HUVEC

摘要： Objective:To explore the impact of fucoxanthin on oxidized low-density lipoprotein(OxLDL)-induced stress and inflammation in human endothelial cells and its underlying mechanisms.Methods:HUVECs were treated with OxLDL and/or fucoxanthin for a range of time points and concentrations.We evaluated the effects of fucoxanthin on OxLDL-induced HUVECs using the MTT assay,reactive oxygen species accumulation assay,ELISA,RT-PCR,immunofluorescence,and Western blotting.Results:Fucoxanthin enhanced the cell viability in a dose dependent manner after OxLDL exposure.Furthermore,fucoxanthin pretreatment significantly decreased OxLDL-induced reactive oxygen species production and prevented the activation of the nuclear factor kappa-B pathway,which led to substantial suppression of pro-inflammatory gene expressions.OxLDL-induced upregulation of interleukin-6,intercellular adhesion molecule-1,vascular cell adhesion molecule-1,interleukin-1β,monocyte chemotactic protein-1,cyclooxygenase-1,and tumor necrosis factor-αwas significantly reduced by fucoxanthin.Conclusions:Fucoxanthin can inhibit OxLDL-induced vascular inflammation and oxidative stress in HUVECs by targeting Nrf2 signaling pathways.

摘要： 目的观察川芎嗪(Tetramethylpyrazine,TMP)对细菌脂多糖(LPS)诱导的脐静脉内皮细胞屏障损伤(HUVEC)的保护作用,并探索可能的作用机制。方法将鉴定好的人脐带静脉内皮细胞根据加药处理因素不同,将实验分为空白对照组、LPS组,LPS+TMP组。对三组进行免疫荧光细胞骨架染色及细胞通透性实验、跨内皮电阻实验。应用Westernblot及qPCR方法进行mTOR表达量的定量分析。结果免疫荧光细胞骨架染色表明与空白组相比,LPS组应力纤维明显增多、增粗。而应用TMP治疗后应力纤维变少、变细。跨内皮电阻实验表明,加药刺激前三组电阻值差无统计学意义(P>0.05)。加入药物刺激后,LPS组较空白组,电阻值明显降低,而TMP组较LPS组明显增加(P<0.05)。细胞通透性实验表明加药刺激后,LPS组较空白组,通透系数明显增加,而TMP组较LPS组明显降低(P<0.05)。Westernblot及qPCR方法表明LPS组较空白组mTOR表达量增加,而TMP治疗之后mTOR表达量较LPS组下降。结论TMP可通过调控mTOR的表达量对LPS诱导的HUVEC内皮细胞屏障破坏起到保护作用。

摘要： 为实现黑莓中活性成分的高效提取,探究酵解工艺对提取物成分的影响,并研究所得产物对叔丁基过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化应激损伤的保护作用。与未酵解提取物(BH)相比,酵解黑莓提取物(BF)的总糖、可溶性蛋白质、维生素C等营养成分含量基本不变,总酚、花色苷和鞣花酸含量分别增加了43.4%,41.7%,44.4%。在抗氧化能力方面,BF可以通过降低活性氧、乳酸脱氢酶和丙二醛含量,提高总抗氧化能力和超氧化物歧化酶活力,对HUVEC细胞氧化损伤起到保护作用,且BF的作用效果优于BH。本酵解工艺能有效促进黑莓活性成分的溶出,增强提取物的抗氧化能力,为黑莓功能食品的开发提供新思路。

摘要： 研究绿豆皮牡荆素对过氧化氢(H2O2)损伤人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的保护作用。H2O2诱导建立HUVEC细胞损伤模型,设置空白组、绿豆皮牡荆素低、中、高剂量组、VC对照组,噻唑蓝和试剂盒法分别测定细胞存活率、目标成分(MDA、GSH、SOD、LDH、GSH-Px)。最佳H2O2损伤浓度为900μmol/L此时细胞存活率为51.32%;剂量组质量浓度为60、80、100μg/mL时,细胞存活率分别为110.61%、122.30%、131.68%,不同剂量组均能显著降低细胞及培养液中MDA含量,增加GSH含量,提高SOD、GSH-Px活性;能显著提高细胞中LDH活性,降低培养液中LDH活性;绿豆皮牡荆素质量浓度为100μg/mL时,细胞保护能力与同浓度下VC相当。绿豆皮牡荆素能促进HUVEC细胞增殖,抑制自由基生成,增强抗氧化酶活性,降低细胞氧化损伤程度,且存在剂量依赖关系。

