ALV infecting cells by interacting with specific receptor.To express soluble ALV-J gp85 and analysis its biological activity,we constructed a combined gp85 plasmid pCAGGS-s-gp85-Fc that fused a signal peptide coding-sequences onN terminal and Fc coding-sequences on C terminal.After transfected 293T cells with the pCAGGS-s-gp85-Fc plasmid,the supernatant was collected and the expression of gp85-Fc was detected with SDS-PAGE.By affinity chromatography of protein A,we obtained gp85-Fc protein with high purity.After cut the Fc tag with HRV 3C protease,gp85 monomer with more than 90％ purity was obtained.By flow cytometry detected,we identified that the pure gp85 protein could bind with the receptor specially.Meanwhile,gp85 could block ALV-J enter into DF-1 cells by sealing viral receptor in a dose-dependent manner.When the concentration of gp85 was 100 μ g/mL,over 70％ virus were blocked.These results indicated that soluble gp85 protein was successfully expressed with biologic activity,which would lay the foundation of studying the mechanism of ALV-J infecting cells in vitro.%gp85蛋白是禽白血病病毒(ALV)的囊膜表面蛋白,含有病毒-受体决定簇,通过识别和结合受体介导病毒侵入宿主细胞.为表达具有正确构象和生物学活性的J亚群ALV (ALV-J) gp85蛋白并对其生物活性进行分析,本研究以pCAGGS为载体,构建N端带有信号肽编码序列、C端融合Fc编码序列的gp85重组表达质粒pCAGGS-s-gp85-Fc,将其转染293T细胞进行瞬时表达,收集细胞培养液.SDS-PAGE结果表明,gp85-Fc蛋白高效表达,并且经Protein A亲和层析纯化得到高纯度的gp85-Fc蛋白.利用HRV 3C蛋白酶切除Fc标签并且进行分子筛纯化,得到纯度高于90％的gp85蛋白单体.经过流式细胞仪检测,表达的可溶性gp85蛋白能够与ALV-J受体特异性结合.病毒感染阻断试验结果显示,gp85蛋白能够通过封闭受体阻断ALV-J进入DF-1细胞,并且呈现剂量依赖性,在100μg/mL时仍能阻断70％以上的病毒侵入.本研究可溶性的、具有生物学活性的gp85蛋白的制备为体外研究病毒感染宿主细胞机割奠定了的基础.

摘要： 为了解鸡群中禽白血病(Avian leukosis,AL)发生的原因以及感染的禽白血病病毒(Avian leu-kosis virus,ALV)的亚群,研究对发病鸡进行临床诊断、病理剖检和病理组织学观察,并采集肿瘤样病变组织处理后接种DF-1细胞,培养后分别进行禽白血病病毒p27群特异性抗原ELISA检测、亚群特异性PCR检测以及亚群特异性间接免疫荧光法(IFA)鉴定,确定了40周龄三黄种鸡群感染了J亚群禽白血病病毒(ALV-J,分离株命名为GX16YL02);进一步对分离株env基因进行PCR扩增、克隆和序列测定与比较分析.结果表明:分离株GX16YL02的env基因与ALV-J英国原型株HPRS-103的核苷酸及氨基酸的相似性分别为93.9％和91.9％,与其他8株国内外参考株的核苷酸及氨基酸的相似性分别为90.7％～95.5％和89.4％～95.2％,其中gp85基因与其他参考株的核苷酸和氨基酸相似性相对较低,分别为86.9％～94.9％和85.1％ ～95.4％,整个env基因有义突变和沉默突变的比例分析显示,与gp37基因相比,gp85基因变异较大,尤其是免疫选择压在高变区hr1区域有一定的作用.

摘要： 据报道氯化锂(LiCl)能抑制多种DNA和RNA病毒的复制,但是LiCl对J亚群禽白血病病毒(ALV-J)感染是否具有相似的抑制作用尚未见报道.本研究通过使用实时荧光定量PCR,Western blot,IFA和p27ELISA等方法评估了CEF细胞中LiCl对ALV-J感染的抗病毒活性.研究结果表明,LiCl处理后病毒的RNA拷贝数和蛋白质表达水平显著降低,并呈现剂量和时间依赖性.不同时间点加入LiCl实验结果显示,病毒吸附细胞后加入LiCl抑制效果最明显,而且这种抑制效果主要作用于病毒复制早期阶段.研究还发现LiCl抑制ALV-J病毒复制与抑制促炎反应有关.这些结果表明LiCl有效阻断了CEF细胞中ALV-J的复制,可作为抗ALV-J的药物应用于临床.

