免疫荧光染色

摘要： 如果作者稿件中包含有组织病理图、免疫荧光染色图、免疫组织化学图、电子显微镜图片,为了反映组织标本大小的最精确尺度,请在电子版图片的左下方附注标尺.

摘要： 目的探讨神经干细胞不同的分离、纯化方法,并对分离和纯化后的细胞活性和纯度进行比较。方法①神经干细胞的分离:分离出生24 h内ICR小鼠的大脑,去除小脑和嗅球,切碎后分别用机械吹打法(mechanical pipetting)、胰酶消化法(trypsin digestion)、PDD酶消化法(papain-Protease-DNase enzyme digestion,PDD)消化脑组织,过筛离心后以1×109·L^(-1)的密度接种,用无血清培养基悬浮培养,观察比较NSCs的活性、增殖及杂细胞数。②神经干细胞的纯化:分离出生24 h的小鼠脑组织,利用差速离心法和过筛法纯化NSCs,通过免疫荧光法鉴定纯度。结果PDD混合酶消化组分离的NSCs存活率高,增殖速度快;差速离心法和过筛法纯化NSCs的巢蛋白(nestin)阳性率均高于原代NSCs(59.14%±0.16%,P<0.05),过筛法的Nestin阳性率(93.54%±0.02%)高于差速离心法(86.12%±0.04%)。结论3种分离方法均能得到大量的NSCs,其中PDD酶消化法对NSCs的损伤小,神经球增殖速度快;过筛法得到的NSCs纯度更高。

摘要： 中科院分子细胞科学卓越创新中心杨巍维课题组合作发现,MAPK等致癌信号通过调控丙酮酸脱氢酶PDHE1α的亚细胞转位促进肿瘤免疫逃逸。2022年3月22日,国际学术期刊《自然一代谢》在线发表了这一研究成果。分子细胞卓越中心杨巍维研究员、赵允研究员和上海交通大学附属胸科医院姚烽副主任医师为该论文的共同通讯作者。杨巍维组张亚娟副研究员和博士研究生赵明为共同第一作者。在这项研究中,研究人员对肺癌患者的肿瘤组织进行了免疫荧光染色实验。

摘要： 目的在传统的大脑皮质神经元的提取和培养方法基础上进行优化改良以获得高收率、高纯度、高质量、低死亡率、背景干净的皮质神经元细胞。方法分别采用传统的含EDTA的0.25%Trypsin分离培养的皮质神经元,与改良后用混有Tryple Express和DnaseI的消化液,经弹拨分散、手法震荡,提前一次离心后种植培养的皮质神经元。接种后的第1、3、5、6、7 d,显微镜观察细胞形态,第7 d用免疫荧光法对神经元细胞进行鉴定以及检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的释放量。结果与传统的胰酶提取方法相比,改良后获得的皮质神经元生长状态更优,突触发育良好,双极神经元形态典型,杂质细胞及碎片含量少,背景干净,且具有高纯度和高存活率的特性。结论本研究在组织细胞分离消化,弹拨分散、手法震荡,提前一次离心,多重细节方面进行了探索与改良后成功建立了一种结果稳定,简单可行的皮质神经元原代培养方法,是研究神经科学领域较为理想的模型。

摘要： 目的:分析吡哆胺和辛伐他汀在糖尿病神经病理性疼痛(DNP)的大鼠给药治疗中的应用效果及内分泌因子的表达。方法:选取40只雄性SD大鼠作为研究对象,将其中30只构建为糖尿病大鼠模型,根据给药方式的不同分为D0组(正常对照)、D1组(给予吡哆胺)、D2组(给予辛伐他汀)、D3组(无菌水)。电子测痛仪检测大鼠机械刺激缩足反射阈值(PWMT),热辐射刺激仪检测大鼠热刺激缩足反射潜伏期(PWTL),免疫荧光染色检测星形胶质细胞的晚期糖基化终产物受体(RAGE)和p-NF-kB蛋白表达,免疫组化染色检测纤维细胞生长因子2(FGF-2)水平。结果:D3组大鼠PWMT、PWTL 1周内随时间推移而明显下降,显著低于D0、D1、D2组,差异有统计学意义(P0.05)。D3组大鼠FGF-2蛋白PU值高于D0、D1、D2、D3组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:内分泌因子FGF-2参与了大鼠神经病理疼痛的产生和维持。吡哆胺和辛伐他汀能够通过抑制RAGE、p-NF-κB的激活及FGF-2蛋白的表达,来有效减轻糖尿病大鼠的机械痛敏及热阈痛,且改善效果相近。