摘要： 研究绿豆皮牡荆素对过氧化氢(H2O2)损伤人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的保护作用.H2O2诱导建立HUVEC细胞损伤模型,设置空白组、绿豆皮牡荆素低、中、高剂量组、VC对照组,噻唑蓝和试剂盒法分别测定细胞存活率、目标成分(MDA、GSH、SOD、LDH、GSH-Px).最佳H2O2损伤浓度为900 μmol/L此时细胞存活率为51.32％;剂量组质量浓度为60、80、100 μg/mL时,细胞存活率分别为110.61％、122.30％、131.68％,不同剂量组均能显著降低细胞及培养液中MDA 含量,增加GSH 含量,提高SOD、GSH-Px 活性;能显著提高细胞中LDH 活性,降低培养液中LDH 活性;绿豆皮牡荆素质量浓度为100 μg/mL 时,细胞保护能力与同浓度下VC 相当.绿豆皮牡荆素能促进HUVEC 细胞增殖,抑制自由基生成,增强抗氧化酶活性,降低细胞氧化损伤程度,且存在剂量依赖关系.

摘要： 目的 研究敏感受体(CaSR)在高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的表达及其与内质网应激的关系.方法 将HUVEC细胞分为正常糖对照组(NG组)、高糖组(HG组)、正常糖+CaSR激动剂组(NG+GdCl3组)、高糖+CaSR拮抗剂组(HG+NPS-2390组),以不同条件孵育72 h.用CCK-8法检测细胞存活率,用试剂盒检测乳酸脱氢酶、一氧化氮、脂质过氧化物、活性氧和细胞内钙离子的水平.用Western blot法检测CaSR和细胞内质网应激标志性蛋白的表达水平.结果 HG组和NG+GdCl3组的细胞存活率下降,LDH漏出增多,细胞内钙离子浓度升高,CaSR蛋白表达增多,氧化应激反应增强,内质网应激标志蛋白GRP78、p-PERK、p-IRE1α蛋白表达水平增高,说明高糖和CaSR激活会导致HUVEC细胞损伤,发生内质网应激.HG+NPS-2390组细胞损伤、氧化应激和内质网应激明显减轻.结论 CaSR参与了高糖导致的HUVEC细胞损伤和内质网应激,抑制CaSR,可减轻高糖导致的内皮细胞损伤.

摘要： [目的]探究序列为KVEPQDPSEW的鲍鱼肠多肽AATP对LPS诱导HUVEC人脐静脉内皮细胞的抗炎作用.[方法]用"MTT"法检测细胞活力,"DCFH-DA"法测定活性氧(ROS)的含量,用蛋白免疫印迹法检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)和内皮素-1(ET-1)以及NF-κB信号通路相关蛋白的表达情况,酶联免疫实验检测白细胞介素-6(IL-6)的释放量,分子对接分析AATP与Toll样受体(TLR4)蛋白的相互作用.[结果]"MMT"法证明AATP对HUVEC细胞无明显毒性作用(P>0.05),且能提高脂多糖(LPS)诱导组的HUVEC细胞活力(P<0.05);与对照组相比,随着实验组AATP浓度增加,ROS含量明显逐渐减少(P<0.05),内皮炎症因子ICAM-1、VCAM-1、ET-1和IL-6的表达也明显逐渐减少(P<0.05),NF-κB信号通路中p65、I-κBα的磷酸化表达显著下降(P<0.05);对接结果表明,AATP与TLR4能形成稳定的氢键,有相互作用的可能性.[结论]AATP表现出很好的清除ROS作用,可明显抑制HUVEC的炎症因子的表达和NF-κB信号通路的激活.

摘要： 目的 研究人参果总皂苷对缺氧复氧诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC细胞)损伤的保护作用.方法 体外培养的HUVEC细胞分为正常组尧模型组尧参麦注射液组尧人参果总皂苷低尧中尧高剂量组(25尧50尧100μg/ml),缺氧复氧处理细胞,采用CCK8法检测细胞活力;倒置显微镜下检测细胞形态,MDC荧光染色观察自噬;检测丙二醛(MDA)尧乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)含量.结果 造模后与正常对照组比较,模型组细胞部分皱缩,生长受到抑制,细胞活力减弱,MDC染色显示自噬增加,MDA尧LDH升高,SOD降低,与模型组比较,人参果总皂苷使细胞损伤程度减轻,细胞增殖率增加,细胞自噬减轻,SOD升高,MDA尧LDH减少.结论 人参果总皂苷对缺氧复氧的HUVEC细胞具有保护作用,可能通过提高细胞抗氧化能力,降低自噬水平发挥作用.

