低温驯化

摘要： 【目的】本研究通过克隆意大利蝗Calliptamus italicus卵海藻糖酶基因,分析其在蝗卵不同发育阶段的表达及低温驯化后的表达变化,阐明海藻糖酶基因在意大利蝗卵抵御低温胁迫过程中的作用。【方法】利用RT-PCR技术扩增蝗卵海藻糖酶基因的ORF全长序列,并进行生物信息学分析;利用RT-qPCR分析检测常温(27°C)和低温(0°C)驯化15 d海藻糖酶基因在蝗卵早期、滞育和滞育解除阶段的表达变化。【结果】克隆获得意大利蝗卵4个海藻糖酶基因,分别命名为CiTreM1,CiTreM2,CiTreS1和CiTreS2(GenBank登录号分别为MZ669810,MZ669811,MZ669812和MZ669813)。其编码蛋白中,CiTreM1和CiTreM2为膜结合型海藻糖酶,CiTreS1和CiTreS2为可溶型海藻糖酶。CiTre基因在意大利蝗卵各发育阶段均表达,常温(27°C)下,CiTreS1和CiTreS2在卵早期阶段表达水平最高,CiTreM2在卵滞育阶段表达水平最高,CiTreM1在卵滞育解除阶段表达水平最高。低温(0°C)驯化15 d后CiTreM1和CiTreM2表达量在意大利蝗卵发育的3个阶段均增加,CiTreS1和CiTreS2仅在蝗卵早期阶段表达量下降,其他阶段表达量增加;低温驯化后CiTreM1和CiTreM2的表达量在意大利蝗卵早期阶段增幅最大,CiTreS1和CiTreS2在蝗卵滞育解除阶段的增幅最大。低温(0°C)驯化15 d后,在意大利蝗卵同一阶段4个CiTre基因的表达量明显不同,卵早期阶段和滞育阶段CiTreM2表达量最大,滞育解除阶段CiTreS1表达量最大。【结论】克隆获得的4个意大利蝗卵海藻糖酶基因均参与了蝗卵发育过程,根据低温驯化前后表达量变化幅度判断,CiTreM2和CiTreS1在意大利蝗卵抵御低温胁迫过程中发挥着关键作用。

摘要： 为探究麦蛾茧蜂成虫的最适冷藏方式,以5°C作为冷藏温度,研究了低温驯化、冷藏方式和冷藏时间对其存活率、寿命、繁殖力、产卵前期、产卵天数和麻痹率的影响。结果表明,经15°C驯化5 d后再于5°C冷藏,麦蛾茧蜂成虫的寿命均显著高于其他处理。低温驯化冷藏和直接冷藏两种方式均显著延长了麦蛾茧蜂的产卵前期。冷藏30 d后,低温驯化冷藏麦蛾茧蜂的存活率、麻痹率和繁殖力显著高于直接冷藏的麦蛾茧蜂,但与对照无显著差异,产卵天数在各处理间无显著差异。因此,15°C低温驯化5 d后再于5°C冷藏30 d是麦蛾茧蜂最适宜的冷藏条件。

摘要： 以17份马铃薯材料为试材,研究在低温驯化前后,马铃薯叶片在低温胁迫下电解质外渗率的变化规律,经Logistic方程拟合分析测定马铃薯的低温半致死温度(LT50),结合聚类分析和田间自然霜冻鉴定等方法,对试材耐寒性和耐寒类型进行评价,为指导马铃薯耐寒栽培及新品种推广提供理论依据.结果表明,相对电导率与处理温度呈"S"形曲线变化,与Logistic方程相吻合;田间自然霜冻鉴定结果和室内电导率鉴定均可以有效评价马铃薯材料的耐寒性;17份试材无低温驯化能力或驯化能力较弱,其中桂龙薯1号、泉云4号和V201707表现出较强的耐寒性,可供耐寒性育种亲本使用.

