凝固酶

摘要： 目的:探讨在真菌性阴道炎患者中应用联合检测法,并以pH、凝固酶、葡萄糖苷酶、乙酰氨基葡糖苷酶以及0.9%的氯化钠溶液作为诊断参考指标的临床意义。方法:选取2020年8月至2021年5月本院妇产科收治的86例患者,依据检测方法分为观察组和对照组,每组各为43例。对照组如采用常规镜检方法,观察组在对照组基础上进行联合检测,以pH、凝固酶、葡萄糖苷酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶和0.9%的氯化钠溶液作为诊断参考指标,并比较两组的阴道清洁程度、真菌性阴道炎的检出率。结果:观察组的孢子、菌丝、总阳性率高于对照组,存在显著差异,具有统计学意义(P0.05),但观察组的白细胞检出率高于对照组,存在显著差异,具有统计学意义(P<0.05)。结论:联合检测方法可以提高真菌性阴道炎的检出率,可以作为临床应用的检测方法。

摘要： 目的:分析万古霉素治疗新生儿凝固酶阴性葡萄球菌感染的疗效.方法:选取本院2019年2月-2020年3月收治的46例凝固酶阴性葡萄球菌感染患儿为研究对象,用随机数表法将患儿分对照组和研究组,每组各23例,给予对照组患儿采用青霉素类药物治疗,研究组患儿则在青霉素类药物治疗基础上加上万古霉素治疗,比较临床相关指标水平、肾毒性.结果:两组患儿的尿常规、肌酐、尿素氮异常发生率无明显差异,比较差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,研究组的尿蛋白、尿NAG、尿α1-微量蛋白水平更低(P<0.05).结论:万古霉素可有效控制新生儿凝固酶阴性葡萄球菌感染情况,且对患儿肾毒性较小.

摘要： 目的 体外表达金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)凝固酶Coa,评价其生物学活性.方法 根据GenBank中金黄色葡萄球菌凝固酶coa基因序列设计特异性引物,采用PCR方法从S.aureus USA300 CA-MRSA 923株基因组中扩增coa基因片段,将其克隆至pET-24b(+)表达载体,构建重组表达质粒pET-24b-coa;将经双酶切及测序鉴定正确的重组质粒转化感受态细胞E.coli BL21 (DE3)中进行IPTG诱导表达;通过SDS-PAGE和Western blot对表达的重组Coa(rCoa)进行鉴定,测定rCoa对人血液和兔血浆的凝固活性;最后用纯化的重组蛋白rCoa免疫BALB/c小鼠,经间接ELISA和Western blot分析其免疫原性.结果 构建的重组质粒pET-24b-coa在E.coli BL21 (DE3)中以包涵体形式表达rCoa,分子量约74.8 ku,与预期蛋白大小相符;rCoa在体外具有凝固人全血和兔血浆活性,能刺激小鼠产生高效价的抗Coa特异性抗体.结论 成功地获得了具有良好凝固酶活性和抗原性的金黄色葡萄球菌凝固酶重组蛋白rCoa,为进一步深入研究S.aureus凝固酶Coa的功能及以Coa为靶点的抗金黄色葡萄球菌抑制剂和疫苗的研制奠定基础.

摘要： 目的:探讨血培养双侧双瓶送检对病原菌和污染菌判断的应用价值.方法:对该院2019年1—12月的1000份血培养标本进行回顾性分析,了解其病原菌分布,对部分患者开展双侧双瓶采血检测,以血培养中最常见的污染菌凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)为例,评价该方法对血培养污染菌判定的价值.结果:1000份血培养病例中,奠定病原菌共109株,检出率是12.23％.21份的最终检查结果是病原菌,而接受双侧双瓶血液样本采集的样本共90份,因此检出率是30.43％,明显高于单瓶血培养样本.阳性血培养内,凝固酶阴性葡萄球菌检出率为22.7％,而单瓶报警检出率为18.1％,相对于双瓶报警方式而言明显较高.结论:血培养检出病原菌种类仍以大肠埃希菌为最高,同往年相似.开展采用双侧双瓶采血方法对判定CNS,是否为污染菌有一定作用,可提示临床结合患者具体情况综合判断,减少不合理用药.

