HL-60

摘要： 目的 研究齐墩果酸(Oleanolic Acid,OA)对人类急性粒细胞性白血病肿瘤细胞HL-60增殖、凋亡的影响及其发挥作用的机制,并分析OA能否抑制PI3K/AKT通路中AKT蛋白的磷酸化.方法 以人HL-60细胞作为研究对象,设立对照组与实验组,对照组不加OA,而实验组加入浓度80μmol/L的OA后,利用CCK-8法检测两组细胞增殖情况、流式细胞仪检测细胞凋亡、Western Blot法检测P110α、AKT、p-AKT(Ser473)、p-AKT(Thr308)、mTOR蛋白的表达.结果 OA能够抑制HL-60细胞增殖,促进HL-60细胞凋亡,并能下调P110a、p-AKT(Ser473)、p-AKT(Thr308)的表达.结论 OA能够抑制HL-60细胞增殖并促进细胞凋亡,并可能通过抑制PI3K/AKT通路中的AKT Ser473及Thr308位点的磷酸化来发挥此作用.

摘要： 目的 观察丹参酮Ⅱa对HL-60的凋亡与自噬以及相关因子水平的影响,探讨丹参酮Ⅱa抗急性髓系白血病的分子机制.方法 使用不同浓度的丹参酮Ⅱa处理HL-60细胞24、48 h后用CCK-8法检测增殖抑制率,吉姆萨染色观察细胞形态,Western blotting检测Caspase-3、Cleaved-Caspase-3、PARP-1、p-AMPK、p-mTOR、LC3B水平变化,联用自噬抑制剂巴弗洛霉素A1以CCK-8测细胞存活率.结果 以0、1、2、4、8、16、32、64、128 μmol/L丹参酮Ⅱa处理HL-60细胞24、48h后HL-60增殖被抑制,其作用随浓度增加和时间延长而加强,24、48 h的IC50分别为32.87、18.4 μmol/L;吉姆萨染色镜下观察见,随着药物浓度增加HL-60凋亡增加;Western blotting显示Caspase-3减少、Cleaved-Caspase-3增加,PARP-1切割增加,凋亡增强;p-AMPK增加、p-mTOR减少、LC3B增加,显示AMPK/mTOR自噬通路激活,联用巴弗洛霉素A1后丹参酮Ⅱa增殖抑制作用减弱.结论 丹参酮Ⅱa通过诱导HL-60凋亡和自噬发挥抗白血病作用,AMPK/mTOR可能是介导这一效应的重要信号通路.

摘要： 目的 探讨人类同源基因2(EZH2)对人急性早幼粒细胞白血病细胞系HL-60细胞迁移、增殖能力的影响及其机制.方法 通过慢病毒转染技术用siRNAs沉默HL-60细胞的EZH2基因,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blot验证3个不同序列的siRNA敲除EZH2的效果并筛选出最佳序列.随后用CCK-8和流式细胞术分别检测细胞增殖活性和凋亡,并用Transwell迁移小室试验检测细胞的迁移能力,用Western blot方法检测细胞迁移、增殖及凋亡相关蛋白的表达水平.结果 在HL-60细胞中用siRNAs敲除EZH2后其增殖能力下降(P<0.05),凋亡增加(P<0.05).Transwell迁移小室试验结果显示,HL-60细胞敲除EZH2组(siEZH2组)的下室细胞比例比HL-60野生株细胞组(wild组)和空病毒组(NC组)明显降低;苏木素染色后发现siEZH2组膜上细胞基数明显低于wild组和NC组.Western blot检测显示,siRNA沉默EZH2后细胞迁移相关蛋白基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达下调,E-钙黏蛋白(E-cadherin)上调,增殖及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)基因下调,而半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)上调.结论 在HL-60细胞中敲除EZH2基因后其增殖、迁移能力下降,凋亡增加.

摘要： 目的:建立用于体外热原检测的HL-60/IL-6法,并对细胞治疗产品进行适用性考查.方法:以细菌内毒素为工具药物,对可能影响HL-60/IL-6法试验结果的不同细胞代次、孵育时间、细胞数量、显色时间及血清含量5种因素进行考查,优化最佳试验条件.选用人源间充质干细胞(MSC)、树突细胞(DC)、T淋巴细胞、嵌合抗原T细胞(CAR-T)治疗产品进行方法适用性研究.应用CD3-APC抗体及凋亡试剂盒检测T及CAR-T细胞对HL-60细胞的凋亡作用,更为直观地验证其干扰作用.结果:经优化的HL-60/IL-6法的试验条件为:10～25代细胞、共同孵育24 h、细胞数量为2×105个/孔,血清含量为2％.采用本法对细胞治疗产品进行检测,干扰试验的回收率均在50％～200％之间,热原物质检测结果均为未检出或阴性,与细菌内毒素动态显色方法结果均一致.流式细胞检测仪结果表明,与T及CAR-T细胞共同孵育24 h,对HL-60细胞无凋亡作用,不会对试验系统产生干扰.结论:HL-60/IL-6法检测敏感性高,结果重复性好,可应用于细胞治疗产品热原物质的检查.