摘要： 海滨雀稗Supreme(SP)品种为供试材料,通过测定叶片叶绿素含量、相对含水量、电导率、丙二醛、过氧化氢、超氧阴离子等指标,探明了低温驯化对海滨雀稗抗寒性相关生理指标的影响.结果表明,海滨雀稗在低温胁迫下电导率、丙二醛、过氧化氢、超氧阴离子含量明显升高,相对含水量和叶绿素含量明显下降.经过低温驯化后,能够有效减少电导率、丙二醛、过氧化氢、超氧阴离子含量的升高,缓解叶绿素含量和相对含水量的下降,从而提高海滨雀稗对低温胁迫的耐受程度.

摘要： 海滨雀稗Supreme(SP)品种为供试材料,通过测定叶片叶绿素含量、相对含水量、电导率、丙二醛、过氧化氢、超氧阴离子等指标,探明了低温驯化对海滨雀稗抗寒性相关生理指标的影响。结果表明,海滨雀稗在低温胁迫下电导率、丙二醛、过氧化氢、超氧阴离子含量明显升高,相对含水量和叶绿素含量明显下降。经过低温驯化后,能够有效减少电导率、丙二醛、过氧化氢、超氧阴离子含量的升高,缓解叶绿素含量和相对含水量的下降,从而提高海滨雀稗对低温胁迫的耐受程度。

摘要： 采用Illumina MiSeq高通量测序技术,对中、低温(中温25°C、低温10 °C)富集驯化所得水稻秸秆降解菌系进行测序;采用生物信息学方法对中、低温秸秆降解菌系群落生物多样性进行分析.结果表明,测序质控后获得601 489条16S rDNA序列,平均长度273 bp,经Silval 132数据库比对,中温降解菌系包括18个门,172个属,302个OTU,其中优势菌属为弓形杆菌属(Arcobacter)、拟杆菌属(Bacteroides)、屠场杆菌属(Macelli-bacteroides)、假单胞菌属(Pseudomonas)和梭形杆菌属(Lysinibacillus);低温降解菌系包括16个门,169个属,280个OTU,其中优势菌属为弓形杆菌属、屠场杆菌属、拟杆菌属、丛毛单胞属(Comamonas)和假单胞菌属.温度对降解菌系中优势菌门的相对丰度无显著影响,中、低温秸秆降解菌系主要菌属相对丰度差异显著.

摘要： 为探讨低温驯化对南方小花蝽雌成虫冷藏的影响,在室内15°C下饲养7d作为低温驯化处理,研究了驯化后与未驯化的南方小花蝽雌成虫分别在4、6和10°C下冷藏其寿命、存活率和致死中时间(LT50)的异同.结果 表明,无论是否进行低温驯化,南方小花蝽雌成虫的寿命都显著大于对照(25°C下饲养).在10°C冷藏条件下,是否经过低温驯化对南方小花蝽雌成虫寿命没有明显影响,但在4°C和6°C条件下,低温驯化能明显延长雌成虫的寿命,分别延长了80.7％和83.7％.南方小花蝽雌成虫存活率均随冷藏时间的延长而下降,在同一低温冷藏温度下经低温驯化处理的南方小花蝽存活率比未驯化的高.经低温驯化的南方小花蝽雌成虫在4、6和10°C冷藏时,其LT50分别比未经驯化的延长了30.0％、57.8％和40.4％.以上结果表明南方小花蝽的寿命具有可塑性,低温驯化有利于南方小花蝽的冷藏,6°C可作为南方小花蝽长期储藏的温度.

摘要： 旨在探索低温驯化对斑马鱼胚胎线粒体DNA(mtDNA)拷贝数及胚胎低温发育能力的影响.27°C发育至性成熟的斑马鱼,在22°C驯化6个月,构建低温驯化模型.驯化组与未驯化组分别交配产卵后,收集0 hpf胚胎,在22°C和20°C下发育并观察胚胎的低温发育能力.提取0 hpf以及8 hpf、12 hpf、24 hpf 4个时期的胚胎DNA,通过绝对荧光定量PCR比较分析胚胎中mtDNA拷贝数的变化情况.结果显示,低温驯化后斑马鱼0 hpf胚胎mtDNA拷贝数显著低于未驯化组胚胎mtDNA拷贝数,且mtDNA拷贝数在胚胎发育后期的3个不同时期仍低于未驯化组胚胎,但差异逐渐缩小.同时,相比于未驯化胚胎,低温驯化后的斑马鱼胚胎在22°C低温具有更高的成活率,且可以在20°C低温胁迫下成活.研究表明,低温驯化致使斑马鱼胚胎mtDNA拷贝数降低,同时提高了斑马鱼胚胎的低温发育能力.