摘要： 目的 分离鉴定鸡排中一株凝固酶异常的金黄色葡萄球菌.方法 采用国标法检测金黄色葡萄球菌,血浆凝固酶试验时间延长至24 h,同时用生化鉴定法和BAX System Q7快速检测法进行互相验证.结果 国标法凝固酶试验6h不凝同,12h出现部分凝固,24 h完全凝同,生化鉴定法和BAX System Q7快速检测法结果都是检出金黄色葡萄球菌.结论 在食品中金黄色葡萄球菌检验过程中,对于凝固酶试验异常的情况,应延长试验时间并用其他方法加以验证.

摘要： 目的 当苯唑西林最小抑菌浓度(MIC)介于0.5～2.0 mg/L,探讨凝固酶阴性非表皮葡萄球菌是否是甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌需做mecA基因检测. 方法 采用头孢西丁纸片扩散法、浓度梯度扩散法(E-test)、最新一代全自动细菌鉴定仪器(Compact VITEK-2)及PCR扩增检测分析mecA基因. 结果 从4 032例患者中筛选到300株凝固酶阴性葡萄球菌(7.4％),CompactVITEK-2鉴定300株凝固酶阴性葡萄球菌中有腐生葡萄球菌45株和溶血葡萄球菌80株,腐生葡萄球菌mecA基因阳性率与溶血葡萄球菌mecA基因阳性率之间差异有统计学意义(P＜0.05);头孢西丁(抑菌环直径≥25 mm)、E-test(MIC介于0.5～2.0 mg/L)及Compact VITEK-2(MIC介于0.5～2.0 mg/L)结果显示凝固酶阴性非表皮葡萄球菌共81株;PCR结果发现mecA基因阳性的菌株有10株. 结论 当苯唑西林MIC介于0.5～2.0 mg/L的凝固酶阴性非表皮葡萄球菌,临床微生物实验室应严格执行美国临床实验室标准化研究所(CLSI)指南,一定要做mecA基因检测,若mecA基因检测结果阴性则报告为MSCNS,反之则报告为MRCNS.%Objective To determine whether coagulase-negative non-epidermal staphylococcus is methicillin-resistant coagulase-negative staphylococcus by mecA gene test,when the minimal inhibitory concentration(MIC)of oxacillin is between 0.5-2.0 mg/L.Methods The mecA gene was detected and analyzed by the cefoxitin disk diffusion,E-test,VITEK-2 Compact and polymerase chain reaction (PCR)purification.Results A total of 300 strains of coagulase-negative staphylococci were screened from 4032 patients(7.4％),of which 45 strains of Staphylococcus saprophyticus and 80 strains of Staphylococcus hemolyticus were identified by Compact VITEK-2.There was a statistically significant difference in the positive rate of mecA gene detection between Staphylococcus saprophyticus and Staphylococcus hemolyticus(P ＜0.05).The results of detection of cefoxitin disk diffusion(inhibitory zone diameter ≥ 25 mm),E-test(MIC of oxacillin between 0.5-2.0 mg/L)and Compact VITEK-2 (MIC of oxacillin between 0.5-2.0 mg/L)showed that there were 81 strains of coagulase-negative non-Staphylococci,of which 10 strains with positive mecA gene were confirmed by PCR.Conclusions When the minimal inhibitory concentration (MIC)of oxacillin against coagulase-negative non-Staphylococci stains is between 0.5-2.0 mg/L,the guidelines of the American clinical laboratory standardization institute(CLSI)should be strictly implemented in clinical microbiology laboratory and the mecA gene must be tested.Based on the wide dissemination of the mecA gene in Staphylococcus aureus population,if the mecA gene test is negative,it is reported as methicillin-susceptible coagulase-negative Staphylococcus(MSCNS),and the reverse result is reported as methicillin-resistant coagulase-negative staphylococcus(MRCNS).