摘要： 目的 考察HL-5对肿瘤细胞凋亡和细胞迁移的影响.方法 采用流式细胞术和划痕实验,分别选用人结肠癌细胞(HCT116)和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)在体外考察HL-5对肿瘤细胞增殖的抑制效果.结果 HL-5诱导HCT116细胞凋亡有较好的量效关系,同时也能剂量依赖性的抑制HUVEC细胞迁移,且抑制作用具有持续性.结论 双靶点抑制剂HL-5对肿瘤细胞增殖和迁移均有较好的抑制效果,具有潜在的临床应用价值.

摘要： 目的：研究超声微泡促进TDL复合物介导的肝细胞生长因子(HGF)基因在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的转染效果。结论：超声微泡可提高TDL复合物介导的基因在体外培养HUVEC的转染效率，并对细胞活性无明显影响，该方法为提高非病毒载体的转染效率提供一个新策略，可能成为缺血性心脏病基因治疗的有效手段之一。

摘要： 目的：研究超声微泡促进TDL复合物介导的肝细胞生长因子(HGF)基因在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的转染效果。结论：超声微泡可提高TDL复合物介导的基因在体外培养HUVEC的转染效率，并对细胞活性无明显影响，该方法为提高非病毒载体的转染效率提供一个新策略，可能成为缺血性心脏病基因治疗的有效手段之一。

摘要： 目的：研究超声微泡促进TDL复合物介导的肝细胞生长因子(HGF)基因在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的转染效果。结论：超声微泡可提高TDL复合物介导的基因在体外培养HUVEC的转染效率，并对细胞活性无明显影响，该方法为提高非病毒载体的转染效率提供一个新策略，可能成为缺血性心脏病基因治疗的有效手段之一。

摘要： 目的：研究超声微泡促进TDL复合物介导的肝细胞生长因子(HGF)基因在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的转染效果。结论：超声微泡可提高TDL复合物介导的基因在体外培养HUVEC的转染效率，并对细胞活性无明显影响，该方法为提高非病毒载体的转染效率提供一个新策略，可能成为缺血性心脏病基因治疗的有效手段之一。

摘要： 目的：研究超声微泡促进TDL复合物介导的肝细胞生长因子(HGF)基因在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的转染效果。结论：超声微泡可提高TDL复合物介导的基因在体外培养HUVEC的转染效率，并对细胞活性无明显影响，该方法为提高非病毒载体的转染效率提供一个新策略，可能成为缺血性心脏病基因治疗的有效手段之一。

摘要： 目的：研究超声微泡促进TDL复合物介导的肝细胞生长因子(HGF)基因在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的转染效果。结论：超声微泡可提高TDL复合物介导的基因在体外培养HUVEC的转染效率，并对细胞活性无明显影响，该方法为提高非病毒载体的转染效率提供一个新策略，可能成为缺血性心脏病基因治疗的有效手段之一。

摘要： 目的：研究超声微泡促进TDL复合物介导的肝细胞生长因子(HGF)基因在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的转染效果。结论：超声微泡可提高TDL复合物介导的基因在体外培养HUVEC的转染效率，并对细胞活性无明显影响，该方法为提高非病毒载体的转染效率提供一个新策略，可能成为缺血性心脏病基因治疗的有效手段之一。

摘要： 目的：研究超声微泡促进TDL复合物介导的肝细胞生长因子(HGF)基因在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的转染效果。结论：超声微泡可提高TDL复合物介导的基因在体外培养HUVEC的转染效率，并对细胞活性无明显影响，该方法为提高非病毒载体的转染效率提供一个新策略，可能成为缺血性心脏病基因治疗的有效手段之一。

摘要： 目的:了解姜黄素对血管生成和内皮细胞生长的影响，进而了解其抗血管生成机制。rn 方法:利用生长因子(血管内皮细胞生长因子——VEGF、碱性成纤维细胞生长因子——bFGF)诱导的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管增生模型观察姜黄索对血管生成的影响；利用培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)，采用MTT法观察不同浓度、各个时间段，姜黄素对内皮细胞增殖的抑制作用。rn 结果:姜黄素能明显抑制VEGF和bFGF诱导的CAM小血管生成，对内皮细胞增殖的抑制作用呈剂量和时间依赖性。rn 结论:姜黄素具显著的抗血管生成作用。