摘要： 合成了三甲氧基没食子酸1,2,4-噻二唑-3,5-二酮系列衍生物4a～4e,采用MTT法测定了中间产物2、3和目标化合物4a～4e对急性白血病HL60细胞增殖的抑制作用,并考察了4b和4c与阳性对照TDZD-8对HL60细胞增殖抑制的协同作用.结果表明:化合物2～4对HL60细胞增殖均有一定的抑制作用,其中化合物4b和4c抑制效果较好,半数抑制浓度(IC50)分别为10.60和6.31μmol/L;而TDZD-8对HL60细胞的IC50值为0.30μmol/L.此外,4b和4c协同TDZD-8对急性白血病细胞株HL60具有较好的增殖抑制作用,当4b和TDZD-8浓度分别为5.0和0.34μmol/L时,两者的协同抑制率为94.45％,协同指数CI值为0.58;当5c和TDZD-8浓度分别为5.0和0.34μmol/L时,两者的协同抑制率为98.76％,协同指数(CI)值为0.31.可以看出,新型没食子酸1,2,4-噻二唑-3,5-二酮衍生物具有作为治疗人急性白血病药物先导物的潜力.

摘要： 目的研究三乙酰白藜芦醇(triacetyl resveratrol,TRES)诱导白血病细胞HL-60凋亡的作用。方法采用Alamar blue法检测不同浓度(5、12.5、25、50、75μmol/L)TRES在不同时间点(12、24、48 h)对HL-60细胞增殖抑制率,Annexin V-FITC/PI双染色流式法测定不同浓度(5、25、50μmol/L)TRES作用于细胞12 h和24 h时凋亡的影响。Western blotting法检测5、25、50μmol/L TRES作用于细胞24 h时凋亡相关蛋白(STAT3、pSTAT3、Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3)。结果 Alamar blue实验结果表明TRES可以抑制HL-60细胞的增殖,Annexin V-FITC/PI双染色流式法结果显示TRES有诱导HL-60细胞凋亡的作用。Western blotting法检测凋亡相关蛋白的表达,随着TRES浓度升高,STAT3和Bax蛋白表达量无明显变化,pSTAT3表达量显著下调,Bcl-2表达显著下调,Cleaved caspase-3表达显著上调,Bcl-2/BAX比例下调,最终导致细胞凋亡。结论 TRES在体外抑制HL-60细胞增殖,并通过STAT3-Bcl-2/Bax-caspase-3通路诱导HL-60凋亡。

摘要： 目的:探讨CD44变异亚型对急性白血病细胞增殖和迁移的影响.方法:选择对数生长期的急性白血病细胞株HL-60、THP-1和慢性白血病细胞株K562,采用荧光定量PCR法检测CD44v6mRNA的表达.通过电转的方法转染CD44v6siRNA到HL-60和THP-1细胞抑制细胞的CD44v6表达,通过western方法检测CD44v6蛋白的抑制情况.将实验分成HL-60+N-siRNA、HL-60+ CD44V6-siRNA、THP-1+ N-siRNA、THP-1+CD44V6-siRNA共4组,培养24、48、72h后分别取细胞悬液用台盼蓝染色后计数活细胞数检测细胞的增殖情况;使用Transwell小室培养法观察HL-60和THP-1细胞的迁移率.结果:通过荧光定量PCR方法检测THP-1和HL-60细胞均高表达CD44v6(分别为0.0037±0.0007和0.00292±0.0002),明显高于K562的表达(P＜ 0.01);转染后的HL-60和THP-1细胞株中CD44v6蛋白表达水平明显下调,细胞计数结果显示转染CD44v6-siRNA的HL-60和THP-1细胞在24、48和72 h增殖均明显下降.迁移实验结果显示THP-1+N-siRNA和HL-60+ N-siRNA细胞的迁移率为17％和23％,与相应对照组相比THP-1+CD44v6-siRNA和HL60+ CD44v6-siRNA组细胞24h迁移率明显下降(分别降至11％和14％).结论:CD44v6可以通过干预白血病细胞的增殖和迁移能力,参与调解白血病细胞的增殖和髓外进展.