摘要： 以长白山牛皮杜鹃为实验材料,探究了低温驯化对牛皮杜鹃光合作用的影响及H2 O2信号在低温驯化中的作用.将牛皮杜鹃分别进行低温驯化培养(18/16°C)和正常培养(25/18°C).8个月后,将实验材料分为4组,每组12棵,低温驯化植株分别用蒸馏水和50μmol/L的二联甲苯(DPI,一种NADPH氧化酶的抑制剂)预处理3 d,作为CA组和DPI+CA组,未驯化牛皮杜鹃为NA组和对照组(Control).DPI+CA,CA和NA组同时4°C冷胁迫48 h,恢复培养24 h.通过对叶绿素荧光参数进行测定分析,结果表明:冷胁迫会使牛皮杜鹃的光系统Ⅱ受损导致光合能力下降,表现在Fo、Fm、qP的下降以及NPQ的增加,这些光合参数变化的原因是光抑制的产生和光能利用率的下降.低温驯化可以有效缓解冷胁迫对牛皮杜鹃的光系统Ⅱ产生的影响,减轻光抑制、提高光能利用效率,光合作用增强.CA+DPI组的各参数结果说明H2 O2信号参与了冷胁迫下低温驯化使牛皮杜鹃光合作用提高的过程,在低温驯化调控中发挥积极作用.本研究为提高植物抗寒性的研究提供理论基础.

摘要： 为探讨低温驯化对南方小花蝽雌成虫冷藏的影响,在室内15°C下饲养7d作为低温驯化处理,研究了驯化后与未驯化的南方小花蝽雌成虫分别在4、6和10°C下冷藏其寿命、存活率和致死中时间(LT50)的异同。结果表明,无论是否进行低温驯化,南方小花蝽雌成虫的寿命都显著大于对照(25°C下饲养)。在10°C冷藏条件下,是否经过低温驯化对南方小花蝽雌成虫寿命没有明显影响,但在4°C和6°C条件下,低温驯化能明显延长雌成虫的寿命,分别延长了80.7%和83.7%。南方小花蝽雌成虫存活率均随冷藏时间的延长而下降,在同一低温冷藏温度下经低温驯化处理的南方小花蝽存活率比未驯化的高。经低温驯化的南方小花蝽雌成虫在4、6和10°C冷藏时,其LT50分别比未经驯化的延长了30.0%、57.8%和40.4%。以上结果表明南方小花蝽的寿命具有可塑性,低温驯化有利于南方小花蝽的冷藏,6°C可作为南方小花蝽长期储藏的温度。

摘要： 低温胁迫是限制马铃薯生长的主要因素之一，导致产量严重下降，但马铃薯在一定的非伤害性温度下低温锻炼一段时间后，能够提高自身的抗寒性。本试验选用6个二倍体和4个四倍体马铃薯作为试验材料，研究低温驯化前后马铃薯叶片的电导率变化，配合Logistic方程确定半致死温度，对其抗寒性进行评价。本研究中采用的10个马铃薯材料经低温驯化后，半致死温度降低的幅度均不高，表明不同材料间低温驯化能力差异较大。

摘要： 昆虫滞育与耐寒性关系的研究一直是国内外研究的热点。对中华通草蛉试验种群的研究表明,滞育和低温驯化都能增强成虫的耐寒性,两个因素对耐寒性的增强具有微弱的协同作用。未经过低温驯化的非滞育成虫的过冷却点为-12.98°C。经过低温驯化的滞育成虫的过冷却点为-15.95°C,经过低温驯化的非滞育成虫的过冷却点为-15.66°C,可以认为,非滞育成虫具有与滞育成虫相等的低温驯化潜力,在存在低温因子对成虫进行驯化的前提下,滞育对耐寒性的增强作用很微弱甚至可以忽略。

