克隆猪

摘要： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物基因工程与种质创新科技创新团队联合深圳农业基因组研究所动物基因组研究中心,成功建立了一种名为报告RNA富集的双引导RNA核蛋白(RE-DSRNP)的高效编辑技术体系,可用于快速制备无外源DNA基因编辑克隆猪,并利用该体系首次成功获得了WIP1基因编辑的雄性繁殖障碍模型猪。相关研究成果发表在《中国科学:生命科学》上。

摘要： 研究建立高效制备基因编辑猪技术体系近日,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物基因工程与种质创新科技创新团队联合深圳农业基因组研究所动物基因组研究中心,成功建立了一种名为报告RNA富集的双引导RNA核蛋白(RE-DSRNP)的高效编辑技术体系,可用于快速制备无外源DNA基因编辑克隆猪,并利用该体系首次成功获得了WIP1基因编辑的雄性繁殖障碍模型猪。

摘要： 克隆已成为常被提及的词汇,克隆大多是利用一些生物技术经无性生殖培养出和原来的个体有完全相同基因的个体或者种群。克隆猪具有重要的应用价值,包括培养优良种猪、制备基因修饰猪、保护珍贵和濒危猪种等。要获得特定基因型的克隆猪,受到很多因素的影响,有关克隆猪的技术,科学家一直在探索和研究。该文针对克隆猪的相关研究,论述有关克隆猪的技术研究方法、发展、应用及重要意义。

摘要： 首批体细胞克隆猪在浙江诞生"两头乌"是浙江金华的地方特色猪种,最近这个家族迎来了特殊的"新成员"。在金华市东阳良种场的试验基地里,1头代孕母猪顺利产下7头冷冻体细胞克隆纯种金华猪,平均体重1.12千克。据悉,这是我国首批利用液氮冷冻保存的体细胞克隆的金华猪,是在浙江出生的首批克隆猪。该项技术将应用于地方猪种质资源保护。

摘要： 克隆又称体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT),是一种将已分化的细胞重编程恢复全能性而生产与供体细胞基因型完全相同后代的无性繁殖技术.猪的克隆技术具有重要的应用价值,包括扩繁优良种猪、制备基因修饰猪、保护珍贵和濒危猪种以及研究猪体细胞重编程机制.然而,克隆猪存在出生率和初生重低以及死胎率、新生期死亡率和畸形率高等问题,这些都严重影响了克隆猪的应用前景.供体核的表观重编程错误被认为是克隆效率低和胚胎发育异常的主要原因,但是目前大多数研究通过修正表观重编程错误并没有大幅度提高克隆猪的出生率和健康率.本文综述了克隆猪的异常表型、发育异常的原因以及提高猪克隆效率的有效方法,以期为提高克隆猪的成活率提供参考.

摘要： 我本科毕业于山东大学,硕士和博士均毕业于东北农业大学,先后在东北农业大学、中国科学院动物研究所、美国科罗拉多州立大学和犹他州立大学工作过。2007年,作为教育部''长江学者特聘教授''来到内蒙古大学工作。10余年来,我主要在三方面取得了突出业绩,即''引领一个学科,带好一个团队,开创一个领域''。

摘要： 目前,已被克隆的高等物种有20多种,其中克隆牛和鼠诞生于1997年,和人类相近的猕猴＂泰特拉＂在1999年,被美国科学家利用胚胎分裂的方式克隆成功,克隆猪出现于2000年,克隆兔、骡子、鹿和马则在2003年成功,克隆狗、果蝇在2005年诞生,2009年,克隆骆驼在迪拜诞生。都知道咱们的＂美猴王＂孙悟空擅长＂七十二变＂,拔一把毫毛,念一句咒语＂变＂,即可变成千百只小猴与妖怪打斗,让众路神仙羡慕不已。

摘要： 3月27日，深圳国家基因库与深圳野生动物园达成战略合作，共同打造“国家基因库野生动物资源及科普教育基地”。在此次合作中，深圳野生动物园将发挥自身在生物多样性资源收集，尤其是动物活体资源方面的优势，为深圳国家基因库建设动物活体展示平台提供全面支持。由华大基因利用克隆技术繁育的“GHR克隆猪”也在深圳野生动物园首次展出，受到现场游客的追捧。

摘要： 中新网天津7月3日电，近日一份特殊的“亲子鉴定”报告出炉，13头克隆小猪与“代孕”母亲无血缘关系。这从医学上证明了，世界首例机器人操作的体细胞克隆猪在中国天津诞生。

