Janus激酶2

摘要： 目的探讨黄芪甲苷对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的帕金森病SK-N-SH细胞损伤的作用机制。方法人神经母细胞瘤细胞系SK-N-SH培养至对数生长期,随机予以常规培养(对照组)、MPP+诱导(MPP+组)、黄芪甲苷10 mg/ml+MPP+诱导(黄芪甲苷10 mg/ml组)、黄芪甲苷30 mg/ml+MPP+诱导(黄芪甲苷30 mg/ml组)、黄芪甲苷30 mg/ml+MPP+诱导+Janus激酶2(JAK2)抑制剂AG490(JAK2抑制剂组),噻唑蓝法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,DCFH-DA荧光探针测定活性氧(ROS)含量,酶法测定乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,Western blotting法测定磷酸化JAK2(pJAK2)和磷酸化信号转导与转录激活因子3(pSTAT3)蛋白相对表达量。结果不同处理组SK-N-SH细胞存活率(P=0.000)、凋亡率(P=0.000)、ROS含量(P=0.000)、LDH活性(P=0.000)、SOD活性(P=0.003)、pJAK2(P=0.000)和pSTAT3(P=0.000)蛋白相对表达量差异有统计学意义。与对照组相比,MPP+组、黄芪甲苷10 mg/ml组和30 mg/ml组、JAK2抑制剂组细胞存活率(P=0.000,0.001,0.049,0.000)和SOD活性(P=0.000,0.002,0.012,0.000)、pJAK2(P=0.003,0.006,0.036,0.002)和pSTAT3(P=0.001,0.002,0.024,0.001)蛋白相对表达量降低,细胞凋亡率(P=0.001,0.001,0.001,0.000)、ROS含量(P=0.000,0.001,0.002,0.000)和LDH活性(P=0.000,0.002,0.038,0.000)升高;与MPP+组相比,黄芪甲苷10 mg/ml组和30 mg/ml组细胞存活率(P=0.016,0.000)和SOD活性(P=0.003,0.001)、pJAK2(P=0.013,0.002)和pSTAT3(P=0.018,0.002)蛋白相对表达量升高,细胞凋亡率(P=0.021,0.008)、ROS含量(P=0.031,0.003)和LDH活性(P=0.001,0.000)降低;与黄芪甲苷10 mg/ml组相比,黄芪甲苷30 mg/ml组细胞存活率(P=0.002)和SOD活性(P=0.027)、pJAK2(P=0.007)和pSTAT3(P=0.006)蛋白相对表达量升高,ROS含量(P=0.019)和LDH活性(P=0.011)降低,JAK2抑制剂组细胞凋亡率(P=0.016)、ROS含量(P=0.030)和LDH活性(P=0.004)升高,SOD活性(P=0.004)、pJAK2(P=0.001)和pSTAT3(P=0.005)蛋白相对表达量降低;与黄芪甲苷30 mg/ml组相比,JAK2抑制剂组细胞存活率(P=0.001)、SOD活性(P=0.001)、pJAK2(P=0.000)和pSTAT3(P=0.001)蛋白相对表达量降低,凋亡率(P=0.004)、ROS含量(P=0.002)和LDH活性(P=0.001)升高。结论黄芪甲苷可以减轻MPP+诱导的帕金森病SK-N-SH细胞损伤,其机制可能与激活JAK2-STAT3信号转导通路有关。

摘要： 目的观察木犀草素减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的作用并探讨其潜在机制。方法SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、大脑中动脉栓塞(MCAO)组、木犀草素低剂量组(50 mg/kg)、木犀草素高剂量组(100 mg/kg)及尼莫地平组(15 mg/kg),灌胃给药,共7 d。采用线栓法建立MCAO大鼠模型,比较神经功能损伤评分、脑组织含水量、脑梗死体积,测定各组肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)含量及磷酸化Janus蛋白酪氨酸激酶2(p-JAK2)、磷酸化信号转导及转录激活蛋白3(p-STAT3)蛋白表达等变化情况。结果与假手术组比较,MCAO组大鼠神经功能损伤评分、脑组织含水量、脑梗死体积、脑组织TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax、Caspase-3含量及JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平均明显增加(P<0.05),而脑组织Bcl-2含量明显降低(P<0.05);与MCAO组比较,木犀草素低、高剂量组及尼莫地平组大鼠神经功能损伤评分、脑组织含水量、脑梗死体积、脑组织TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax、Caspase-3含量及JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平均明显降低(P<0.05),而脑组织Bcl-2含量明显增加(P<0.05)。结论木犀草素具有减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的作用,该作用与抑制JAK2/STAT3信号通路活化,进而减弱炎症反应及减少细胞凋亡有关。

