减毒沙门氏菌

摘要： 对携带IL-2/NK4双基因减毒沙门氏菌TPIN的遗传稳定性进行研究.将TPIN连续传40代,取10代、20代、30代、40代菌落进行鉴定,包括菌落和菌体的形态、质粒的纯度和浓度、目的基因片段、双酶切结果及转染人肝癌细胞(HepG2)后目的基因体外表达活性.结果 表明,每10代的菌落和菌体形态一致,其所含质粒的纯度和浓度在传代过程中无明显变化,PCR扩增的目的基因条带大小一致,双酶切鉴定结果正确,转染HepG2细胞后,每代间所表达目的蛋白浓度无明显差异.TPIN作为消化道肿瘤的生物治疗药物,在遗传方面有较好的稳定性,可进一步进行大量生产.

摘要： 目的:初步评价携带角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)和低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1 α,HIF-1 c)双基因的减毒沙门氏菌(TPKH)的安全性,为其在临床上推广使用提供理论依据.方法:急性毒性试验中,观察不同剂量(1.0 ×108,1.0 ×109,1.0 ×1010 cfu)TPKH对小鼠精神状态、体重、血液学指标、血清生化指标及脏器指数的影响,同时取高剂量灌胃组的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及胃肠,制作病理组织切片,观察各脏器病理变化.异常毒性试验中,采用小鼠及豚鼠实验法,小鼠实验中,1.0 ×108 cfu TPKH灌胃,观察小鼠的反应及体重变化,共观察7 d;豚鼠实验中,1.0 ×109 cfu TPKH灌胃,观察豚鼠的反应及体重变化,共观察7 d.结果:急性毒性试验期间各组小鼠精神状态无异常,各组小鼠体重差异不显著(P ＞0.05),各组小鼠的脏器指数及生理生化指标差异不显著(P ＞0.05);病理切片结果显示,高剂量组的心脏、肝脏等均无病理性改变.异常毒性试验结果显示,观察期内小鼠及豚鼠均无异常反应,到期后每只小鼠及豚鼠的体重均增加.结论:初步证实了TPKH毒副作用小,安全性好.

摘要： 目的:观察质膜型唾液酸酶(human plasma membrane-associated sialidase,Neu3)对前列腺癌荷瘤小鼠恶病质的影响.方法:应用真核细胞转染技术,转染前列腺癌PC-3、LNCaP细胞.转染后,利用倒置显微镜观察细胞形态变化;利用MTT实验观察细胞增殖变化;划痕实验观察细胞迁移能力的变化.通过显微外科手术建立原位肿瘤模型,随机分为4组,Mock组、AS组、pGCsi-Scramble组及pGCsi-Neu3组,每组6只小鼠,利用减毒沙门氏菌作为运载体,监测Neu3对裸鼠进食量、体重等恶病质指标的影响;利用IL-6小鼠ELISA试剂盒检测小鼠血清IL-6.结果:PC-3细胞和LNCaP细胞转染pGCsi-Neu3质粒后细胞透光性下降,伪足减少,细胞增殖能力下降,迁移能力下降,与Mock组及pGCsi-Scramble组相比,有统计学意义(P<0.01).动态监测前列腺癌荷瘤小鼠体重和摄食量数据显示:Mock组、AS组和pGCsi-Scramble组,小鼠体重逐渐减轻,摄食量减小,试验结束时,与pGCsi-Neu3组相比体重、摄食量差异明显,有统计学意义(P<0.01).pGCsi-Neu3组小鼠血清IL-6水平明显低于Mock组、AS组和pGCsi-Scramble组,有统计学意义(P<0.01).结论:下调Neu3表达,在体内具有良好的延缓恶病质发生、发展作用,其可能机制是Neu3的表达水平下降抑制了前列腺癌PC-3、LNCaP细胞增殖和迁移,IL-6表达下降,食欲增加.Neu3可能成为治疗癌性恶病质新靶点.