摘要： 据中新网消息,经过两个多月的漫长等待，一份特殊的“亲子鉴定”报告出炉，13头克隆小猪与“代孕”母亲无血缘关系，仅与供体细胞存在“亲子关系”。这从医学上证明了，世界首例机器人操作的体细胞克隆猪在中国天津诞生。

摘要： 开展了9窝45头手工克隆猪的生长性能测定.结果表明,克隆猪死淘率太高,哺乳阶段死淘率为48.88％,保育阶段死淘率为43.48％,生长阶段死淘率为30.77％,育肥阶段死淘率为66.67％,全期死淘率高达93.33％.临床症状和比例剖解结果显示,克隆猪死淘原因主要是抗病力差,普遍存在呼吸系统和循环系统障碍,与克隆猪心肺功能异常有关。

摘要： 通过跟踪观察9窝45头克隆猪从出生到育肥的死淘情况,探讨克隆猪的存活力.结果表明,克隆猪死淘率太高,哺乳阶段死淘率为48.89％ (22/45),保育阶段死淘率为43.48％ (10/23),生长阶段死淘率为30.77％(4/13),育肥阶段死淘率为66.67％ (6/9),全期死淘率高达93.33％(42/45).临床症状和病理剖解结果显示,克隆猪死淘原因主要是抗病力差、普遍存在呼吸系统和循环系统障碍,与克隆猪心肺功能异常有关。

摘要： 自从2000年首例克隆猪出生报道以来,近十多年,陆续有克隆猪出生的报道,然而,克隆猪的效率仍然较低.对于供体细胞对于克隆效率的影响,目前主要集中在细胞的传代次数、细胞周期、细胞的类型(颗粒细胞、成纤维细胞等)等方面,猪的品种较多,表型差异较大,不同品种间克隆效率是否存在差异,目前还尚未得知,本文比较不同品种间克隆胚胎的体外、体内发育效率,试图找出其中的差异.

摘要： 为了探求核移植过程中DNA甲基化重编程是否充分,运用亚硫酸氢盐测序法分别检测新生死亡克隆猪和同期正常猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏组织中IGF2/H19基因印迹控制区(DMR1,DMR2,DMR3)的甲基化状态.结果发现,DMR1、DMR3在克隆猪和正常猪各组织的甲基化水平不同,但显著不差异(P＞0.05).DMR2在克隆猪肺脏组织表现为超甲基化,极显著高于正常猪(P＜0.0),并且10个测序克隆中存在两处连续的全甲基化CpG位点(分别为4-9位和12-17位),而在其它组织中甲基化差异不显著(P＞0.05).结果说明,DMR2在克隆猪肺脏组织可能存在DNA甲基化重编程紊乱,这也可能是导致该克隆猪死亡的因素之一。

摘要： 为了探求核移植过程中DNA甲基化重编程是否充分,运用亚硫酸氢盐测序法分别检测新生死亡克隆猪和同期正常猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏组织中IGF2/H19基因印迹控制区(DMR1,DMR2,DMR3)的甲基化状态.结果发现,DMR1、DMR3在克隆猪和正常猪各组织的甲基化水平不同,但显著不差异(P＞0.05).DMR2在克隆猪肺脏组织表现为超甲基化,极显著高于正常猪(P＜0.0),并且10个测序克隆中存在两处连续的全甲基化CpG位点(分别为4-9位和12-17位),而在其它组织中甲基化差异不显著(P＞0.05).结果说明,DMR2在克隆猪肺脏组织可能存在DNA甲基化重编程紊乱,这也可能是导致该克隆猪死亡的因素之一.

摘要： 本实验采用亚硫酸氢盐测序法对H19和/GF2R基因在新生克隆猪心脏、肝脏、脾 脏、肺脏和肾脏中的甲基化状态进行检测,通过比对其与正常猪各组织甲基化程度的差异,以求找出导致克隆猪死亡的可能原因.