摘要： 目的:探讨三氧化二砷(As2 O3)对急性髓系白血病细胞HL-60增殖过程中Cdc20及Mad2的影响.方法:不同浓度As2O3处理HL-60细胞24、48、72 h后CCK-8法检测细胞增殖情况;Real-Time PCR及Western blot技术检测不同浓度As2O3作用于HL60细胞48 h后Mad2和Cdc20 mRNA及蛋白表达情况.结果:As2O3能显著抑制HL-60细胞增殖,并具有良好的时间剂量相关性.RT-PCR和Westem blot检测结果表明,As2O3 4、8、10 μmol/L作用于HL-60细胞后,Mad2表达上调,Cdc20表达下降(P＜0.05).结论:As2O3对人急性髓系白血病HL60细胞增殖具有较明显的抑制作用,其机制可能与上调Mad2表达和下调Cdc20表达有关.

摘要： 本文应用了Ficoll分离单个核细胞(MNC);甲基纤维素半固体培养法测定CFU-GM集落;XTT法测定HL60细胞存活率;AMF处理的MNC及含FLPS的MNC悬液,与VP16作用后,测定CFU-GM集落产率,研究氨磷汀和峰龄多糖对CFU-GM的保护作用.结果表明:氨磷汀和峰龄多糖对人外周造血干/祖细胞具有明显化疗保护及协同作用;氨磷汀能增强HL60细胞对VP16的敏感性;峰龄多糖对HL60细胞无保护作用.

摘要： 本文应用了Ficoll分离单个核细胞(MNC);甲基纤维素半固体培养法测定CFU-GM集落;XTT法测定HL60细胞存活率;AMF处理的MNC及含FLPS的MNC悬液,与VP16作用后,测定CFU-GM集落产率,研究氨磷汀和峰龄多糖对CFU-GM的保护作用.结果表明:氨磷汀和峰龄多糖对人外周造血干/祖细胞具有明显化疗保护及协同作用;氨磷汀能增强HL60细胞对VP16的敏感性;峰龄多糖对HL60细胞无保护作用.

摘要： 本文应用了Ficoll分离单个核细胞(MNC);甲基纤维素半固体培养法测定CFU-GM集落;XTT法测定HL60细胞存活率;AMF处理的MNC及含FLPS的MNC悬液,与VP16作用后,测定CFU-GM集落产率,研究氨磷汀和峰龄多糖对CFU-GM的保护作用.结果表明:氨磷汀和峰龄多糖对人外周造血干/祖细胞具有明显化疗保护及协同作用;氨磷汀能增强HL60细胞对VP16的敏感性;峰龄多糖对HL60细胞无保护作用.

摘要： 本文应用了Ficoll分离单个核细胞(MNC);甲基纤维素半固体培养法测定CFU-GM集落;XTT法测定HL60细胞存活率;AMF处理的MNC及含FLPS的MNC悬液,与VP16作用后,测定CFU-GM集落产率,研究氨磷汀和峰龄多糖对CFU-GM的保护作用.结果表明:氨磷汀和峰龄多糖对人外周造血干/祖细胞具有明显化疗保护及协同作用;氨磷汀能增强HL60细胞对VP16的敏感性;峰龄多糖对HL60细胞无保护作用.

摘要： 本文应用了Ficoll分离单个核细胞(MNC);甲基纤维素半固体培养法测定CFU-GM集落;XTT法测定HL60细胞存活率;AMF处理的MNC及含FLPS的MNC悬液,与VP16作用后,测定CFU-GM集落产率,研究氨磷汀和峰龄多糖对CFU-GM的保护作用.结果表明:氨磷汀和峰龄多糖对人外周造血干/祖细胞具有明显化疗保护及协同作用;氨磷汀能增强HL60细胞对VP16的敏感性;峰龄多糖对HL60细胞无保护作用.

摘要： salvicine是从中国药用植物红根草提取分离的二萜醌类化合物经结构修饰后而获得的全新化合物.实验研究显示,salvicine有较强的体内外抗肿瘤活性.目前salvicine已进入临床前开发研究阶段,许多抗肿瘤化疗药物均是通过诱导细胞凋亡来发挥其抗肿瘤活性的,而近来又有研究表明,端粒酶可能参与了细胞凋亡的调控过程.本文先从多角度观察salvicine对人白血病细胞株HL-60凋亡的诱导,并在此基础上进一步研究了端粒酶在凋亡过程中的调节变化,及其相关组分的调控.