摘要： 为探究表达鸭肠炎病毒(DEV) gB/NP28双基因重组减毒沙门菌口服疫苗在鸭体内诱导免疫应答能力,本研究将构建的重组菌(pcDNA3.1-DEV-gB/NP28)/SL7207、DVE弱毒疫苗、重组质粒pcDNA3.1-DEV-gB/NP28及PBS分别免疫雏鸭,通过间接免疫荧光法检测免疫鸭脾脏、胸腺、法氏囊、哈德氏腺组织中的抗原表达;双抗体夹心ELISA方法检测肠道黏膜sIgA;间接ELISA方法监测血清中DEV特异性抗体、外周血T淋巴细胞增殖及IFN-γ、IL-4细胞因子含量,对该口服疫苗进行免疫学评价.结果表明,重组菌能够诱导鸭产生良好的黏膜免疫、体液免疫和细胞免疫应答;攻毒试验显示,在DVE强毒攻击下重组菌免疫可提供75％以上的保护,表明重组菌免疫对DEV攻击具有一定的免疫保护作用.

摘要： 消化系肿瘤在我国是最常见的恶性肿瘤,随着现代生活节奏的加快,消化系肿瘤的发病率有增高趋势,年轻化的趋势也愈加明显.减毒沙门氏菌作为一个胞内寄生菌,本省具有抗肿瘤特性,同时可以作为肿瘤基因治疗的载体进行抗肿瘤治疗.本文就减毒沙门氏菌及作为治疗载体在肝癌、胃癌、大肠癌的体内外应用进展进行综述.

摘要： 目的 研究TGEV S基因疫苗SL7207 (PVAXD-TS)口服免疫仔猪后的动态免疫诱导规律.方法 将口服疫苗SL7207(PVAXD-TS)、空载体菌株SL7207(PVAXD)以1.6×10nCFU/头的剂量口服接种20日龄仔猪,以PBS为空白对照,2周后以2.0×10n CFU的剂量加强免疫.分别测定0、2、4、6和8周的血清IgG、IgA、TGEV中和抗体、细胞免疫反应IL-4、IFN-γ、外周血淋巴细胞增殖情况.结果 仔猪口服免疫后第4周即可检测抗TGEV的特异性IgG和粪黏液IgA抗体;在免疫后第6周IgA、IgG、IL-4、IFN-γ抗体和外周血T淋巴细胞增殖与SL7207 (PVAXD)、PBS间均存在统计学差异(P＜0.01),并在第6周达到最高值;中和实验显示该疫苗诱导的血清IgG具有中和活性.结论 证实以减毒沙门菌为载体的TGEV S基因疫苗口服免疫仔猪有较好的免疫原性.

摘要： 为探讨携带FMDV DNA疫苗重组沙门氏菌口服免疫可行性,PCR扩增O型FMDV主要抗原基因VP1,并连接到真核表达载体pIRES,将构建的质粒pIRES-VP1体外转染BHK-21细胞,间接免疫荧光检测VP1基因的表达.通过氯化钙转化法将重组质粒pIRES-VP1转入减毒鼠伤寒沙门氏菌2266,构建2266 (pIRES-VP1)重组菌,并以108、109、1010CFU的剂量口服免疫小鼠,2周后以相同剂量加强免疫,以研究重组菌在小鼠体内的稳定性及安全性,并通过将重组菌进行体外传代,研究重组质粒在体外的稳定性.研究结果表明:108、109CFU剂量免疫小鼠成活率为100％,1010CFU剂量口服小鼠出现扎堆现象,且行动迟缓.重组菌体外连传8代以及免疫小鼠后从脾脏和肝脏分离鉴定表明,重组菌2266 (pIRES-VP1)在体内和体外均具有较好的安全性和稳定性.