摘要： 以低温驯化后的紫贻贝为研究对象,进行了低温无水保活实验,对紫贻贝在6°C、3°C、1°C、-1°C和-2°C贮藏条件下的保活效果进行了研究.结果表明:紫贻贝的生态冰温区为(-1.6～4.0),在1～3°C条件下保活效果最好,开壳率低、肥满度高,并且保活5d后的存活率显著高于其他实验组.水分含量在整个保活过程中基本保持恒定.最终确定2±1°C是紫贻贝无水保活的适宜温度.

摘要： 本发明提供一种百香果北方低温驯化方法，包括获取百香果扦插幼苗、第二年春季移栽、第二年夏季扦插、第二年越冬、第三年春季移栽、第三年夏季扦插，以及第三年越冬的驯化步骤。百香果苗在扦插当年，经过在北方温室越冬，百香果苗成活率较低；经本发明的特定驯化方法，第二年越冬，百香果苗的成活率大大提高；第三年越冬百香果的成活率显著提高。

摘要： 本发明公开了一种低温驯化昆虫为早春作物授粉方法，待大头金蝇成虫性成熟交配后产卵，卵孵化为幼虫，大头金蝇初孵幼虫放于气候箱中进行低温驯化环境的饲养，气候箱温度为15‑25摄氏度，大头金蝇初孵幼虫在气候箱养至初羽化成虫，将大棚分为多厢，每厢内种植油菜父本和油菜母本，大头金蝇释放授粉，本发明将大头金蝇进行低温驯化，提高其耐寒能力与低温活动能力，再释放到大棚，为农业生产提供一种崭新的提高昆虫早春授粉效率的方式。

摘要： 本发明公开了一种干酪乳杆菌的低温驯化及其制备低温发酵乳的方法，低温驯化方法为按从低至高的温度梯度进行逐级驯化，使干酪乳杆菌在18～25°C正常生长；用其制备的低温发酵乳，为发酵基料和低温驯化的干酪乳杆菌混合发酵制备，包括配料、均质杀菌、接种和低温发酵、翻缸冷却、罐装和冷藏后熟，即得到低温发酵乳成品。本发明的优点是低温驯化的干酪乳杆菌抗逆性增强，生物酶活性提高，用其制备低温发酵乳，活菌数量增加缓慢，延长对数期和稳定期，提高次级代谢产物的积累，增加不饱和脂肪酸含量，提高营养价值，改善质地和风味；降低了生产的热能成本；保留了发酵乳成品的肠道益生功能和其他营养成分的营养功能。

摘要： 本发明公开了一种乳双歧杆菌的低温驯化及其制备低温发酵乳的方法，低温驯化方法为按从低至高的温度梯度进行逐级驯化，使乳双歧杆菌在18～25°C正常生长；用其制备的低温发酵乳，为发酵基料和低温驯化的乳双歧杆菌混合发酵制备，包括配料、均质杀菌、接种和低温发酵、翻缸冷却、罐装和冷藏后熟，即得到低温发酵乳成品。本发明的优点是低温驯化的乳双歧杆菌抗逆性增强，生物酶活性提高，用其制备低温发酵乳，活菌数量增加缓慢，延长对数期和稳定期，提高次级代谢产物的积累，增加不饱和脂肪酸含量，提高营养价值，改善质地和风味；降低了生产的热能成本；保留了发酵乳成品的肠道益生功能和其他营养成分的营养功能。

摘要： 本发明公开了一种鼠李糖乳杆菌的低温驯化及其制备低温发酵乳的方法，低温驯化方法为按从低至高的温度梯度进行逐级驯化，使鼠李糖乳杆菌在18～25°C正常生长；用其制备的低温发酵乳，为发酵基料和低温驯化的鼠李糖乳杆菌混合发酵制备，包括配料、均质杀菌、接种和低温发酵、翻缸冷却、罐装和冷藏后熟，即得到低温发酵乳成品。本发明的优点是低温驯化的鼠李糖乳杆菌抗逆性增强，生物酶活性提高，用其制备低温发酵乳，活菌数量增加缓慢，延长对数期和稳定期，提高次级代谢产物的积累，增加不饱和脂肪酸含量，提高营养价值，改善质地和风味；降低了生产的热能成本；保留了发酵乳成品的肠道益生功能和其他营养成分的营养功能。