摘要： 克隆猪由于出生时体质相对较弱，在哺乳期易受断奶应激和疾病流行的威胁，造成疾病和死亡。本文结合实际工作，总结出应在抓好哺乳、减少应激、建立免疫耐受力等方面加强饲养管理，减少疾病发生，提高仔猪成活率，保证优秀种猪的克隆个体能够发挥优良的生产性能。

摘要： 本研究旨在通过克隆猪促性腺激素抑制激素(GnIH)及其受体GPR147、GPR74基因片段并进行序列分析，研究GnIH及其受体mRNA在各组织及母猪发情周期内不同时期生殖轴(HPG轴)的基因表达变化，为深入探讨GnIH及其受体介导的多种生理功能尤其是GnIH参与猪的生殖调控提供理论依据。本研究显示GPR147, GPR74 mRNA在组织中广泛表达，而在间脑和垂体中表达含量最高，印证GnIH可通过其受体调控间脑和垂体中其他激素的合成释放。研究GnIH及其受体GPR 147,GPR74 mRNA在下丘脑-垂体-卵巢轴的表达变化显示发情后期表达含量最高，这与正向调控发情周期的主要激素变化趋势相反，预示着GnIH及其受体可能参与母猪生殖活动的调节。

摘要： 本研究发现猪克隆胚胎在8细胞前DNMT1 mRNA水平显著高于同期的受精胚胎，这种异常的DNMT1表达水平可能会干扰正常的去甲基化。为此，本试验在化学辅助激活2小时后向重构胚胎注射抗DNMT1 siRNA，研究其对克隆胚发育性能、甲基化重编程效率以及基因表达的影响，以期为开发提高猪体细胞克隆效率的方法提供研究基础。

摘要： 本研究发现猪克隆胚胎在8细胞前DNMT1 mRNA水平显著高于同期的受精胚胎，这种异常的DNMT1表达水平可能会干扰正常的去甲基化。为此，本试验在化学辅助激活2小时后向重构胚胎注射抗DNMT1 siRNA，研究其对克隆胚发育性能、甲基化重编程效率以及基因表达的影响，以期为开发提高猪体细胞克隆效率的方法提供研究基础。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗猪急性腹泻综合征冠状病毒（SADS‑CoV）N蛋白单克隆抗体。本发明将全长N蛋白基因克隆至pET32a载体中，构建出原核表达重组质粒pET32a‑N，通过诱导表达、蛋白纯化获得纯化的N蛋白。将纯化的N蛋白免疫Balb/c小鼠，随后取免疫鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞融合，筛选获得两个抗N蛋白的单克隆抗体，分别命名为4B10和6E8。通过截短表达，发现该抗体能特异性识别并结合N蛋白的N端区域，4B10和6E8识别区域是64～84aa。本发明提供的上述单克隆抗体，可利用基因工程或蛋白质工程方法获得。该抗体能特异性识别SADS‑CoV，对病毒还具有中和活性，为探究SADS‑CoV致病机制的研究、早期检测试剂盒和治疗性抗体的开发提供了新的原材料。

摘要： 本发明涉及猪IgG3的单克隆抗体、该单克隆抗体特异性识别的抗原表位肽及其应用。所述单克隆抗体包括抗体重链和抗体轻链，所述抗体重链的CDR1‑3的氨基酸序列依次为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3；所述抗体轻链的CDR1‑3的氨基酸序列依次为SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6。本发明提供的猪IgG3的单克隆抗体可以特异性识别猪血清中的IgG3，特异性强，灵敏度高，Western检测仅IgG3有条带，ELISA检测仅与IgG3有明显反应，而与其他亚型的反应与转染空载体的293T细胞相当。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种全猪源非洲猪瘟病毒P30蛋白单克隆抗体、该单克隆抗体的表位及其应用。所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2，SEQ ID NO:3，SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5所示。该抗体能够特异性的识别并结合P30蛋白的区域为61～100 aa。该抗体保留了轻链、重链可变区的天然配对，具有基因多样性好、全猪源、抗体亲和力好、特异性强等优势，也为探究P30蛋白的功能提供了可靠的研究工具。本发明为开发非洲猪瘟病毒诊断试剂盒提供了新型原材料，也为研制全猪源单克隆抗体的预防与治疗性药物提供了新的技术支持。