摘要： 据报道氯化锂(LiCl)能抑制多种DNA和RNA病毒的复制,但是LiCl对J亚群禽白血病病毒(ALV-J)感染是否具有相似的抑制作用尚未见报道.本研究通过使用实时荧光定量PCR,Western blot,IFA和p27ELISA等方法评估了CEF细胞中LiCl对ALV-J感染的抗病毒活性.研究结果表明,LiCl处理后病毒的RNA拷贝数和蛋白质表达水平显著降低,并呈现剂量和时间依赖性.不同时间点加入LiCl实验结果显示,病毒吸附细胞后加入LiCl抑制效果最明显,而且这种抑制效果主要作用于病毒复制早期阶段.研究还发现LiCl抑制ALV-J病毒复制与抑制促炎反应有关.这些结果表明LiCl有效阻断了CEF细胞中ALV-J的复制,可作为抗ALV-J的药物应用于临床.

摘要： 据报道氯化锂(LiCl)能抑制多种DNA和RNA病毒的复制,但是LiCl对J亚群禽白血病病毒(ALV-J)感染是否具有相似的抑制作用尚未见报道.本研究通过使用实时荧光定量PCR,Western blot,IFA和p27ELISA等方法评估了CEF细胞中LiCl对ALV-J感染的抗病毒活性.研究结果表明,LiCl处理后病毒的RNA拷贝数和蛋白质表达水平显著降低,并呈现剂量和时间依赖性.不同时间点加入LiCl实验结果显示,病毒吸附细胞后加入LiCl抑制效果最明显,而且这种抑制效果主要作用于病毒复制早期阶段.研究还发现LiCl抑制ALV-J病毒复制与抑制促炎反应有关.这些结果表明LiCl有效阻断了CEF细胞中ALV-J的复制,可作为抗ALV-J的药物应用于临床.

摘要： 据报道氯化锂(LiCl)能抑制多种DNA和RNA病毒的复制,但是LiCl对J亚群禽白血病病毒(ALV-J)感染是否具有相似的抑制作用尚未见报道.本研究通过使用实时荧光定量PCR,Western blot,IFA和p27ELISA等方法评估了CEF细胞中LiCl对ALV-J感染的抗病毒活性.研究结果表明,LiCl处理后病毒的RNA拷贝数和蛋白质表达水平显著降低,并呈现剂量和时间依赖性.不同时间点加入LiCl实验结果显示,病毒吸附细胞后加入LiCl抑制效果最明显,而且这种抑制效果主要作用于病毒复制早期阶段.研究还发现LiCl抑制ALV-J病毒复制与抑制促炎反应有关.这些结果表明LiCl有效阻断了CEF细胞中ALV-J的复制,可作为抗ALV-J的药物应用于临床.

摘要： 为了探讨泰山马尾松花粉多糖(TPPPS)对J亚群禽白血病病毒(ALV-J)不同接种途径诱导1日龄SPF雏鸡免疫抑制的免疫调理作用,本研究分别经口服、点眼、腹腔注射、肌肉注射模拟水平传播感染ALV-J,同时连续10d口服给予TPPPS,分别对各组试验鸡体重及免疫器官指数、带毒、排毒及抗体、相关免疫学指标进行检测比较.结果显示,饲喂多糖组与接毒组相比,试验鸡体重及免疫器官指数抑制程度得到改善,血液带毒及泄殖腔排毒量降低,抗体分泌提前、分泌量增加,而IL-2、IL-4细胞因子分泌水平提高,T淋巴细胞转化率、CD4+和CD8+T细胞数增加,其中以腹腔注射和肌肉注射组TPPPS的免疫调理作用最显著,而健康对照组饲喂TPPPS后试验鸡相关免疫指标水平提高.本研究结果表明,TPPPS对健康雏鸡具有一定的免疫增强作用,口服TPPPS对不同水平传播途径感染ALV-J引起的免疫抑制具有免疫调理作用,TPPPS可以作为免疫增强剂用于防控ALV-J的早期水平感染,降低其免疫抑制程度,减少经济损失.