摘要： 目的通过图解详细讲述小鼠耳蜗基底膜的取材、体外培养及免疫荧光染色,为初学者提供参考。方法选取出生3天内的新生小鼠3只、进行耳蜗基底膜显微解剖、基底膜体外培养及免疫荧光染色,并对各步骤进行高清拍摄。结果成功分离出基底膜并通过图片直观展示了小鼠基底膜的取材过程,倒置显微镜下观察其存活生长良好,免疫荧光染色方法显示了基底膜上的毛细胞与支持细胞的位置及数量。结论通过高清拍摄详细展示了新生小鼠耳蜗基底膜的取材及培养过程,有助于内耳研究的开展。

摘要： 缺血性脑血管疾病是全球范围内导致患者残疾和死亡的主要原因^([1]),脑缺血后可以诱发内源性的神经发生,是机体应对缺血性损伤的一种代偿性保护机制。5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromo-2-deoxy Uridine,BrdU)作为DNA碱基胸腺嘧啶核苷的类似物,与胸腺嘧啶核苷相同,在细胞有丝分裂的S期掺入到增殖或分裂细胞的核内^([2]),是神经发生中用来标记具有增殖活性细胞的重要指标,常与干细胞、神经祖细胞以及神经元的一些标志物共同标记.

摘要： 左上图:示受精过程,引自组织学与胚胎学.第9版,北京,人民卫生出版社,2018:197;右上图:示髋关节,成都华域天府数字科技有限公司供图;右下图:示星形胶质细胞,大鼠脊髓灰质,GFAP免疫荧光染色,齐建国供图。

摘要： 左上图:示受精过程,引自组织学与胚胎学.第9版,北京,人民卫生出版社,2018:197;右上图:示髋关节,成都华域天府数字科技有限公司供图;右下图:示星形胶质细胞,大鼠脊髓灰质,GFAP免疫荧光染色,齐建国供图。

摘要： 背景:研究人员认为,硫化氢作为一种重要的细胞保护分子,通过人为调控内源性硫化氢生物合成或使用硫化氢供体体外给药可能成为新的疾病治疗方式,用来恢复病变细胞或器官系统的生理功能.ADT-OH是硫化氢的一种缓释供体,它能够提高谷氨酸诱导的损伤海马神经细胞的生存率,但是对大脑皮质神经前体细胞增殖的影响尚不清楚.目的:探究ADT-OH对胚胎期大脑皮质神经前体细胞增殖的影响.方法:分离E14.5 d胚胎小鼠大脑皮质心室带和脑室管膜下区神经前体细胞,将1只胎鼠的神经前体细胞接种于1个孔中(24孔板),培养基中加入100μmol/L ADT-OH药物进行培养,3 d后统计每孔中神经球的大小和数目,对培养的神经前体细胞进行BrdU标记检测细胞增殖率,用增殖细胞的特异性抗体Ki67对细胞进行免疫荧光染色进一步验证细胞增殖情况,最后采用Western blot检测增殖相关基因cyclin D1的表达.结果与结论:ADT-OH可促进神经球的形成,提高神经前体细胞的增殖率,同时神经前体细胞中增殖相关基因cyclin D1的表达上调.由以上数据可知,ADT-OH促进神经前体细胞的增殖可能是通过调控cyclin D1的表达来完成.