摘要： 目的：探讨纯化的变形链球菌唾液结合区段（ SBR）颌下腺注射和减毒沙门氏菌（ SL）灌胃免疫对小鼠涎腺黏膜相关上皮因子CCL28 mRNA表达的影响。方法将120只BALB／C小鼠随机分为SBR组及SL组各60只。SBR组行SBR融合蛋白颌下腺注射免疫，SL组行SL灌胃免疫。免疫48 h、1周、2周时采用ELISA法检测SBR组唾液中SBR特异性抗体（ SBR-IgA）水平；RT-PCR法检测两组颌下腺组织CCL28 mRNA相对表达量。用另选5例BALB／C正常小鼠作为对照组。结果 SBR组免疫48 h及1周、2周时唾液中SBR-IgA水平均明显高于对照组，P均＜0．05；SBR组和SL组颌下腺组织CCL28 mRNA相对表达量均高于对照组（P均＜0．05）。结论 SBR融合蛋白经颌下腺接种可诱导小鼠明显的抗体应答；经颌下腺和经胃接种疫苗后涎腺CCL28的表达明显增高。

摘要： Attenuated Salmonella can induce mucosal, humoral and cellular immune responses. Salmonella can present antigen, stimulate specific humoral and cellular immune response against both Salmonella and heterologous antigen. So that Salmonella is considered as prospective vaccine vector. In this review, the strategy for constructions of attenuated Salmonella vector is described, including the attenuated Salmonella strains, high level expression of heterologous antigen, etc. At the end, it is prospected about the problems to be solved during the application of attenuated Salmonella vector.%减毒沙门氏菌能诱导粘膜、体液及细胞免疫，不仅其自身能够产生免疫效应，而且还能携带外源基因诱导宿主特异性应答，是具有广泛应用前景的疫苗载体。本文从减毒致弱菌株构建、外源基因高效表达等方面综述了减毒沙门氏菌载体构建策略的新进展，进而对减毒沙门氏菌活载体应用中待解决的科学问题进行了归纳。

摘要： 以小鼠为动物模型研究了重组减毒沙门氏菌疫苗SL7207(pVAXD-N-Sa)的口服免疫规律.将菌株SL7207(pVAXD-N-Sa)及对照组SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N)、SL7207(pVAXD)以1×109 cfu/只灌胃免疫小鼠,测定免疫小鼠诱导的血清IgG及肠道粘膜IgA抗体动态水平,同时测定免疫小鼠的外周血及脾脏淋巴细胞增殖水平、干扰素(IFN-γ)和细胞因子IL-4水平.结果表明,SL7207(pVAXD-N-Sa)口服免疫可诱导小鼠分别产生特异性的抗TGEV S、N两种蛋白的血清IgG及肠道黏膜IgA.在整个免疫过程中,SL7207(pVAXD-N-Sa)产生的抗体水平(包括血清IgG及肠道黏膜IgA)与SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N)无显著差异,均在免疫后第6周诱导产生的抗体滴度达到最高峰.免疫后第6周,SL7207(pVAXD-N-Sa)刺激脾淋巴细胞的增殖作用优于SL7207(pVAX-S)、SL7207 (pVAX-N).在免疫后第6周,SL7207(pVAXD-N-Sa)刺激产生的IFN-γ水平高于SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N),但无显著差异(p＞0.05).在整个免疫过程中,诱导产生的IL-4水平不明显,免疫组与对照组无显著差异(p＞0.05).研究结果显示SL7207(pVAXD-N-Sa)具有良好的口服免疫原性,并同时具有S和N双基因的免疫功能,本研究为进一步开展猪体的免疫评价奠定了基础.

摘要： 本研究对重组减毒沙门氏茵疫苗SL7207(pVAX-N)在小鼠模型上的口服免疫规律进行研究.将pVAX-N电转化减毒沙门氏茵SL7207,筛选获得重组菌株SL7207(pVAX-N),然后将菌株SL7207(pVAX-N)及对照组SL7207(pVAXl)、PBS以l×109CFU/只灌胃免疫小鼠,测定免疫小鼠诱导的血清IgG及肠道粘膜IgA抗体动态水平,同时测定免疫小鼠的外周血及脾脏淋巴细胞增殖水平、干扰素(IFN-γ)和细胞因子IL-4水平.在整个免疫过程中,IL-4水平无明显周期变化,并且免疫组与对照组无显著差异(P＞0.05).SL7207(pVAX-N)能够诱导机体产生特异性的体液免疫、细胞免疫及黏膜免疫,为TGEV的防治提供了一个新的研究方向.研究以小鼠为模型研究阐明了重组减毒沙门氏菌疫苗SL7207(pVAX一N)的口服免疫诱导规律,为科学评价TGEV基因疫苗在本种动物猪上的相关研究提供了依据.