摘要： 目的:研究大蒜素在体外对金黄色葡萄球菌的增殖以及毒力因子的分泌是否存在抑制作用。方法:将大蒜素稀释至不同浓度后,分别作用于处于生长对数前期的金黄色葡萄球菌,采用试管法测定大蒜素对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);采用生长曲线测定法分析大蒜素对金黄色葡萄球菌的生长抑制作用;采用凝固酶,a-溶血素实验测定大蒜素对金黄色葡萄球菌毒力因子分泌的影响,采用测序技术以及Blast比对的方法测定大蒜素作用下a-溶血素基因的变化。结果:大蒜素对金黄色葡萄球的MIC为15.625 μg/mL,MBC为62.5 μg/mL;大蒜素可以抑制金黄色葡萄球菌的生长,并呈浓度依赖性;凝固酶的效价和a-溶血素的活性明显降低(P < 0.01);a-溶血素的DNA序列无明显改变。结论:大蒜素对金黄色葡萄球菌的增殖和毒力因子分泌具有明显的抑制作用。

摘要： 本文结合我国动物源金黄色葡萄球菌的耐药性现状，进行凝固酶血清分型及基因分析研究，掌握了我国动物源金黄色葡萄球菌流行趋势，对进一步开展金黄色葡萄球菌流行病学及其演变趋势方面的调查研究具有重要意义。

摘要： 目的：通过回顾本院的血培养病原菌检出情况以及污染菌的判定分析,了解该院血流感染的主要病原菌构成比并对是否是污染菌进行分析.rn 方法：采用法国梅里埃BAcT/ALERT3D血培养仪进行培养,法国梅里埃ATB半自动微生物鉴定仪进行菌种鉴定,上海复兴佰珞药敏板进行药敏实验.并对该院2012年1月至2013年12月841份血培养阳性标本进行回顾性分析,了解其病原菌分布,,以血培养中最常见的污染菌凝固酶阴性葡萄球菌(CNS),阳性棒状杆菌以及草绿色溶血性链球菌为例,评价是否是血培养污染菌.rn 结果：从7072例血培养标本中共分离出841株细菌和真菌.血培养阳性检出率为11.9％,主要检出菌种为大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌,分别占24.4％和7.3％.主要革兰阳性菌267株(31.7％),其中凝固酶阴性的葡萄球菌(CNS)为206株,占24.5％.金黄色葡萄球菌61株,占7.3％.主要革兰阴性菌83株(48.8％),以肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌多见,总共261株,占31.0％.真菌51株(6.1％).调查分析结果提示临床CNS可能为污染菌的比率为75.7％,棒状杆菌污染的比率为66.7％,草绿色溶血性链球菌污染的比率为12.5％.rn 结论：在本院7072份血液培养中,有841份为阳性结果,分离出841株病原菌,阳性率为11.9％,高于传统手工培养法,与最近国内大多数报道相符.血行感染中,一直以来均以大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌是我国主要致病菌,在本研究中841株病原菌,大肠埃希菌为204株,占24.4％,金黄色葡萄球菌为61株,占73％,说明在本院的血液感染病原菌中,这两种菌仍然占主要部分.从本实验来看,为凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)有75.7％的可能是污染菌,然而,原来认为是污染菌的CNS,如今被证实为很多导管相关性和人造血管所引起的菌血症中的病原菌,以前曾认为凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)为污染菌,支持这一观点是因为CNS的致病性弱,但是现代的细菌学观点是CNS具有细菌黏质等致病因子,具有一定的致病力,是医院感染的重要细菌,尤其是免疫功能不全是葡萄球菌感染的重要易感因素,所以本实验中通过调查分析,认为有10.7％的CNS仍然有致病作用,而且主要是一些导管相关性感染的病原体.有研究认为在阳性杆菌中,棒状杆菌属、除炭疽芽胞杆菌外的芽孢杆菌属和痤疮丙酸杆菌很少会是病原菌.本研究中,也只有4.4％的阳性菌是致病的病原菌,66.7％的阳性菌被证实是污染的,还有28.9％的阳性菌不能被判断.此外,国内某家医院的调查称在其实验室中绿色溶血链球菌的污染几率很小,仅为8％,而在Richter等人的报道中该菌的污染几率为42.5％.因此,不能仅通过鉴定细菌的结果就判定其是否为污染菌.本院草绿色溶血性链球菌的感染的确定率是12.5％,与国内的研究相似.虽然各种临床研究提供了一些如何区分病原菌与污染菌的方法,但是目前还没有一个真正的"金标准"来区分病原菌和污染菌.对污染菌的判定,须结合实验室病原菌的检测结果和临床患者具体情况综合判断,减少不合理用药.