摘要： 为了探讨泰山马尾松花粉多糖(TPPPS)对J亚群禽白血病病毒(ALV-J)不同接种途径诱导1日龄SPF雏鸡免疫抑制的免疫调理作用,本研究分别经口服、点眼、腹腔注射、肌肉注射模拟水平传播感染ALV-J,同时连续10d口服给予TPPPS,分别对各组试验鸡体重及免疫器官指数、带毒、排毒及抗体、相关免疫学指标进行检测比较.结果显示,饲喂多糖组与接毒组相比,试验鸡体重及免疫器官指数抑制程度得到改善,血液带毒及泄殖腔排毒量降低,抗体分泌提前、分泌量增加,而IL-2、IL-4细胞因子分泌水平提高,T淋巴细胞转化率、CD4+和CD8+T细胞数增加,其中以腹腔注射和肌肉注射组TPPPS的免疫调理作用最显著,而健康对照组饲喂TPPPS后试验鸡相关免疫指标水平提高.本研究结果表明,TPPPS对健康雏鸡具有一定的免疫增强作用,口服TPPPS对不同水平传播途径感染ALV-J引起的免疫抑制具有免疫调理作用,TPPPS可以作为免疫增强剂用于防控ALV-J的早期水平感染,降低其免疫抑制程度,减少经济损失.

摘要： 为了探讨泰山马尾松花粉多糖(TPPPS)对J亚群禽白血病病毒(ALV-J)不同接种途径诱导1日龄SPF雏鸡免疫抑制的免疫调理作用,本研究分别经口服、点眼、腹腔注射、肌肉注射模拟水平传播感染ALV-J,同时连续10d口服给予TPPPS,分别对各组试验鸡体重及免疫器官指数、带毒、排毒及抗体、相关免疫学指标进行检测比较.结果显示,饲喂多糖组与接毒组相比,试验鸡体重及免疫器官指数抑制程度得到改善,血液带毒及泄殖腔排毒量降低,抗体分泌提前、分泌量增加,而IL-2、IL-4细胞因子分泌水平提高,T淋巴细胞转化率、CD4+和CD8+T细胞数增加,其中以腹腔注射和肌肉注射组TPPPS的免疫调理作用最显著,而健康对照组饲喂TPPPS后试验鸡相关免疫指标水平提高.本研究结果表明,TPPPS对健康雏鸡具有一定的免疫增强作用,口服TPPPS对不同水平传播途径感染ALV-J引起的免疫抑制具有免疫调理作用,TPPPS可以作为免疫增强剂用于防控ALV-J的早期水平感染,降低其免疫抑制程度,减少经济损失.

摘要： 为了探讨泰山马尾松花粉多糖(TPPPS)对J亚群禽白血病病毒(ALV-J)不同接种途径诱导1日龄SPF雏鸡免疫抑制的免疫调理作用,本研究分别经口服、点眼、腹腔注射、肌肉注射模拟水平传播感染ALV-J,同时连续10d口服给予TPPPS,分别对各组试验鸡体重及免疫器官指数、带毒、排毒及抗体、相关免疫学指标进行检测比较.结果显示,饲喂多糖组与接毒组相比,试验鸡体重及免疫器官指数抑制程度得到改善,血液带毒及泄殖腔排毒量降低,抗体分泌提前、分泌量增加,而IL-2、IL-4细胞因子分泌水平提高,T淋巴细胞转化率、CD4+和CD8+T细胞数增加,其中以腹腔注射和肌肉注射组TPPPS的免疫调理作用最显著,而健康对照组饲喂TPPPS后试验鸡相关免疫指标水平提高.本研究结果表明,TPPPS对健康雏鸡具有一定的免疫增强作用,口服TPPPS对不同水平传播途径感染ALV-J引起的免疫抑制具有免疫调理作用,TPPPS可以作为免疫增强剂用于防控ALV-J的早期水平感染,降低其免疫抑制程度,减少经济损失.