摘要： 本研究以RT-PCR扩增猪流行性腹泻病毒SC-L株的S基因抗原区域(简称S1,1-2367bp,编码S蛋白N末端1-789氨基酸位点),插入pMD19-T载体,酶切并回收目的片段插入双启动子真核表达载体pVAXD中,构建了pVAXD-S1表达载体。经免疫荧光法鉴定目的基因可在COS7细胞中正常表达后,将pVAXD-S1电转入鼠伤寒减毒沙门氏菌SL7207,构建了携带S基因的重组减毒沙门氏菌SL7207(pVAXD-S1),对该重组菌株的生长特性、携带质粒的稳定性、口服小鼠的安全性及目的基因在体内表达等进行鉴定。结果表明SL7207(pVAXD-S1)在含卡那霉素(100μg/mL)的培养环境中稳定,在1×109CFU/只口服免疫小鼠具有良好的安全性,携带的S1基因能在小鼠组织(回肠末端)内正常转录及表达。本研究为后续开展减毒沙门氏菌疫苗菌株SL7207(pVAXD-S1)的免疫评价及应用奠定了基础。

摘要： 以小鼠为动物模型研究了重组减毒沙门氏菌疫苗SL7207(pVAXD-N-Sa)的口服免疫规律。将菌株SL7207(pVAXD-N-Sa)及对照组SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N)、SL7207(pVAXD)以1×109CFU/只灌胃免疫小鼠,测定免疫小鼠诱导的血清IgG及肠道粘膜IgA抗体动态水平,同时测定免疫小鼠的外周血及脾脏淋巴细胞增殖水平、干扰素(IFN-γ)和细胞因子IL-4水平。结果表明,SL7207(pVAXD-N-Sa)口服免疫可诱导小鼠分别产生特异性的抗TGEV S、N两种蛋白的血清IgG及肠道黏膜IgA.在整个免疫过程中,SL7207(pVAXD-N-Sa)产生的抗体水平(包括血清IgG及肠道黏膜IgA)与SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N)无显著差异,均在免疫后第6w诱导产生的抗体滴度达到最高峰。免疫后第6w,SL7207(pVAXD-N-Sa)刺激脾淋巴细胞的增殖作用优于SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N).在免疫后第6w,SL7207(pVAXD-N-Sa)刺激产生的γ-干扰素的水平高于SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N),但无显著差异(P＞0.05).在整个免疫过程中,诱导产生的IL-4水平不明显,免疫组与对照组无显著差异(P＞0.05).研究结果显示SL7207(pVAXD-N-Sa)具有良好的口服免疫原性,并同时具有S和N双基因的免疫功能,本研究为进一步开展猪体的免疫评价奠定了基础。

摘要： 沙门氏菌是重要的人兽共患病病原，在医学、兽医学和公共卫生学上均具有十分重要的意义。减毒沙门氏菌是通过物理、化学或基因工程等方法，使沙门氏菌某些特定的基因发生不可逆的突变，使其毒力大大降低。现代医学中，疫苗接种是预防传染病最有效的方法，而成功的免疫接种需要有效的免疫应答。减毒沙门氏菌不但能作为疫苗，而且已被证实是理想的疫苗载体，尤其是在研制基因工程疫苗方面显现了独特的优越性。减毒沙门氏菌作为载体可激发强烈的体液免疫、细胞免疫和黏膜免疫。