摘要： salvicine是从中国药用植物红根草提取分离的二萜醌类化合物经结构修饰后而获得的全新化合物.实验研究显示,salvicine有较强的体内外抗肿瘤活性.目前salvicine已进入临床前开发研究阶段,许多抗肿瘤化疗药物均是通过诱导细胞凋亡来发挥其抗肿瘤活性的,而近来又有研究表明,端粒酶可能参与了细胞凋亡的调控过程.本文先从多角度观察salvicine对人白血病细胞株HL-60凋亡的诱导,并在此基础上进一步研究了端粒酶在凋亡过程中的调节变化,及其相关组分的调控.

摘要： salvicine是从中国药用植物红根草提取分离的二萜醌类化合物经结构修饰后而获得的全新化合物.实验研究显示,salvicine有较强的体内外抗肿瘤活性.目前salvicine已进入临床前开发研究阶段,许多抗肿瘤化疗药物均是通过诱导细胞凋亡来发挥其抗肿瘤活性的,而近来又有研究表明,端粒酶可能参与了细胞凋亡的调控过程.本文先从多角度观察salvicine对人白血病细胞株HL-60凋亡的诱导,并在此基础上进一步研究了端粒酶在凋亡过程中的调节变化,及其相关组分的调控.

摘要： salvicine是从中国药用植物红根草提取分离的二萜醌类化合物经结构修饰后而获得的全新化合物.实验研究显示,salvicine有较强的体内外抗肿瘤活性.目前salvicine已进入临床前开发研究阶段,许多抗肿瘤化疗药物均是通过诱导细胞凋亡来发挥其抗肿瘤活性的,而近来又有研究表明,端粒酶可能参与了细胞凋亡的调控过程.本文先从多角度观察salvicine对人白血病细胞株HL-60凋亡的诱导,并在此基础上进一步研究了端粒酶在凋亡过程中的调节变化,及其相关组分的调控.

摘要： 本发明公开了一种多机位HLS的描述方法，对Master Playlist进行描述和改造，本发明还公开了一种基于HLS的多机位视频直播系统，包括多机位编码系统和多机位播放系统，多机位编码系统和多机位播放系统通过网络传输方式传输信息，这种视频直播系统，将每个角度的主画面与其它角度的复合画面组合成一个大的画面编码成一个视频帧，在解码时此视频帧完整下载解码后才可以进行多画面的分割，这样就确保了多画的一致性和完整性，同时，本方案的带宽占用并未呈现明显的增加，较好地解决了多机位/角度在有限带宽条件下的实时同播问题。

摘要： 本发明公开了人白血病HL‑60细胞耐药细胞株HL‑60/RS细胞，所述细胞系HL‑60/RS的保藏编号为CCTCC NO：C201430，并提供了其制备方法，是以人类白血病HL‑60细胞系为亲本细胞，采用阿霉素模拟体内化疗过程，逐步提高药物浓度、长期、间歇性反复冲击加持续诱导的方法，诱导建立获得性白血病多药耐药细胞系HL‑60/RS。本发明的有益效果为：本发明诱导建立的白血病多药耐药HL‑60/RS细胞系，是采用“逐步提高浓度冲击+持续诱导”的诱导方法，实验证明，建立的耐药细胞株具有耐药谱广和耐药性稳定等特点；并对三氧化二砷具有高耐药性，可用于研究肿瘤细胞对抗癌药物的敏感性、耐药性及抗砷性的机制，以及筛选具有可靠性的耐药逆转剂。

摘要： 本发明提供一种HL建筑保温体系，包括第一网片、第二网片、第三网片与骨架保温组件，骨架保温组件包括保温层组件与腹丝组，保温层组件夹设在第一网片与第二网片之间，第三网片位于第二网片的一侧，腹丝组贯穿于保温层组件的内部，其两端分别和第一网片、以及第二网片和第三网片相连接；保温层组件至第三网片之间的距离A小于5公分。带有上述保温墙体的HL建筑墙体，包括保温墙体与混凝土层，保温墙体包括第一网片、第二网片、第三网片与骨架保温组件，骨架保温组件包括保温层组件，混凝土层位于保温层组件与第三网片之间，混凝土层的厚度小于5公分。本发明可解决目前外墙保温层施工难、浇筑难、易脱落等问题，实现保温层和结构层的一体化。