摘要： 目的：为了掌握食蟹猴(Macaca fascicularis)精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)体外培养生长特性,建立其食蟹猴精原干细胞(MSSCs)分离纯化培养及初步鉴定方法.rn 方法：经手术获取2岁又14天食蟹雄猴单侧睾丸,采用三步酶消化法分离获得单细胞悬液和差异贴壁法富集精原干细胞.将细胞培养于经丝裂酶素处理的STO细胞上,使用添加GDNF,bFGF,GFRa1三个重要生长因子的无血清培养液在体外培养超过20天后,应用CDH1标记分子免疫荧光染色和RT-PCR对培养的食蟹猴细胞进行SSCs初步鉴定.rn 结果：通过差速贴壁法分离纯化富集的SSCs,经接种到丝裂霉素C处理的STO饲养层细胞上的第二天开始分裂增殖.用含有生长因子的培养基培养2天细胞形成小集落,5天后细胞集落明显.培养20天后,SSCs呈葡萄串状细胞簇,符合SSCs的形态特征,这些细胞经CDH1标记分子免疫荧光染色和RT-PCR均呈阳性表达.rn 结论：该研究成功建立了食蟹猴SSCs的分离纯化培养方法,通过形态学观察鉴定所培养细胞集落形态与SSCs形态相似,免疫荧光染色和RT-PCR鉴定CDH1是食蟹猴SSCs的标记分子.

摘要： 目的：晚期糖基化终末产物(AGEs)能诱发细胞内活性氧(ROS)生成增多而引起内皮细胞损伤,从而促进动脉粥样硬化的发生和发展,本文探讨激活Nrf2对AGEs作用下内皮细胞活性氧水平的影响。rn 方法：培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),通过Nrf2激动剂莱菔硫烷(SFN)激活Nrf2,采用Western blot方法检测Nrf2蛋白表达,免疫荧光染色检测Nrf2蛋白核转位情况,流式细胞仪分析AGEs刺激下HUVECs细胞ROS生成情况。rn 结论：增强Nrf2信号通路活性，能起到拮抗AGEs诱导内皮细胞氧化损伤的作用，从而为动脉粥样硬化尤其是糖尿病心血管并发症的防治提供新的思路和靶点。

摘要： 目的:研究α粒子诱发永生化人支气管上皮细胞BEP2D恶性转化中细胞内基础H2O2、脂质过氧化、DNA氧化损伤水平，变化。方法:运用DCFH-DA荧光探针标记过氧化氢(H2O2)结合荧光显微镜观察分析BEP2D细胞、α粒子作用BEP2D后第22代细胞RH22和α粒子作用BEP2D后恶性转化细胞系BERP35T-1内基础H2O2水平；丙二醛(MDA)测定试剂盒检测BEP2D、RH22和BERP35T-1细胞内脂质过氧化产物MDA的含量；免疫细胞化学法和免疫荧光染色法分别检测BEP2D、RH23及BERP35T-1细胞内DNA氧化损伤产物8-OH-dG和DNA双链断裂产物γH2AX的表达水平。结果:与BEP2D细胞相比，RH22和BERP35T-1细胞中基础H2O2水平和MDA含量显著升高，RH23和BERP35T-1细胞中8-OH—dG和γH2AX均表达上调。结论:氧化还原环境紊乱形成氧化压力，导致细胞内脂质过氧化和DNA氧化损伤增强，由此促进基因组不稳定性，可能是α粒子诱发BEP2D细胞恶性转化的机制之一。

摘要： 目的：采用基于细胞学水平的循环肿瘤细胞负性筛选方法，检测食管鳞癌患者外周血循环肿瘤细胞。rn 方法：采取负性筛选策略，去除7.5 ml食管鳞癌外周血样本中的红、白细胞，富集上皮来源的稀有细胞。用免疫荧光染色技术鉴定循环肿瘤细胞。rn 结果：用Miltenyi磁珠去除红白细胞、富集肿瘤细胞，在不同临床分期的食管鳞癌患者外周血稀有细胞中可鉴定到循环肿瘤细胞。rn 结论：基于负性筛选策略的免疫荧光染色方法可有效分离鉴定食管鳞癌患者外周血循环肿瘤细胞。