摘要： 减毒沙门氏菌在作为疫苗预防沙门氏菌感染的同时，其作为载体传递DNA疫苗亦已成为目前基因免疫研究的热点。本文从减毒沙门氏菌的减毒机理、载体构建及携带外源基因诱导机体产生免疫应答的机制等方面做了较系统的阐述。

摘要： 本文研究的目的是了解减毒沙门氏菌介导的ARVσB基因和σC基因DNA疫苗的免疫原性特征，为研制安全有效的ARV的DNA疫苗研究提供理论依据。结论表明，重组沙门氏菌SL7207 (pVAX-σC)在诱导机体产生抗体水平方面要优于其它重组菌，但其免疫水平低于弱毒疫苗(P<0.01)，为进一步提升其免疫效果可考虑将σB、σC基因进行融合表或者考虑使用免疫佐剂，以提高抗体产生水平。

摘要： 目的：探讨减毒沙门氏菌介导的人HNP-3乳腺定位表达产物对革兰氏阴性菌的抗菌效果.方法：将构建的乳腺定位表达载体pEGFP-WAP-HNP-3经电转化导入减毒沙门氏菌ΔcrpC78-1,构建重组菌ΔcrpC78-1(pEGFP-WAP-HNP-3),将重组菌分点注射到怀孕后20-22d母兔腹部乳腺分布区,收集兔分娩后不同时间的泌乳,Western.blot检测乳中HNP-3融合蛋白表达情况,ELISA检测乳中HNP-3融合蛋白的表达水平,活菌计数法检测泌乳中HNP-3融合蛋白抑菌效果.结果：乳汁中在40kDa处有HNP-3融合蛋白阳性杂交信号,母兔分娩后第5d HNP-3融合蛋白表达量最高,可达289ng·mL-1,及至第25d表达量仍可达到136ng·mL-1.血清和阴性对照乳中未检测到HNP-3.活菌计数法结果表明含HNP-3融合蛋白兔奶对大肠杆菌、沙门氏菌和绿脓杆菌有较好的抑菌效果,抑菌率分别为92.8％、42.0％和21.3％;结论：减毒沙门氏菌介导的人HNP-3融合蛋白乳腺定位表达产物对革兰氏阴性菌具有抑菌效果,为动物乳房炎的预防及新一代抗菌药物的研发提供了新思路.

摘要： 目的:本研究通过构建减毒沙门氏菌重组菌人HNP-3基因乳腺定位表达系统,探讨减毒沙门氏菌介导的人HNP-3乳腺定位表达产物对革兰氏阴性菌的抗菌效果.方法:将构建的乳腺定位表达载体pEGFP-WAP-HNP-3经电转化导入减毒沙门氏菌ΔcrpC78-1,构建重组菌ΔcrpC78-1(pEGFP-WAP-HNP-3),将重组菌分点注射到怀孕20-22d母兔腹部乳腺分布区,收集试验组母兔分娩后不同时间段的的泌乳,Western·blot检测乳中HNP-3融合蛋白表达情况,ELISA检测乳中HNP-3融合蛋白的表达水平,活菌计数法检测泌乳中HNP-3融合蛋白的抑菌效果.结果:成功构建重组菌,重组菌分点注射到怀孕20-22d母兔腹部乳腺分布区,分娩后分泌的乳汁经Western·blot检测在40kDa处有HNP-3融合蛋白阳性杂交信号,母兔分娩后第5d HNP-3融合蛋白表达量最高,可达289ng·mL-1,及至第25d表达量仍可达到136ng·mL-1.血清和阴性对照乳中未检测到HNP-3.活菌计数法结果表明含HNP-3融合蛋白兔奶对大肠杆菌、沙门氏菌和绿脓杆菌有较好的抑菌效果,抑菌率分别为92.8％、42.0％和21.3％;结论:验证了减毒沙门氏菌氏菌介导HNP-3基因乳腺定位表达质粒在兔乳腺中定位表达的可行性,其表达的HNP-3融合蛋白乳腺定位表达产物对革兰氏阴性菌具有很好的抑菌效果,为动物乳房炎的预防和治疗以及进一步开发新型、安全的抗菌类药物提供了新思路.