摘要： 为了探讨泰山马尾松花粉多糖(TPPPS)对J亚群禽白血病病毒(ALV-J)不同接种途径诱导1日龄SPF雏鸡免疫抑制的免疫调理作用,本研究分别经口服、点眼、腹腔注射、肌肉注射模拟水平传播感染ALV-J,同时连续10d口服给予TPPPS,分别对各组试验鸡体重及免疫器官指数、带毒、排毒及抗体、相关免疫学指标进行检测比较.结果显示,饲喂多糖组与接毒组相比,试验鸡体重及免疫器官指数抑制程度得到改善,血液带毒及泄殖腔排毒量降低,抗体分泌提前、分泌量增加,而IL-2、IL-4细胞因子分泌水平提高,T淋巴细胞转化率、CD4+和CD8+T细胞数增加,其中以腹腔注射和肌肉注射组TPPPS的免疫调理作用最显著,而健康对照组饲喂TPPPS后试验鸡相关免疫指标水平提高.本研究结果表明,TPPPS对健康雏鸡具有一定的免疫增强作用,口服TPPPS对不同水平传播途径感染ALV-J引起的免疫抑制具有免疫调理作用,TPPPS可以作为免疫增强剂用于防控ALV-J的早期水平感染,降低其免疫抑制程度,减少经济损失.

摘要： 目的:探讨主要外源性禽白血病病毒在宿主细胞中体外复制及ALV-J在鸡体内致瘤与ERK/AP1信号转导通路的关系.rn 方法:通过蛋白组学方法分析ALV-J毒株HN06感染DF-1细胞60h后宿主蛋白的变化.将外源性禽白血病病毒感染DF-1细胞后,检测细胞ERK、c-Jun蛋白磷酸化水平、不同亚群禽白血病病毒LTR启动子活性、ALV-J病毒RNA及病毒蛋白表达水平.通过免疫组化检测由ALV-J引起的肿瘤组织细胞内ERK活化水平.rn 结果:蛋白组学分析结果表明ALV-J感染DF-1后显著上调了MAPK信号转导通路中的ERK蛋白。ALV-J毒株CHN06在早期阶段和晚期阶段感染均可引起ERK2活化，病毒引起DF-1细胞内ERK2磷酸化具有病毒滴度依赖性。ALV-A毒株GD13-1，ALV-B毒株CD08，ALV-J毒株NX0101及临床上通过病毒分离获得的两株ALV-J野毒株均可引起ERK转导通路的活化。外源性禽白血病病毒引起ERK2的磷酸化能被特异性的抑制剂PD98059或U0126所抑制。此外，我们发现当ERK2活化的同时，外源性禽白血病毒也诱导了AP-1家族的成员c-Jun发生了磷酸化，且单独的病毒gp85或gag蛋白能引起ERK2/AP1的活化。PD98059抑制剂显著性地降低了不同亚群禽白血病病毒的LTR启动子活性及受染细胞中ALV-J RNA水平、囊膜蛋白水平和细胞培养物上清中的病毒粒子含量。体外免疫组化实验发现ALV-J感染鸡的肿瘤组织其磷酸化ERK2蛋白过量表达。rn 结论:外源性禽白血病毒可引起ERK/AP1信号转导通路的活化，且这一活化与病毒gp85和gag蛋白有关。ERK/MAPK信号转导通路对ALV-J感染复制及诱发髓细胞瘤很可能具有重要的作用。

摘要： 本发明公开一种一步法快速检测禽网状内皮组织增生病病毒REV和J亚群禽白血病病毒ALV-J的试纸条，包括不吸水的支撑层、附着在支撑层上的吸附层，吸附层由样品吸附纤维层、金标抗体纤维层、纤维素膜层及吸水层依次拼接而成；纤维素膜层上标记有抗羊IgG或抗小鼠IgG的对照印迹，以及含有抗REV和抗ALV-J的抗体检测印迹；所述抗REV和抗ALV-J的抗体为抗REV和抗ALV-J的单克隆抗体或多克隆抗体；金标抗体纤维层上附着有与检测印迹对应的以胶体金标记的抗REV和抗ALV-J的混合多克隆抗体或单克隆抗体。该试纸条检测的特异性强、敏感性高，操作简便，检测快速，结果直观，适用于REV和ALV-J病毒的现场快速联合检测，亦可用于两种病毒的单独感染或混合感染的鉴别诊断。该试纸条使用范围广，便于推广应用。