摘要： 本发明公开了一种罗伊氏乳杆菌的低温驯化及其制备低温发酵乳的方法，低温驯化方法为按从高至低的温度梯度进行逐级驯化，使罗伊氏乳杆菌在20～25°C正常生长；用其制备的低温发酵乳，为发酵基料和低温驯化的罗伊氏乳杆菌混合发酵制备，包括配料、均质杀菌、接种和低温发酵、搅拌冷却、罐装和冷藏后熟，即得到低温发酵乳成品。本发明的优点是低温驯化的罗伊氏乳杆菌抗逆性增强，生物酶活性提高，用其制备低温发酵乳，活菌数量增加缓慢，延长对数期和稳定期，提高次级代谢产物的积累，增加不饱和脂肪酸含量，提高营养价值，改善质地和风味；降低了生产的热能成本；保留了发酵乳成品的肠道益生功能和其他营养成分的营养功能。

摘要： 本发明公开了一种低温驯化昆虫为早春作物授粉方法，待大头金蝇成虫性成熟交配后产卵，卵孵化为幼虫，大头金蝇初孵幼虫放于气候箱中进行低温驯化环境的饲养，气候箱温度为15‑25摄氏度，大头金蝇初孵幼虫在气候箱养至初羽化成虫，将大棚分为多厢，每厢内种植油菜父本和油菜母本，大头金蝇释放授粉，本发明将大头金蝇进行低温驯化，提高其耐寒能力与低温活动能力，再释放到大棚，为农业生产提供一种崭新的提高昆虫早春授粉效率的方式。

摘要： 本发明公开了一种分段式低温驯化提高辣椒幼苗耐寒性的方法，属于农业栽培技术领域，包括辣椒种子萌发低温驯化，辣椒幼苗1叶期低温驯化,辣椒幼苗3叶期低温驯化,辣椒幼苗5叶期低温驯化,每一阶段的循环操作都包括20‑25°C24小时‑‑‑‑>15‑20°C24小时‑‑‑‑>10‑15°C48小时‑‑‑‑>15‑20°C24小时‑‑‑‑>20‑25°C24小时‑‑‑>28°C恒温箱中保育3天左右；给予光照，光照强度30μmol·m‑2·S‑1，光照时间10小时，即可大田定植；本发明可有效提高辣椒幼苗耐寒性，提高幼苗的成活率，降低育苗成本。

摘要： 本发明提供一种百香果北方低温驯化方法，包括获取百香果扦插幼苗、第二年春季移栽、第二年夏季扦插、第二年越冬、第三年春季移栽、第三年夏季扦插，以及第三年越冬的驯化步骤。百香果苗在扦插当年，经过在北方温室越冬，百香果苗成活率较低；经本发明的特定驯化方法，第二年越冬，百香果苗的成活率大大提高；第三年越冬百香果的成活率显著提高。

摘要： 本申请公开了一种自动化控制的低温驯化富集培养装置，包括反应系统、执行系统和控温系统，反应系统包括培养瓶组、原料储藏瓶、废弃物收集瓶，执行系统包括可编程自动化控制的蠕动泵组和管线，蠕动泵组分为进样蠕动泵和出样蠕动泵，控温系统包括恒温磁力搅拌水浴锅和低温储藏柜，恒温磁力搅拌水浴锅上设置有恒温水浴锅。本申请结构合理，通过设定蠕动泵参数可实现培养基和培养物的定时、定量、自动地添加和移出，可以节省人力成本，可以有效的防止培养体系污染杂菌，将反应系统和执行系统放置于低温冷藏柜中，可实现培养基预冷和低温培养驯化，将反应瓶置于恒温磁力水浴锅中，进一步保证温控的准确性。