摘要： 本研究设计了NSP4单表达质粒疫苗、VP7单表达质粒疫苗、NSP4和VP7双表达以及单表达疫苗的联合免疫方式进行效果比较，通过相互比较之间诱导机体产生特异体液抗体和黏膜抗体的水平差异，探索能提高疫苗稳定性、安全性、有效性的方法。试验结果显示NSP4单表达疫苗的免疫原性最低，所诱导的NSP4蛋白抗体水平较低，而双表达疫苗诱导产生的特异抗体水平显著高于单表达各组。表明NSP4构建的单表达疫苗免疫原性较低，但NSP4与VP7基因组成双表达疫苗则较NSP4或VP7基因单表达疫苗免疫效果有一定水平提高。双表达质粒免疫效果提高的机制一方面可能是由于NSP4蛋白发挥的免疫增强作用，另一方面可能是由于抗原蛋白种类的增多，两种抗原蛋白诱导产生抗体，增强了疫苗的免疫原性，其作用机制有待进一步研究。

摘要： 本发明公开了一种沙门氏菌肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌PCR焦磷酸法的检测引物试剂盒和检测方法。本发明根据沙门氏菌aceA基因、肠炎沙门氏菌特异序列、鼠伤寒沙门氏菌的STM4599序列中的保守区域，分别设计扩增引物和测序引物，对目标片段进行PCR扩增，再用扩增产物制备单链模板，进行焦磷酸测序，测序引物后前30个碱基序列为GCCTGTGGGTACTTCTCCTGCCAGTATAAT判断样品中含有沙门氏菌，测序引物后前30个碱基序列为CCTGTTGTCTGCTCACCATTCGCCAGCCAC和TACAACCGGAGTGCACATTAATCCCGCAGC则分别判断含有肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌。

摘要： 本发明公开了减毒鼠伤寒沙门氏菌基因工程菌在制备治疗肝癌药物上的应用，该菌为克隆有甲硫氨酸酶基因的减毒鼠伤寒沙门氏菌VNP20009，带有克隆有L‑methioninase基因的质粒的减毒鼠伤寒沙门氏菌可以在肝癌肿瘤组织持续表达L‑methioninase，大量消耗甲硫氨酸及其它营养物质，使得肿瘤细胞缺乏营养，生长缓慢。本发明还公开了上述基因工程菌的构建方法和应用。本发明的用于治疗肝癌的生物药物，是一种安全无毒具备抗肿瘤活性的新型生物药物，以减毒鼠伤寒沙门氏菌VNP20009为载体，利用基因重组技术高表达甲硫氨酸酶，抗肝癌肿瘤活性强，能满足使用需求。制备方法简单，容易操作；具有很好的应用前景。

摘要： 一种基于fur基因的猪霍乱沙门氏菌减毒载体菌及其构建方法，涉及基因工程技术领域，先构建在fur毒力基因的启动子中插入araC PBAD结构的自杀载体，再依次构建减毒猪霍乱沙门氏菌rSC0008和rSC0009突变株，然后将rSC0009突变株中引入Δasd突变基因，得基于fur基因的含有ΔmanA，ΔrelA::araC PBADlacI TT，ΔPfur::TT araCPBADfur和ΔasdA突变的猪霍乱沙门氏菌减毒载体rSC0012。本发明作为幼龄动物疫苗载体具有更高的安全性，本发明可在制备递送猪病原的疫苗载体方面应用。

摘要： 本发明公开了减毒鼠伤寒沙门氏菌及其基因工程菌在制备治疗前列腺癌的药物上的应用，减毒鼠伤寒沙门氏菌对前列腺癌细胞具有肿瘤靶向性及显著的抑制效应，并且由其与质粒所构建的基因工程菌同样具有肿瘤靶向性，且带有克隆有L‑methioninase基因的质粒的减毒鼠伤寒沙门氏菌可以在肿瘤组织持续表达L‑methioninase，大量消耗甲硫氨酸及其它营养物质，使得肿瘤细胞缺乏营养，生长缓慢，因此均可以用于制备治疗前列腺癌的药物。