摘要： 本发明公开了一种表达J亚群禽白血病病毒(ALV‑J)Gag和Env基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株及其构建方法和应用，属于医学或兽医学技术领域。本发明利用重组克隆技术，将包含ALV‑J Gag和Env基因以及CAG启动子序列的基因片段CAG‑ALVGE插入到鸡马立克氏病病毒弱毒疫苗814株的US2基因内部，构建获得在US2基因内部插入CAG‑ALVGE表达框的重组粘粒，由其拯救获得表达ALV‑J Gag和Env基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株。研究表明，本发明获得的疫苗株具有与亲本毒814疫苗株同等的体外复制能力以及良好的遗传稳定性，并且能够同时抵抗MDV超强毒株以及ALV‑J超强毒株的攻击。由此可见，本发明获得的表达ALV‑J Gag和Env基因的重组MDV疫苗株可以用于制备预防或治疗禽白血病和鸡马立克氏病的药物。

摘要： 本发明公开一种一步法快速检测马立克氏病病毒MDV和J亚群禽白血病病毒ALV-J的试纸条，包括不吸水的支撑层、附着在支撑层上的吸附层，吸附层由样品吸附纤维层、金标抗体纤维层、纤维素膜层及吸水层依次拼接而成；纤维素膜层上标记有抗羊IgG或抗小鼠IgG的对照印迹，以及含有抗MDV和抗ALV-J的抗体检测印迹；所述抗MDV和抗ALV-J的抗体为抗MDV和抗ALV-J的单克隆抗体或多克隆抗体；金标抗体纤维层上附着有与检测印迹对应的以胶体金标记的抗MDV和抗ALV-J的混合多克隆抗体或单克隆抗体。该试纸条检测的特异性强、敏感性高，操作简便，检测快速，结果直观，适用于MDV和ALV-J病毒的现场快速联合检测，亦可用于两种病毒的单独感染或混合感染的鉴别诊断。该试纸条使用范围广，便于推广应用。

摘要： 本发明涉及动物病毒学、免疫学、表观遗传学和新型免疫增强剂开发领域，提供了一种抗J亚群禽白血病病毒增殖的内源性反转录病毒RNA及其制备方法和应用。该RNA来源于鸡1号染色体基因组中内源性反转录病毒ALVE1衍生的反义长链非编码RNA，采用RACE和PCR克隆技术鉴定后，将其命名为lnc‑ALVE1‑AS1，其cDNA具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。本发明通过构建lnc‑ALVE1‑AS1过表达载体质粒，体外实验显示lnc‑ALVE1‑AS1可激活细胞抗病毒干扰素应答反应并抑制J亚群禽白血病病毒增殖。本研究发明不仅提供了抵抗禽白血病病毒的新手段，也为禽白血病病毒的防控提供了新思路。

摘要： 本发明公开一种一步法快速检测禽网状内皮组织增生病病毒REV和J亚群禽白血病病毒ALV-J的试纸条，包括不吸水的支撑层、附着在支撑层上的吸附层，吸附层由样品吸附纤维层、金标抗体纤维层、纤维素膜层及吸水层依次拼接而成；纤维素膜层上标记有抗羊IgG或抗小鼠IgG的对照印迹，以及含有抗REV和抗ALV-J的抗体检测印迹；所述抗REV和抗ALV-J的抗体为抗REV和抗ALV-J的单克隆抗体或多克隆抗体；金标抗体纤维层上附着有与检测印迹对应的以胶体金标记的抗REV和抗ALV-J的混合多克隆抗体或单克隆抗体。该试纸条检测的特异性强、敏感性高，操作简便，检测快速，结果直观，适用于REV和ALV-J病毒的现场快速联合检测，亦可用于两种病毒的单独感染或混合感染的鉴别诊断。该试纸条使用范围广，便于推广应用。