摘要： 本发明公开了一种抗猪Gasdermin D蛋白单克隆抗体、分泌该单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用。本发明所述的一种抗猪Gasdermin D蛋白单克隆抗体，由保藏编号为CGMCC No.22321的杂交瘤细胞株分泌产生。实验证明，所述的单克隆抗体对猪Gasdermin D蛋白具有反应特异性，所述的单克隆抗体不仅能够检测猪GSDMD全蛋白，还能够检测活化切割后的猪GSDMD蛋白羧基端节段。本发明的提出对猪GSDMD生物学功能的研究具有重要意义。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种全猪源非洲猪瘟病毒P30蛋白单克隆抗体、该单克隆抗体的表位及其应用。所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2，SEQ ID NO:3，SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5所示。该抗体能够特异性的识别并结合P30蛋白的区域为61～100 aa。该抗体保留了轻链、重链可变区的天然配对，具有基因多样性好、全猪源、抗体亲和力好、特异性强等优势，也为探究P30蛋白的功能提供了可靠的研究工具。本发明为开发非洲猪瘟病毒诊断试剂盒提供了新型原材料，也为研制全猪源单克隆抗体的预防与治疗性药物提供了新的技术支持。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗猪急性腹泻综合征冠状病毒（SADS‑CoV）N蛋白单克隆抗体。本发明将全长N蛋白基因克隆至pET32a载体中，构建出原核表达重组质粒pET32a‑N，通过诱导表达、蛋白纯化获得纯化的N蛋白。将纯化的N蛋白免疫Balb/c小鼠，随后取免疫鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞融合，筛选获得两个抗N蛋白的单克隆抗体，分别命名为4B10和6E8。通过截短表达，发现该抗体能特异性识别并结合N蛋白的N端区域，4B10和6E8识别区域是64～84aa。本发明提供的上述单克隆抗体，可利用基因工程或蛋白质工程方法获得。该抗体能特异性识别SADS‑CoV，对病毒还具有中和活性，为探究SADS‑CoV致病机制的研究、早期检测试剂盒和治疗性抗体的开发提供了新的原材料。

摘要： 本发明属于免疫学领域，涉及一株分泌猪IFN‑λ4单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其分泌的单克隆抗体与应用。杂交瘤细胞株λ4‑1A2的保藏编号：CCTCC NO:C2022132。该单克隆抗体的轻链可变区包括SEQ ID NO:3所示的CDR1、氨基酸序列为LVS的CDR2和SEQ ID NO:4所示的CDR3；重链可变区包括SEQ ID NO:7所示的CDR1、SEQ ID NO:8所示的CDR2和SEQ ID NO:9所示的CDR3。该单克隆抗体可以用在检测sIFN‑λ4中。本发明的杂交瘤细胞株λ4‑1A2所分泌的单克隆抗体具有良好特异性，可以特异性识别原核及真核表达的sIFN‑λ4重组蛋白。

摘要： 本发明公开了完整的猪Xist基因序列，并公开了提高猪克隆效率的方法。本发明利用生物信息学方法电子克隆猪Xist基因序列，并对序列进行验证分析，得到猪Xist基因序列。设计并合成anti-XistsiRNA序列，用分子生物学技术筛选出有效的anti-Xist siRNA序列，用anti-Xist siRNA抑制核移植重构胚或核移植供核细胞中Xist基因表达，来提高猪克隆胚胎发育的质量，以期达到提高猪克隆效率的目的。本技术首次获得完整的猪Xist序列及anti-Xist siRNA序列，同时，此技术可提高猪克隆胚胎体外发育的质量，而猪克隆效率的提高无论是在畜牧生产领域、科研领域还是医学领域都将具有十分重要的意义。

摘要： 本发明公开了表达绿色荧光蛋白(GFP)的克隆猪和敲除1，3－半乳糖基转移酶(GT)基因的克隆猪。本发明还公开了生产这些克隆猪的方法，该方法包括下列步骤：建立体细胞系；制备转染GFP或敲除GT基因的核供体细胞；用核供体细胞和受体卵母细胞产生转基因核移植胚胎；将转基因核移植胚胎移植到代孕母猪体内。本发明中表达GFP的克隆猪有利于大规模生产动物疾病模型，而且敲除GT基因的克隆猪可以被用作器官供体，使人体中不产生超急性免疫排斥的异种移植成为可能。

摘要： 本发明公开了完整的猪Xist基因序列，并公开了提高猪克隆效率的方法。本发明利用生物信息学方法电子克隆猪Xist基因序列，并对序列进行验证分析，得到猪Xist基因序列。设计并合成anti-XistsiRNA序列，用分子生物学技术筛选出有效的anti-Xist siRNA序列，用anti-Xist siRNA抑制核移植重构胚或核移植供核细胞中Xist基因表达，来提高猪克隆胚胎发育的质量，以期达到提高猪克隆效率的目的。本技术首次获得完整的猪Xist序列及anti-Xist siRNA序列，同时，此技术可提高猪克隆胚胎体外发育的质量，而猪克隆效率的提高无论是在畜牧生产领域、科研领域还是医学领域都将具有十分重要的意义。