摘要： 本发明涉及一种利用接种凝固芽孢杆菌菌株的液体种菌培养液的增大发酵效率的谷物发酵酶粉末d的制造方法以及以通过所述方法制造的谷物发酵酶粉末。通过本发明可提供均衡吸收促进谷物发酵并补充有益成分的种菌用基底米糠，麦糠，酵母提取物，大豆粉末，大豆分离蛋白粉末中含有的各种必须营养成分以及凝固芽孢杆菌发酵时生成的发酵产物及消化酶等各种生理活性成分的谷物发酵酶，并且通过凝固芽孢杆菌发酵谷物以及其副产物，补充多样化的药性成分以及生理活性物质。而且肠道内的有益菌活性化肠道功能，发酵时生成的高浓度淀粉酶以及蛋白酶等成分有效帮助吸收谷物以及食物中含有的营养成分，并且纤维蛋白分解酶有效溶解血栓帮助血液循环。

摘要： 本发明提供一种能促进羊乳凝固的辣木籽蛋白酶及其制备的多肽和应用，该蛋白酶酶切κ‑酪蛋白的酶切位点为Gln 113‑Asp 114，能使羊乳凝固，具有高凝乳活力，更重要的是，辣木籽蛋白酶酶切κ‑酪蛋白得到4条具有较好抗氧化活性的蛋白肽，将本发明的辣木籽蛋白酶作为凝乳剂用于乳饼、奶酪、酸奶的凝乳加工，得到的产品中富含抗氧化肽，与现有技术相比，能增强羊乳及其产品的功能活性。

摘要： 本发明提供一种降低血纤维蛋白原活性的凝血酶衍生物及其制造方法，以及降低血纤维蛋白原活性的去水凝血酶衍生物及其制造方法。还提供凝血酶的羧基被修饰了的凝血酶衍生物。由于该凝血酶衍生物对于血纤维蛋白原的亲和性下降，所以作为血小板凝聚诱导组合物、进而临床检查用等的特异凝固反应试剂而利用。另外，将去水凝血酶作为配位体，通过与羧基结合的亲和色谱，可以高选择地精制血液凝固第VIII因子，另外修饰了羧基的去水凝血酶衍生物与以往的去水凝血酶比较少量就可以产生充分的抗血栓效果，所以可以利用在血栓形成抑制剂。

摘要： 本发明涉及血栓弹力图仪质控品技术领域，具体涉及一种基于纳米酶凝固法的多水平凝血纳米质控品及其制备方法。一种基于纳米酶凝固法的多水平凝血纳米质控品，包括质控品本体和凝固辅助成分，所述质控品本体包括凝固成分、稳定剂和纳米酶。本技术方案使用纳米酶调节冻干体系，解决了现有技术的质控品在室温条件下储存运输稳定性不佳的技术问题。本方案的产品具有可室温储存和运输、产品维护成本低、稳定性表现良好等优点。