摘要： 本文参照人、小鼠、大鼠和黑猩猩ERRa基因mRNA序列，取6月龄长白猪WAT总RNA，利用Touch down-PCR技术克隆猪ERRa基因的ORF序列:Western blot方法检测ERRa在6月龄长白猪WAT、心脏、肾脏、肌肉和脾脏组织中的蛋白质表达差异;细胞免疫荧光染色方法检测其在成熟脂肪细胞中的亚细胞定位；最后，利用ERRa特异性抑制剂XCT790初步探索其对成熟脂肪细胞甘油三酯聚集的影响(三个重复)。试验数据以平均数±标准误(Mean±SE)表示，采用SPSS11.5统计分析软件中的One-way ANOVA进行方差分析和显著性检验，用LSD检验不同处理间的差异。

摘要： 目的：探讨骨髓间充质干细胞在早期重症急性胰腺炎并发多脏器功能障碍综合征中的作用。rn 方法：将50只体重180～220 g Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠随机分为5组，每组10只。A组为正常对照组，不作任何处理;B组为L-精氨酸致早期重度胰腺炎(ESAP)模型组;C组为自体骨髓回输对照组，造模后1d用核染料Hoechst33258标记自体骨髓间充质干细胞(MSC)，并回输到自体骨髓腔，其余处理同B组;D组为异体骨髓移植组，在造模前3 d通过尾静脉移植雄性MSC;E组为粒细胞集落因子(G-CSF)预处理组(ESAP+GSF)，造模前3 d用核染料Hoechst33258标记自体骨髓间充质干细胞(MSC)，并回输到自体骨髓腔，在造模前3d，scG-CSF 40μg/(kg·d)，共3 d，其余处理同B组。复制SAP模型后72h处死大鼠，解剖，观察大体组织形态，包括胰腺及肝脏、肠道，一部分组织立即进行冰冻切片，荧光显微镜下观察组织中有否荧光标记的MSC出现。rn 选择有荧光的切片，进行相应组织的免疫荧光染色。对胰腺、肝脏切片进行CK19免疫荧光染色，以观察其是否分化为胰腺干细胞和肝脏干细胞。对肠道切片进行PanCytokeratin免疫荧光染色，以观察MSC是否分化为肠上皮细胞;另一部分组织常规石蜡包埋，切片后HE染色后，光镜下观察胰腺、肝脏、肠道组织学改变。记录造模后72 h内的死亡率。rn 结果：①72 h死亡率，A组为0，B组和C组为40％，C组和D组为10％。②病理损伤情况：大体观察：A组为正常的组织结构状态。B、C组在造模后72h胰腺坏死，胰周脂肪皂化，出现大量血性腹水，在死亡的大鼠中，可见肝脏、肠、肺等多脏器受累、坏死。D、E组大鼠肉眼可见腹水量明显减少，胰腺轻度水肿，无出血坏死灶。光镜观察：A组胰腺组织结构清晰，腺泡小叶完整，间质无渗出;B组、C组在造模后72 h。胰腺大片凝固性坏死，结构模糊，炎性细胞浸润;D、E组胰腺腺体小叶结构基本清晰，出血坏死减轻，间质中炎性细胞浸润较轻。A组肝脏小叶结构正常，B、C组肝细胞变性，灶状坏死，D、E组肝细胞轻度肿胀，少量炎性细胞浸润;A组大鼠肠黏膜腺体结构清楚，B、C组大鼠肠黏膜腺体紊乱，炎性细胞浸润，D、E组肠黏膜炎性细胞浸润明显减轻。③荧光染色情况：A、B组的胰腺、肝脏、肠道冰冻切片未见有黄绿色荧光;c组切片中偶见黄绿色荧光，但胰腺、肝脏切片未见CK19免疫荧光染色阳性细胞，肠道切片未见Pan Cytokeratin 免疫荧光染色阳性细胞;D组和E组切片黄绿色荧光多见，且胰腺、肝脏切片中可见CK19免疫荧光染色阳性细胞，肠道切片中可见Pan Cytokeratin免疫荧光染色阳性细胞。rn 结论：骨髓间充质干细胞参与早期重症急性胰腺炎并发肝脏、肠损伤时的病理修复，异体MSC移植和自体MSC动员对早期重症急性胰腺炎并发多脏器功能障碍综合征有保护作用。