摘要： 目的:研究Rab18是否通过Janus激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路下调脂滴包被蛋白2(PLIN2)表达,并影响人THP-1巨噬细胞脂质蓄积。方法:采用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育人THP-1巨噬细胞不同时间(0、6、12和24 h),用Westernblot检测细胞内Rab18、JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3及PLIN2蛋白水平,使用油红O染色法观察细胞内脂质蓄积的变化。制备野生型、活化型和失活型Rab18巨噬细胞,予以ox-LDL孵育,Westernblot和RT-qPCR检测细胞内Rab18、JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3及PLIN2蛋白水平,细胞免疫荧光技术观察巨噬细胞内p-JAK2和p-STAT3的核转位情况。用JAK2抑制剂AG490预处理活化型Rab18细胞,再用ox-LDL孵育该细胞,Westernblot和RT-qPCR检测JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3及PLIN2蛋白水平,细胞免疫荧光技术观察巨噬细胞中PLIN2的表达,油红O染色和GPO-PAP酶法观察细胞内脂质蓄积情况及甘油三酯(TG)含量。结果:ox-LDL处理24 h后,Rab18、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3及PLIN2蛋白水平显著升高(P<0.05),脂质蓄积增加。活化型和野生型Rab18上调JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3、p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3水平(P<0.05),下调PLIN2蛋白表达(P<0.05),细胞脂质蓄积及TG含量减少;免疫荧光显示Rab18与JAK2和STAT3存在共定位关系,活化型Rab18上调p-JAK2和p-STAT3水平,促进p-STAT3核移位;JAK2抑制剂AG490处理后,PLIN2表达及TG含量显著增加(P<0.05),细胞脂质蓄积增加。结论:Rab18通过JAK2/STAT3信号通路减少PLIN2表达,并抑制人THP-1巨噬细胞脂质蓄积。

摘要： 目的预测龙生蛭胶囊中"桃仁-红花-川芎"药组治疗脑卒中的药效物质基础及作用机制。方法利用中医药整合药理学研究平台V2.0(TCMIP V2.0),将"桃仁-红花-川芎"药组化学信息进行靶标预测,构建与脑卒中相关疾病靶标信息的蛋白互作网络(PPI),采用通路富集分析药组干预疾病的关键靶标,并构建"桃仁-红花-川芎"药组活性成分、关键核心靶标和疾病相关通路的PPI,绘制"中药-活性成分-关键核心靶标-通路"网络图,分析与核心靶标相关的主要成分,并采用分子对接技术对活性成分进行虚拟筛选。结果共预测到活性成分19个,核心网络靶标62个,其中药物靶标27个,疾病靶标35个,疾病与药物共有靶标2个(NR3C1,APP);其药效物质基础主要为生物碱类、挥发油类、黄酮类、有机酸类等成分";桃仁-红花-川芎"药组主要活性物质与细胞外信号调节蛋白激酶2(ERK2)、Janus激酶2(JNK2)形成较好的对接模式与较高的亲和力,具有治疗脑卒中的活性。结论龙生蛭胶囊中"桃仁-红花-川芎"药组通过多成分、多靶点、多通路的形式发挥脑卒中治疗作用,其作用机制可能与调控ERK2和JNK2等核心靶标有关。