摘要： 本发明涉及一种生物酶凝固剂及用其制备即食玉米豆腐的方法。属于玉米食品深加工技术领域。所述生物酶凝固剂为转谷氨酰胺酶和柠檬酸。本发明技术的特点是以玉米为原料，将其烘干并破碎后，添加料水比为1∶4.0(g/mL)的蒸馏水，再加入0.2％转谷氨酰胺酶和0.6％柠檬酸为凝固剂，搅拌使其分散均匀后，在55°C恒温水浴中加热酶解15min。将酶解后的分散液用料理机打成匀浆，用纱布过滤，除去滤渣。将过滤后的浆液放入81°C恒温水浴中熬煮并不断搅拌，至浆液成糊片状后，停止搅拌，静置25min，取出趁热倒入模具中，冷却至室温，放入冰箱4°C条件下凝固12h，得即食玉米豆腐产品。玉米豆腐出品率为363.0％，保水率为96.78％。产品色泽金黄、清香Q弹、软嫩细滑、入口绵软，富含膳食纤维和维生素E，高蛋白而低脂，长期食用具有降血脂、降胆固醇、促消化等功效。可直接食用，技术方法简易可控。

摘要： 本发明提供一种能促进羊乳凝固的辣木籽蛋白酶及其制备的多肽和应用，该蛋白酶酶切κ‑酪蛋白的酶切位点为Gln 113‑Asp 114，能使羊乳凝固，具有高凝乳活力，更重要的是，辣木籽蛋白酶酶切κ‑酪蛋白得到4条具有较好抗氧化活性的蛋白肽，将本发明的辣木籽蛋白酶作为凝乳剂用于乳饼、奶酪、酸奶的凝乳加工，得到的产品中富含抗氧化肽，与现有技术相比，能增强羊乳及其产品的功能活性。

摘要： 本发明涉及一种利用接种凝固芽孢杆菌菌株的液体种菌培养液的增大发酵效率的谷物发酵酶粉末d的制造方法以及以通过所述方法制造的谷物发酵酶粉末。通过本发明可提供均衡吸收促进谷物发酵并补充有益成分的种菌用基底米糠，麦糠，酵母提取物，大豆粉末，大豆分离蛋白粉末中含有的各种必须营养成分以及凝固芽孢杆菌发酵时生成的发酵产物及消化酶等各种生理活性成分的谷物发酵酶，并且通过凝固芽孢杆菌发酵谷物以及其副产物，补充多样化的药性成分以及生理活性物质。而且肠道内的有益菌活性化肠道功能，发酵时生成的高浓度淀粉酶以及蛋白酶等成分有效帮助吸收谷物以及食物中含有的营养成分，并且纤维蛋白分解酶有效溶解血栓帮助血液循环。

摘要： 本实用新型公开了国产天然橡胶凝固用菠萝酶凝固剂保存装置，包括：保存箱、箱盖、密封垫、把手、转轴、旋转电机、搅拌叶、隔板、滤网；所述保存箱设置为顶部开口的空腔结构，保存箱顶部活动连接箱盖，箱盖侧壁上设置有密封垫，箱盖通过锁扣结构连接在保存箱上，箱盖上设置有把手；保存箱内设置有转轴，转轴与旋转电机连接，转轴连接均匀搅拌叶，搅拌叶设置为空腔结构，搅拌叶内设置有倾斜的隔板，搅拌叶内填充有干燥剂，搅拌叶侧壁上均匀开有网孔，搅拌叶的网孔处设置有滤网。便于菠萝酶凝固剂的保存。

摘要： 本发明涉及用于治疗或预防细菌感染、特别是由葡萄球菌细菌感染引起的感染的方法和组合物。本发明提供用于刺激细菌的免疫应答的方法和组合物。在一些实施方案中，方法和组合物涉及凝固酶结构域1‑2及其变体。

摘要： 本发明公开了一种牛源抗金黄色葡萄球菌毒力因子Coa凝固酶的单链抗体及其制备和用途，所述单链抗体包括轻链可变区VL、重链可变区VH、连接肽Linker，并按照VL‑Linker‑VH的顺序连接构成牛源单链抗体片段VL‑Linker‑VH。本发明具有明显抑制金黄色葡萄球菌Coa凝固酶的凝血作用，从而减弱金黄色葡萄球菌对牛乳腺的致病性。