摘要： 目的:了解姜黄素对血管生成和内皮细胞生长的影响，进而了解其抗血管生成机制。rn 方法:利用生长因子(血管内皮细胞生长因子——VEGF、碱性成纤维细胞生长因子——bFGF)诱导的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管增生模型观察姜黄索对血管生成的影响；利用培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)，采用MTT法观察不同浓度、各个时间段，姜黄素对内皮细胞增殖的抑制作用。rn 结果:姜黄素能明显抑制VEGF和bFGF诱导的CAM小血管生成，对内皮细胞增殖的抑制作用呈剂量和时间依赖性。rn 结论:姜黄素具显著的抗血管生成作用。

摘要： 本发明涉及医疗器本发明涉及黄芪多糖的应用，尤其涉及黄芪多糖用于制备体外增加HUVEC细胞周期中的G2/M期和S期的比例和VEGF表达量的药物中的应用。本发明研究黄芪多糖（

摘要： 本发明公开上调KLF2表达抗LPS诱导HUVECs促血栓因子表达益气活血方的制备方法及应用，益气活血方由黄芪提取物、生晒参提取物、赤芍提取和红花提取物组成。使用黄芪提取物、生晒参提取物A、生晒参提取物B、赤芍提取和红花提取物组成的益气活血方干预HUVECs细胞后发现药物可显著抑制由LPS诱导的PAI‑1、TF蛋白的表达，显著提高KLF2的表达，抑制LPS的作用；发现当敲低KLF2后，益气活血方失去其原有作用，说明益气活血方抗血栓因子表达具有KLF2依赖性。

摘要： 本发明公开抑制NF‑κB激活抗LPS诱导HUVECs促血栓因子表达益气活血方制备方法及应用，益气活血方由黄芪提取物、生晒参提取物、赤芍提取和红花提取物组成。使用黄芪提取物、生晒参提取物A、生晒参提取物B、赤芍提取和红花提取物组成的益气活血方干预HUVECs细胞后发现药物可显著抑制由LPS诱导的PAI‑1、TF蛋白的表达，其具有抗炎、抗凝血的作用；NF‑κB是炎症反应的主要调控通路，当用LPS刺激后，NF‑κB被磷酸化而激活，调节炎症介质和促血栓因子组成的网络。本发明益气活血方可以通过抑制NF‑κB磷酸化来降低LPS诱导的促血栓因子表达。

摘要： 本发明公开了一种Caco‑2和HUVEC细胞共培养体系的构建方法。将25～40代对数生长期Caco‑2细胞接种到Transwell板上层小室培养至细胞完全分化；将2～6代对数生长期HUVEC细胞接种到Transwell板下层小室培养至细胞长满80～90％；将分化完全的Caco‑2细胞Transwell上层小室插入到培养好的HUVEC细胞Transwell下层小室中，微调DMEM培养基，于37°C、5％CO2环境非接触共同培养。本发明构建的Caco‑2/HUVEC共培养体系可同时研究药物的吸收代谢和生理活性，模拟药物经肠道吸收代谢后在循环系统的药理作用，提供一种反映药物生物利用度的细胞模型。

摘要： 本发明涉及一种TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞HUVEC炎症反应模型的制备方法，属于生物技术领域。内容包括：1)HUVEC细胞培养：HUVEC细胞用M199完全培养基置于37°C，5％CO

摘要： 本发明涉及一种人脐静脉内皮细胞HUVEC的分离、培养与传代方法，属于生物技术领域。内容包括：1)HUVEC的分离。取新鲜脐带，用含双抗的无菌PBS溶液洗净，加入胶原酶37°C水浴消化，消化液离心后，加入M199培养基，转入明胶包被好的培养瓶中，于C02培养箱在37°C培养。2)HUVEC的培养：HUVEC细胞在37°C培养24小时后，倒掉培养基，并用PBS溶液清洗，加入新鲜的M199培养基；以后每2天换一次培养基，一般培养5-7天可传代。3)HUVEC的传代：倒掉培养基，用PBS溶液清洗，加入消化液消化细胞，一旦细胞变圆，即加入含血清的DMEM培养基终止反应，将所消化的细胞离心，加入新鲜培养基，传代2-3代的HUVEC用于实验。本发明分离得到的HUVEC，经济实用，简便易行，有利于获得所需的体外实验模型细胞。