摘要： 目的本研究旨在探究微小RNA⁃216a(miR⁃216a)是否通过调节Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)途径调控卵巢癌(ovarian cancer,OC)细胞的转移和上皮⁃间质转化(EMT)。方法qRT⁃PCR检测卵巢癌组织和细胞中miR⁃216a表达水平;Transwell检测迁移和侵袭能力;Western blot和免疫荧光检测EMT相关蛋白表达;Western blot分析JAK2/STAT3途径相关蛋白表达。结果miR⁃216a在卵巢癌组织和细胞中的表达下调(P<0.05)。上调miR⁃216a削弱卵巢癌细胞迁移、侵袭和EMT,同时抑制JAK2/STAT3通路激活(P<0.05)。过表达JAK2可逆转上调miR⁃216a对以上指标的影响(P<0.05)。结论miR⁃216a可能通过抑制JAK2/STAT3通路抑制卵巢癌细胞的转移和EMT。

摘要： 目的 探讨钙激活的氯离子通道A4(CLCA4)对食管癌细胞增殖、迁移、侵袭及JAK激酶2/信号转导及转录激活蛋白3(JAK2/STAT3)信号通路的影响.方法 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白质印迹法(Western blotting)分别检测正常人食管鳞状上皮细胞与人食管癌细胞中CLCA4的表达;将合成的CLCA4过表达载体及其对照分别转染至食管癌细胞Eca109,分别记作CLCA4过表达(pcDNA-CLCA4)组、CLCA4阴性对照(pcDNA-NC)组,并将未转染的细胞作为阴性对照(NC)组.四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞增殖能力;细胞迁移实验(Transwell)检测细胞迁移及侵袭能力.JAK2/STAT3信号通路激活剂p-JAK2多肽对细胞增殖、迁移及侵袭的影响.Western blotting检测细胞周期蛋白D1(Cy-clinD1)、依赖性激酶抑制因子(P21)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、JAK2、STAT3、磷酸化JAK激酶2(p-JAK2)、磷酸化信号转导及转录激活蛋白3(p-STAT3)的表达水平.结果 与Het-1A相比,人食管癌细胞KYSE170、Eca109、TE10中CLCA4 mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05);与pcDNA-NC组比较,pcDNA-CLCA4组细胞存活率显著降低[(52.16±11.41)％比(99.57±13.49)％,P<0.05],迁移细胞数[(56.47±10.03)％比(112.49±13.52)％]与侵袭细胞数[(63.43±9.87)％比(123.47±16.58)％]减少(P<0.05),CyclinD1、MMP-2、MMP-9、p-JAK2、p-STAT3的表达水平降低(P<0.05),P21的表达水平升高(P<0.05);激活JAK2/STAT3信号通路可逆转CLCA4过表达对Eca109细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用.结论 CL-CA4过表达可抑制食管癌细胞增殖、迁移及侵袭,其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路活化有关.

摘要： 目的 探讨RNA干扰细胞分裂周期蛋白6(CDC6)基因表达对结直肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制.方法 采用蛋白质印迹法(Western blot)检测永生化结直肠细胞株(FHC)、结直肠癌细胞株(SW620、LOVO、HT29)中CDC6蛋白的表达情况.利用Lipofectamine 2000将CDC6 siRNA转染至SW620细胞,以转染si-con的SW620细胞作为阴性对照,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell小室实验检测细胞侵袭和迁移情况.采用Western blot检测Janus激酶2(JAK2)、磷酸化-JAK2(p-JAK2)、信号转导及转录激活因子3(STAT3)及磷酸化-STAT3(p-STAT3)蛋白的表达情况.采用JAK2/STAT3信号通路激活剂colivelin处理转染CDC6 siRNA的SW620细胞,观察其对SW620细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响.结果 永生化结直肠细胞株FHC中CDC6蛋白的相对表达量低于结直肠癌细胞株SW620、LOVO、HT29,差异均有统计学意义(P﹤0.05).转染CDC6 siRNA能够抑制SW620细胞增殖,促进细胞凋亡,减少侵袭细胞数目、迁移细胞数目,降低p-JAK2、p-STAT3蛋白的相对表达量,而对JAK2、STAT3蛋白的相对表达量无明显影响.采用colivelin激活JAK2/STAT3信号通路可以逆转CDC6 siRNA对SW620细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响.结论 转染CDC6 siRNA可通过下调JAK2/STAT3信号通路,抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移,并诱导细胞凋亡.