摘要： 本发明涉及一种鉴别肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌及鸡伤寒沙门氏菌的多重PCR方法，该方法是以提取的待测细菌DNA为模板，用SEQ ID NO.1－10所示的5对引物进行mPCR扩增；mPCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳，然后根据电泳结果进行判定。本发明利用所合成的引物进行PCR扩增，建立起的多重PCR可以直接研磨病料进行扩增，可以在一个体系中检测出不同的沙门氏菌血清型，在临床检测中较传统的分离纯培养后进行血清玻板凝集的3天时间比仅需要6个小时左右，大大缩短了诊断时间，为临床诊断提供依据。

摘要： 本发明公开了一种沙门氏菌肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌PCR焦磷酸法的检测引物试剂盒和检测方法。本发明根据沙门氏菌aceA基因、肠炎沙门氏菌特异序列、鼠伤寒沙门氏菌的STM4599序列中的保守区域，分别设计扩增引物和测序引物，对目标片段进行PCR扩增，再用扩增产物制备单链模板，进行焦磷酸测序，测序引物后前30个碱基序列为GCCTGTGGGTACTTCTCCTGCCAGTATAAT判断样品中含有沙门氏菌，测序引物后前30个碱基序列为CCTGTTGTCTGCTCACCATTCGCCAGCCAC和TACAACCGGAGTGCACATTAATCCCGCAGC则分别判断含有肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌。

摘要： 本发明属于微生物检测领域，公开了一种同时快速检测食品中活的鼠伤寒沙门氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、伤寒沙门氏菌菌的方法。针对鼠伤寒沙门氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、伤寒沙门氏菌菌设计特异性引物，采用叠氮溴化丙锭处理处理取出死菌的干扰，最终提取DNA做多重PCR检测。本方法和经典的细菌分离、鉴定和血清学分型方法相比更快速、准确。

摘要： 本发明涉及医药技术领域，具体涉及减毒鼠伤寒沙门氏菌的基因工程菌在制备治疗癌症的药物上的应用，采用区域动脉灌注的给药方式提高基因工程菌在胰腺、肺脏的分布浓度的方法。肿瘤细菌疗法备受关注。为提高基因工程菌在肿瘤组织中的浓度，尤其是胰腺癌等低血管肿瘤，静脉治疗药物难以达到病灶部位。本发明通过区域动脉灌注应用基因工程菌，提高了基因工程菌在胰腺、肺脏的分布浓度，具有很好的应用前景。

摘要： 本发明公开了减毒鼠伤寒沙门氏菌及其基因工程菌在制备治疗急性白血病的药物上的应用，涉及医药技术领域。该基因工程菌携带克隆有L‑methioninase(L‑甲硫氨酸酶或蛋氨酸酶)基因的重组表达质粒，可以在肿瘤组织持续表达L‑methioninase，大量消耗甲硫氨酸及其它营养物质，使得肿瘤细胞缺乏营养，生长缓慢，对急性白血病细胞具有显著的生长抑制作用，因此可以用于制备治疗急性白血病的药物。

摘要： 本发明公开了一种表达抗PD1纳米抗体的减毒沙门氏菌重组工程菌及其制备方法和应用，所述的表达抗PD1纳米抗体的减毒沙门氏菌重组工程菌为携带抗PD1纳米抗体表达质粒的减毒鼠伤寒沙门氏菌VNP20009及其基因改造菌株，其肿瘤靶向性不发生改变；将抗PD1纳米抗体基因克隆在包含启动子和信号肽的表达质粒上：所述的启动子为J23100组成型启动子或者NirB启动子或者adhE启动子；质粒上含有防止质粒丢失的AT元件。本发明表达抗PD1纳米抗体的减毒沙门氏菌VNP20009重组工程菌具有更高的肿瘤靶向性、更好的抗肿瘤疗效，制备方法简单，容易操作，可单次给药。