摘要： 目的：检测划分NZB/W F1小鼠体质，将其划分为寒、常、热三种体质，并证实这些体质差异的客观性。rn 方法：采用上海中医药大学实验中医学教研室方肇勤教授课题组建立的“实验小鼠四诊工作站”，检测158只NZB/WF1小鼠体重、体温、心率、小鼠35秒活动度、爪尾色泽(r值)等指标，根据公式：权重总值=爪校正值×1+尾校正值×0.2+腋温校正值×0.7+心律校正值×0.05+跨格数×0.025计算总权重，根据“总权重值高，体质越热；总权重值低，体质越寒”的原则将NZB/WF1小鼠划分为寒体、常体和热体三种体质小鼠。分别检测不同体质小鼠肾组织羟脯氨酸含量、CTGF、TGF-β1基因表达差异和肾组织免疫荧光染色情况。rn 结果：在158只NZB/WF1小鼠中，共分出热体小鼠33只。寒体小鼠34只，常体小鼠91只。常体和寒体小鼠的肾组织羟脯氨酸含量高于热体组(p<0.01)，而常体和寒体之间没有显著差异。寒体小鼠CTGF基因表达量显著高于常体小鼠(p<0.05)，寒体与热体，热体与常体间无显著性差异。寒体小鼠TGF-β1基因表达量低于常体及热体小鼠，但尚未显示具有统计学意义。不同体质小鼠肾组织免疫荧光染色也存在一定的差异。rn 结论：NZB/WF1小鼠存在体质差别。

摘要： 目的:探讨大鼠胚神经干细胞的体外培养和诱导分化的条件。rn 方法: 从孕14d～16d的大鼠胚胎脑皮质中分离神经干细胞,在EGF, bFGF和B27联合作用下使其稳定增殖,并用10％的胎牛血清诱导其贴壁分化。应用免疫荧光染色方法行Nestin, NSE, GFAP, Galc-C免疫荧光染色,对神经干细胞及其分化的细胞进行鉴定。rn 结果:体外培养的神经干细胞增殖成神经干细胞球并传代,鉴定为Nestin染色阳性细胞,并可诱导分化为神经元细胞(NSE染色阳性细胞)、星形胶质细胞(GFAP染色阳性细胞)和少突胶质细胞(Galc-C染色阳性细胞)。rn 结论:无血清培养基中加入特定生长因子的培养技术,可培养出在体外稳定增殖并有多向分化潜能的大鼠胚神经干细胞。

摘要： 目的: 探讨神经干细胞(NSC)的原代培养及γ-氨基丁酸(GABA)能神经元的诱导分化、鉴定。方法: 取出生1～3dSD大鼠全脑，分离、培养NSC并诱导分化了GABA能神经元，用免疫荧光染色进行鉴定。结果: 培养24h后，由单细胞发展成2～4细胞神经球，随时间延长球体增大，神经球均有Nestin阳性细胞；用含10%血清分化液分化1d后，神经球开始贴壁，伸出细长突起，部分可和周边神经球伸出的突起连接。神经球周边见大量散在贴壁的双极或多极细胞。免疫荧光染色可见NSE、GABA、GLU、GFAP阳性细胞。加了分化液的实验组GABA阳性细胞分化率为(30.25±2.12)%；而对照组分化率为(1.14±1.39)%。结论: 成功从新生大鼠脑组织中分离、培养了NSC，并能较大比率分化GABA能神经元。