摘要： 目的 探讨丹参酮ⅡA(TA)对心肌缺血-再灌注损伤(MIRI)的影响及其对Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路的影响.方法 建立老年大鼠MIRI模型和心肌细胞缺氧/复氧损伤(HRI)模型,分别从体内和体外水平进行研究.采用超声心动图测定心功能,应用全自动生化检测仪检测大鼠血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH).四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡,DCFH-DA荧光探针检测活性氧(ROS)含量,全自动生化检测仪检测细胞上清液丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,免疫印迹法(Western Blotting)检测相关蛋白表达水平.应用JAK2/STAT3抑制剂AG490干预心肌细胞,观察各项指标变化.结果 TA可改善MIRI大鼠心肌梗死面积、心脏射血分数和缩短分数、血清CK和LDH水平(P<0.05),改善HRI心肌细胞活力和凋亡水平(P<0.05),提高HRI心肌细胞抗氧化能力,改善ROS、MDA和SOD水平(P<0.05).Western Blotting检测结果显示,TA可改善p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2/Bax比值、cleaved Caspase-3水平(P<0.05),AG490干预可逆转上述指标变化(P<0.05).结论 TA对MIRI具有一定保护作用,可能通过激活JAK2/STAT3通路减少心肌细胞凋亡从而改善MIRI.

摘要： 目的:探讨基于Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路探讨参苓白术散对溃疡性结肠炎模型大鼠炎症抑制作用研究.方法:选SPF级健康雄性SD大鼠65只,随机分为对照组(n=12)和造模组(n=53).造模组采用免疫复合法复制溃疡性结肠炎模型,对照组以相同方式给予等量0.9％氯化钠溶液.采用随机数字表法,对成功复制模型的大鼠进行分组,分别是模型组、参苓白术散低、高浓度组及阳性对照组,各12只.模型组及对照组灌胃给予蒸馏水10 ml/kg,1次/d;阳性对照组灌胃给予3 mg/ml美沙拉嗪溶液10 ml/kg,1次/d;参苓白术散低、高浓度组分别灌胃给予1.2 g/ml、2.4 g/ml参苓白术散药液10 ml/kg,1次/d.各组大鼠均给药3周.检测比较各组结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分、结肠组织学损伤指数(TDI)评分、血清炎症因子水平,以及结肠组织JAK、STAT3表达水平.结果:与模型组比较,各组大鼠结肠组织CMDI评分较低,TDI评分较低,血清白细胞介素-6(IL-6)水平较低,结肠组织JAK、STAT3表达水平较低,且参苓白术散低浓度组>阳性对照组>参苓白术散高浓度组,差异有统计学意义(均P<0.05).与模型组比较,血清白细胞介素-10(IL-10)水平较高,且参苓白术散低浓度组<阳性对照组<参苓白术散高浓度组,差异有统计学意义(均P<0.05).结论:参苓白术散能减轻溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜损伤,调节炎症相关细胞因子IL-6、IL-10释放,减轻炎症反应,其作用可能与抑制JAK/STAT3信号通路活性有关.

摘要： 目的 通过分析JAK2 rs10119004基因多态性对伏立康唑血药谷浓度(Cmin)及临床治疗效果的影响,为伏立康唑治疗重症监护室(ICU)侵袭性真菌感染个体化方案的制定提供参考.方法 利用PCR及Sanger测序方法检测JAK2 rs10119004位点的基因型,同时应用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法检测伏立康唑血药谷浓度(Cmin),分析各基因型患者Cmin的特点及不同基因型患者用药后疗效及不良反应发生情况.结果 70例患者伏立康唑Cmin为0.12～12.23 mg/L,平均3.07(1.92,5.48)mg/L.70例患者JAK2 rs10119004位点基因型共3种:野生未突变型G/G 25例,杂合子突变型G/A 32例,纯合子突变型A/A 13例.不同Cmin和不同基因型分组患者的治疗有效率及不良反应发生率差异无统计学意义.不同年龄(Age)、血浆白蛋白(ALB)水平和JAK2 rs10119004基因型患者,其伏立康唑Cmin存在差异;将具有统计学意义的影响因素纳入多元回归模型,得到回归方程C1=7.479+0.048×Age-0.233×ALB+1.405×X1(X1:G/A=1,非G/A=0);C2=7.479+0.048×Age-0.233×ALB+1.208×X2(X2:A/A=1,非A/A=0).结论 JAK2 rs10119004基因型可影响ICU侵袭性真菌感染患者伏立康唑的Cmin.