摘要： 本发明提出了一种基于HL7的主索引实现方法和基于HL7的主索引实现装置，其中，所述基于HL7的主索引实现方法包括：医疗系统获取医疗源数据；按照HL7标准，将所述医疗源数据打包成HL7报文数据；将所述HL7报文数据发送给代理服务器，以供所述代理服务器将所述HL7报文数据转换成实体数据。通过本发明的技术方案，方便主索引和医疗系统进行扩展，从而为主索引和医疗系统的扩展提供了保障。

摘要： 本发明公开了一种多机位HLS的描述方法，对Master？Playlist进行描述和改造，本发明还公开了一种基于HLS的多机位视频直播系统，包括多机位编码系统和多机位播放系统，多机位编码系统和多机位播放系统通过网络传输方式传输信息，这种视频直播系统，将每个角度的主画面与其它角度的复合画面组合成一个大的画面编码成一个视频帧，在解码时此视频帧完整下载解码后才可以进行多画面的分割，这样就确保了多画的一致性和完整性，同时，本方案的带宽占用并未呈现明显的增加，较好地解决了多机位/角度在有限带宽条件下的实时同播问题。

摘要： 本发明公开了人白血病HL-60细胞耐药细胞株HL-60/RS细胞，所述细胞系HL-60/RS的保藏编号为CCTCCNO：C201430，并提供了其制备方法，是以人类白血病HL-60细胞系为亲本细胞，采用阿霉素模拟体内化疗过程，逐步提高药物浓度、长期、间歇性反复冲击加持续诱导的方法，诱导建立获得性白血病多药耐药细胞系HL-60/RS。本发明的有益效果为：本发明诱导建立的白血病多药耐药HL-60/RS细胞系，是采用“逐步提高浓度冲击+持续诱导”的诱导方法，实验证明，建立的耐药细胞株具有耐药谱广和耐药性稳定等特点；并对三氧化二砷具有高耐药性，可用于研究肿瘤细胞对抗癌药物的敏感性、耐药性及抗砷性的机制，以及筛选具有可靠性的耐药逆转剂。

摘要： 本发明涉及一种适于HLS视频文件下载存储方法及HLS视频文件播放系统。其中，下载存储方法包括下列步骤：获取分块文件目录步骤，解析分块文件目录步骤，下载分块文件步骤、生成本地分块文件目录步骤、生成本地HTTP服务器步骤以及建立本地HTTP服务器步骤。本发明能能够顺利下载HLS协议传输的流媒体节目数据的分块目录及分块数据，并在客户端进行存储，以实现客户端播放器在离线情况下进行本地播放。

摘要： 本发明涉及一种非HL7标准的影像设备向HL7标准转换的方法，该方法通过信息提取模块、信息映射模块、HL7消息构建模块，进行非HL7标准的信息向HL7标准的转换。与现有的技术相比，本发明具有系统改造成本低、管理方便、集成简便等特点。

摘要： 本发明涉及一种基于HLS协议播放的认证方法，其包括流媒体服务器、中心管理服务器和客户端，视频或音频上传到所述流媒体服务器上转化成m3u8索引文件和ts文件，包括：m3u8索引文件请求认证过程和ts文件请求认证过程，流媒体服务和加解密服务分别由流媒体服务器和中心管理服务器提供，加解密服务由中心管理服务器提供，有利于降低流媒体服务器的负载，而ts文件请求的ts文件URL由流媒体服务器构造，不必经过中心管理服务器解密，有利于降低整个播放认证系统负载。

摘要： 本发明涉及一株植物乳杆菌HL‑16及其应用，属于微生物技术领域。所述植物乳杆菌HL‑16是从鸡粪中分离并筛选得到的，是一种乳杆菌，已进行保藏，保藏编号为CGMCC No.24035。本发明通过对植物乳杆菌HL‑16生物学特性分析显示，该菌具有耐受性好、产酸能力强、产β‑葡萄糖苷酶水平高、生长速度快等优点，可与酿酒酵母及纤维素酶进行菌酶协同发酵，应用于固态发酵中药中，发酵后的中药具有良好的抑菌性能。本发明主要使用具有自主知识产权的菌种，发酵中药，大幅度提高中药中生理活性物质的释放，显著抑制致病菌生长繁殖，从而避免有害代谢产物产生，具有促进动物生长的功能。该植物乳杆菌HL‑16，是一株优异的益生菌。