摘要： 本文目的是研究冷冻后猪体外成熟卵母细胞的骨架变化与体外发育的能力,采用玻璃化冷冻方法保存猪体外成熟卵母细胞,分析玻离化冷冻液处理和OPS冷冻-解冻后的卵母细胞外部形态、微管和染色体形态,以及冷冻后卵母细胞孤雌发育能力.体外成熟培养44h的猪卵母细胞(MII期)随机分为毒性试验组、OPS/-T冷冻组、OPS/+T冷冻组和对照组(不处理).卵母细胞分别处理后外部形态特征进行鉴定供免疫荧光染色实验和孤雌发育实验使用.实验结果表明:玻璃化冷冻明显地损伤了猪成熟卵母细胞纺锤体和染色体形态,玻璃化冷冻显著地降低其电激活后孤雌发育能力.EDFS40对猪成熟卵母细胞纺锤体有损害作用.Taxol可以减轻冷冻对纺锤体的损伤,明显地提高冷冻后卵子的孤雌发育能力.

摘要： 发明人提出一种杂交捕获免疫荧光分析法，通过杂交捕获获取待测样本中的目标核酸片段，通过荧光信号识别，对样本中目标核酸进行检测和一种用于核酸杂交捕获免疫荧光检测的免疫荧光层析试条和试剂盒。核酸杂交捕获免疫荧光检测方法快速，操作简单，加样后的反应过程中在常温中进行，无变温环节，而且检测灵敏度与市场上同类产品一致。

摘要： 本发明提出了免疫荧光层析检测试纸条、免疫荧光层析检测系统以及确定样品中待测物含量的方法。所述免疫荧光层析检测试纸条包括：本体，所述本体上限定出依次相连的样品区、结合区、检测区、吸附区；荧光微球标记的第一抗体，所述第一抗体包被于所述结合区，所述第一抗体特异性识别待测物；检测线和质控线，所述检测线和质控线设置在所述检测区中；第二抗体，所述第二抗体包被于所述检测线上，所述第二抗体特异性识别所述待测物；以及第三抗体，所述第三抗体包被于所述质控线上，所述第三抗体特异性识别所述第一抗体，其中，所述荧光微球为近红外II区高分子荧光微球。利用本发明的免疫荧光层析检测试纸条检测的准确性强、灵敏度高、精密度高。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及增强LGI1免疫荧光的方法、LGI1抗体的免疫荧光检测方法及应用。本发明利用共表达LGI1和ADAM22；或共表达LGI1和ADAM23的方式增强LGI1免疫荧光，所述ADAM22蛋白或ADAM23蛋白可以促使细胞内LGI1驻留在细胞膜上，并且捕获细胞外的LGI1，能够增强LGI1免疫荧光信号，只需微量的ADAM22或ADAM23质粒即可检测出LGI1信号，解决免疫荧光检测血清中LGI1自身抗体信号差的问题。

摘要： 本发明涉及一种独立多通道免疫荧光微流控芯片和免疫荧光检测方法。该独立多通道免疫荧光微流控芯片包含至少两个独立的通道，每个通道包含依次连接的等量均分流道、过滤区、缓冲区、荧光包被区、时控阀门、检测区和废液区，各个通道的等量均分流道连接同一个进液口。本发明的独立多通道免疫荧光微流控芯片，在进样本阶段即对液体进行等量均分，不同通道拥有独立的荧光抗体包被区以及时空阀门，拥有独立的废液区，解决了不同检测项目可能造成互相干扰的问题；每个独立通道可以集成互相不干扰的多个检测项目，在实现了高通量的同时，提高了检测精度和效率，降低了成本。

摘要： 本发明提供一种免疫荧光检测系统，包括：主控模块，包括主通信接口；驱动模块，与所述主通信接口连接，包括至少两个驱动接口和至少两个光耦接口，其中，每个所述驱动接口与至少两个步进电机连接，每个所述光耦接口与一光耦连接；所述主控模块根据用户所选择的样本检测项目，执行调度控制，所述驱动模块响应于所述调度控制，根据用户所选择的样本检测项目，生成相应步进电机和光耦的控制指令，以控制相应步进电机执行相应操作并监控相应光耦，从而进行样本检测项目。本发明还提供了其控制方法。本发明拓展性强，可支持多个步进电机和光耦。并且可以实现不同模块的升级更新。