摘要： 本发明涉及式(I)的喹喔啉化合物及其在治疗疾病、特别是由包括JAK-2和JAK-3激酶的Janus激酶的酪氨酸激酶活性介导的疾病的用途：，其中R1为碳环基或杂环基，其中任何一个任选被1、2、3、4或5个R7取代；R2为碳环基或杂环基，其中任何一个任选被1、2、3、4或5个R8取代；R3、R4、R5和R6各自独立为氢或R9；且R7、R8和R9各自独立选自有机和无机取代基。

摘要： 本发明公开式(00A)化合物及其盐，其中R1、R2、R3、R4和n如本文所定义，用作一或多个Janus激酶的抑制剂。本发明还公开药用组合物，其包含式(00A)化合物和可药用的载体、辅助剂或赋形剂，本发明还公开治疗患者中对Janus激酶活性的抑制有响应的疾病或病症或减轻其严重性的方法。

摘要： 提供Janus激酶1选择性抑制剂及其药物用途。

摘要： 本发明涉及包含以下的药物组合：(a)磷酸肌醇-3-激酶抑制剂化合物和(b)调节JAK2-STAT5通路的化合物，用于治疗增生性疾病，特别是实体瘤疾病；包含所述组合的药物组合物；所述组合在制备治疗增生性疾病的药物中的应用；包含所述组合作为联合制剂的商业包装物或产品，用于同时、分开或序贯应用；以及涉及治疗温血动物特别是人的方法。

摘要： 本发明涉及式(I)的喹喔啉化合物及其在治疗疾病、特别是由包括JAK－2和JAK－3激酶的Janus激酶的酪氨酸激酶活性介导的疾病的用途：其中R1为碳环基或杂环基，其中任何一个任选被1、2、3、4或5个R7取代；R2为碳环基或杂环基，其中任何一个任选被1、2、3、4或5个R8取代；R3、R4、R5和R6各自独立为氢或R9；且R7、R8和R9各自独立选自有机和无机取代基。

摘要： 本发明涉及式(1)或(2)的化合物，其中，R1和R3是嘌呤或嘌呤类似物，并且R2和R4是小官能团。本发明还涉及合成式1或2的化合物的中间体。式1或2的化合物是Janus激酶抑制剂，并且因此用于治疗疾病，特别是自身免疫性疾病、癌症、阿尔茨海默病或用于预防同种异体移植物或异种移植物的排斥。

摘要： 本发明提供了一种具有Janus激酶抑制活性的化合物、包括该化合物的组合物及其应用。该化合物为如式I所示的4‑(3H‑咪唑并[1,2‑a]吡咯并[2,3‑e]吡嗪‑8‑基)‑吡咯烷‑1‑酰胺化合物或其衍生物，该衍生物为其药学上可接受的盐、酯、前药、单晶或多晶型物、溶剂化物或水合物。本发明提供的4‑(3H‑咪唑并[1,2‑a]吡咯并[2,3‑e]吡嗪‑8‑基)‑吡咯烷‑1‑酰胺化合物或其衍生物具有优异的Janus激酶抑制活性和优异的药效学性能，可作为Janus激酶抑制剂为治疗相关疾病提供新的有效的选择。

摘要： 本发明的目的是提供作为选择性JAK1抑制剂的化合物、用于制备所述抑制剂的方法、含有所述化合物的组合物以及所述化合物的用途。

摘要： 本发明涉及式(I)化合物或其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。本发明还涉及用于治疗的所述化合物、包含所述化合物的药物组合物和用于治疗自身免疫疾病的所述化合物。

摘要： 本发明提供了一类新的治疗剂，所述治疗剂是Janus激酶1的安全有效的抑制剂，本发明还提供了其药物组合物、制备方法及其在各种不同疾病和障碍(例如炎性疾病、免疫介导性疾病或癌症)的治疗中的用途。