摘要： 本发明公开了二重荧光LAMP区分马立克氏病病毒和J亚群禽白血病病毒检测引物组，包括引物1至引物14，它们分别具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.14的碱基序列，其中引物7与引物1互补的探针、引物14为与引物8互补的探针，它们使扩增反应具有很高的特异性，能分别与MDV meq基因和ALV‑J gp85基因结合，反应后在不同波长的荧光下发出不同颜色的荧光，从而实现快速敏感特异的鉴别MDV和ALV‑J。据此，还研制了相应试剂盒并建立相应LAMP方法。总之，本发明具有特异性强、灵敏度高、快速简便的特点，适合在基层兽医站和具备基本实验仪器的养殖场中快速检测，具有较好的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种表达J亚群禽白血病病毒(ALV-J)Gag和Env基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株及其构建方法和应用，属于医学或兽医学技术领域。本发明利用重组克隆技术，将包含ALV-J Gag和Env基因以及CAG启动子序列的基因片段CAG-ALVGE插入到鸡马立克氏病病毒弱毒疫苗814株的US2基因内部，构建获得在US2基因内部插入CAG-ALVGE表达框的重组粘粒，由其拯救获得表达ALV-J Gag和Env基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株。研究表明，本发明获得的疫苗株具有与亲本毒814疫苗株同等的体外复制能力以及良好的遗传稳定性，并且能够同时抵抗MDV超强毒株以及ALV-J超强毒株的攻击。由此可见，本发明获得的表达ALV-J Gag和Env基因的重组MDV疫苗株可以用于制备预防或治疗禽白血病和鸡马立克氏病的药物。

摘要： 本发明公开一种一步法快速检测马立克氏病病毒MDV和J亚群禽白血病病毒ALV-J的试纸条，包括不吸水的支撑层、附着在支撑层上的吸附层，吸附层由样品吸附纤维层、金标抗体纤维层、纤维素膜层及吸水层依次拼接而成；纤维素膜层上标记有抗羊IgG或抗小鼠IgG的对照印迹，以及含有抗MDV和抗ALV-J的抗体检测印迹；所述抗MDV和抗ALV-J的抗体为抗MDV和抗ALV-J的单克隆抗体或多克隆抗体；金标抗体纤维层上附着有与检测印迹对应的以胶体金标记的抗MDV和抗ALV-J的混合多克隆抗体或单克隆抗体。该试纸条检测的特异性强、敏感性高，操作简便，检测快速，结果直观，适用于MDV和ALV-J病毒的现场快速联合检测，亦可用于两种病毒的单独感染或混合感染的鉴别诊断。该试纸条使用范围广，便于推广应用。

摘要： 本发明公开了二重荧光LAMP区分网状内皮增生症病毒和J亚群禽白血病病毒检测引物组，包括引物1至引物14，它们分别具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.14的碱基序列，其中引物7为与引物1互补的探针、引物14为与引物8互补的探针，它们使扩增反应具有很高特异性，能分别与REV gp90基因和ALV‑J gp85基因结合，反应后在不同波长荧光下发出不同颜色荧光，从而实现快速敏感特异地鉴别REV和ALV‑J。据此，还研制了相应试剂盒并建立相应LAMP方法。总之，本发明特异性强、灵敏度高、快速简的特点，适合在基层兽医站和具备基本实验仪器的养殖场中进行快速检测，具有较好的应用前景。

摘要： 本发明涉及动物病毒学、免疫学、表观遗传学和新型免疫增强剂开发领域，提供了一种抗J亚群禽白血病病毒增殖的内源性反转录病毒RNA及其制备方法和应用。该RNA来源于鸡1号染色体基因组中内源性反转录病毒ALVE1衍生的反义长链非编码RNA，采用RACE和PCR克隆技术鉴定后，将其命名为lnc‑ALVE1‑AS1，其cDNA具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。本发明通过构建lnc‑ALVE1‑AS1过表达载体质粒，体外实验显示lnc‑ALVE1‑AS1可激活细胞抗病毒干扰素应答反应并抑制J亚群禽白血病病毒增殖。本研究发明不仅提供了抵抗禽白血病病毒的新手段，也为禽白血病病毒的防控提供了新思路。