摘要： 发明人提出一种杂交捕获免疫荧光分析法，通过杂交捕获获取待测样本中的目标核酸片段，通过荧光信号识别，对样本中目标核酸进行检测和一种用于核酸杂交捕获免疫荧光检测的免疫荧光层析试条和试剂盒。核酸杂交捕获免疫荧光检测方法快速，操作简单，加样后的反应过程中在常温中进行，无变温环节，而且检测灵敏度与市场上同类产品一致。

摘要： 本发明提供了一种免疫荧光分析装置与免疫荧光分析方法，所述免疫荧光分析装置包括黑色滤膜，所述免疫荧光分析方法采用黑色滤膜截留被荧光标记抗体染色的待检测对象，同时滤过未与待检测对象结合的荧光标记抗体，之后采用荧光检测装置对所述黑色滤膜表面的截留物进行分析，实现荧光点的阅读和计数；所述免疫荧光分析方法的操作步骤简单，分析成本低，并且检测结果准确；所述免疫荧光分析装置的结构简单，生产成本低，使用方便，检测效果好；本发明的免疫荧光分析装置与免疫荧光分析方法能够广泛使用，不仅适用于大型医院与专业的实验室，在基层的医疗机构也能广泛使用。

摘要： 本发明提出了免疫荧光层析检测试纸条、免疫荧光层析检测系统以及确定样品中待测物含量的方法。所述免疫荧光层析检测试纸条包括：本体，所述本体上限定出依次相连的样品区、结合区、检测区、吸附区；荧光微球标记的第一抗体，所述第一抗体包被于所述结合区，所述第一抗体特异性识别待测物；检测线和质控线，所述检测线和质控线设置在所述检测区中；第二抗体，所述第二抗体包被于所述检测线上，所述第二抗体特异性识别所述待测物；以及第三抗体，所述第三抗体包被于所述质控线上，所述第三抗体特异性识别所述第一抗体，其中，所述荧光微球为近红外II区高分子荧光微球。利用本发明的免疫荧光层析检测试纸条检测的准确性强、灵敏度高、精密度高。

摘要： 本发明公开了一种悬浮细胞球免疫荧光染色方法及染色装置，属于对测试用样品着色的方法，所述染色方法包括以下步骤：细胞球和培养基的分离、固定液固定、Triton X‑100通透细胞、封闭液封闭、抗目的蛋白的一抗工作液的加入、抗一抗的荧光二抗工作液的加入、DAPI染液染色细胞核。染色装置包括细胞小室和套装于细胞小室下端外部的染色套件。本发明悬浮细胞球免疫荧光染色方法具有高效、简便等优点，节约抗体用量，节约实验成本，节约人力和时间，在不改变免疫荧光染色基本原理、实验人员不需特别培训的基础上，得到准确可靠的实验结果，避免细胞球在实验操作过程中的丢失，提高实验的成功率，提高效率。

摘要： 本发明公开了一种悬浮细胞球免疫荧光染色方法及染色装置，属于对测试用样品着色的方法，所述染色方法包括以下步骤：细胞球和培养基的分离、固定液固定、Triton？X-100通透细胞、封闭液封闭、抗目的蛋白的一抗工作液的加入、抗一抗的荧光二抗工作液的加入、DAPI染液染色细胞核。染色装置包括细胞小室和套装于细胞小室下端外部的染色套件。本发明悬浮细胞球免疫荧光染色方法具有高效、简便等优点，节约抗体用量，节约实验成本，节约人力和时间，在不改变免疫荧光染色基本原理、实验人员不需特别培训的基础上，得到准确可靠的实验结果，避免细胞球在实验操作过程中的丢失，提高实验的成功率，提高效率。