低温保存

摘要： 从种子低温保存技术方法、影响因素、生理调控及应答策略、分子调控机制等方面综述了目前植物种子低温保存研究进展,并对种质资源低温保存技术的应用潜力进行展望,提出了植物种子低温保存的研究发展方向及建议,旨在加强植物种子安全合理保存.

摘要： 在红细胞低温保存中,海藻糖被认为是能够替代甘油的生物相容性保护剂,而海藻糖难以进入红细胞内提供保护。归纳了使海藻糖加载至红细胞内的各种方法,包括孵育法、渗透休克法、脂质体法等,详细介绍了每种方法的原理、载入效果及优缺点。最后得出温和且不生成膜孔的加载方案具有一定的优越性,也可以尝试多种方法联用以提高加载效率和保护效果,并对未来红细胞低温保存的发展趋势进行了展望。

摘要： 低温冷冻保存是细胞治疗、辅助生殖等生物医学应用的使能技术之一。冷冻和复苏过程中,胞内外冰晶的形成和生长会对细胞产生损伤;其中,升降温速率又与冰晶的形成、生长有密切关系。本文在阐述程序化慢速冷冻和玻璃化快速冷冻两种细胞冻存方式及冷冻损伤两因素假说的基础上,对细胞特性、细胞外环境和升降温策略三个影响细胞冻存效果的要素进行分析,从细胞层面、细胞外环境层面和升降温策略及载体设备层面对目前细胞冻存优化技术及设备进行分类,重点梳理了细胞冻存优化在升降温策略及载体设备层面的进展,并总结了优化细胞冻存的挑战与前景。

摘要： 为研究添加不同浓度恩诺沙星的昆仑Ⅰ号稀释液对低温保存绵羊精液效果的影响。试验通过添加5组不同浓度(E0组:0μg/mL;E25组:25μg/mL;E50组:50μg/mL;E75组:75μg/mL;E100组:100μg/mL)的恩诺沙星于昆仑Ⅰ号稀释液中,将绵羊精液稀释后低温保存,分别在第0 d、2 d、4 d、6 d、8 d、10 d、12 d检测精子活力、顶体完整率及细菌数。结果显示:E75组稀释液低温保存绵羊精液精子活力从第8 d开始极显著高于其余4组(P0.05),而E0组精子顶体完整率从第6 d开始显著低于其余4组(P<0.05)。E0组精液细菌数从第4 d开始极显著高于其余4组(P<0.01),但5组精液的细菌数均在国家标准范围内。由此可见,昆仑Ⅰ号稀释液中添加75μg/mL恩诺沙星低温保存绵羊精液效果较优,添加50μg/mL恩诺沙星效果次之,两组均能达到长效保存绵羊精液的效果。

摘要： 1发病情况2016年以来,双江全县范围内牛流行热病发生,呈地方性流行。据不完全统计,全县黄牛发病1231头,因此病和继发其他疾病病死51头。2病原牛流行热病毒又名牛暂时热病毒,属弹状病毒科,暂时热病毒属。病毒对酸、碱、热敏感,温度60°C、pH值9.0,数十分钟内可灭活,对乙醚、氯仿等敏感。但在温度低于-20°C环境下低温保存,可长期保持毒力。

摘要： 卵巢组织冷冻和移植在女性生育力保存中具有重要作用,但卵巢组织冷冻和移植过程会导致大量卵泡凋亡,缩短了移植物存活时间,严重影响卵巢组织移植后生殖内分泌功能的维持时间,从而限制了卵巢组织冷冻和移植技术的临床应用。卵巢组织移植后早期经历缺血缺氧及再灌注损伤,是造成卵泡大量凋亡的重要因素。因此,卵巢组织移植后尽快促进血管生成,恢复血供,减轻氧化应激,降低缺血再灌注损伤是移植成功的关键。本文综述在卵巢组织冷冻和移植过程中,添加凋亡抑制剂、促血管生成因子、抗氧化剂,应用干细胞、中药以及联合治疗,是否能促进移植组织血管生成,减轻局部氧化应激及炎症反应,抑制卵泡凋亡,改善冻融卵巢组织移植存活率,为卵巢组织冷冻和移植技术临床应用提供依据。

摘要： 为探究白藜芦醇、绿原酸对新疆驴精液低温保存效果的影响,本实验在自配稀释液中分别加入白藜芦醇(0、25、50、100、200μmol/L)、绿原酸(0、0.03、0.06、0.09、0.12 g/L),检测精子在此环境下的精子活率、质膜完整性、顶体完整性和超氧化物歧化酶(SOD)活性等指标。结果表明:随着低温保存时间的延长,100μmol/L白藜芦醇组的精子活率、质膜完整性和顶体完整性高于0μmol/L白藜芦醇组(P<0.05),SOD活性提高(P<0.05);0.06 g/L绿原酸组的精子活率、质膜完整性和顶体完整性显著高于0 g/L绿原酸组(P<0.05),SOD活性提高(P<0.05)。因此,精液稀释液中分别添加100μmol/L白藜芦醇、0.06g/L绿原酸能够显著改善精子质量,提高新疆驴精液的低温保存效果。

摘要： 目的:探讨全胚冷冻后立即移植与延迟移植2种策略对冻融胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer,FET)妊娠结局的影响。方法:回顾性分析2019年6月—2021年3月全胚冷冻后FET治疗患者的临床资料,按移植时机分为取卵后第1次月经来潮进行内膜准备(立即移植组,216例)和取卵后第2次月经来潮进行内膜准备(延迟移植组,1315例),按照样本量1∶2进行倾向性评分匹配,最终纳入研究的2组样本量分别为206例和377例。比较2组一般情况及妊娠结局。结果:2组一般情况比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。2组种植率、临床妊娠率、持续妊娠率和活产率比较差异无统计学意义(P>0.05),立即移植组早期流产率高于延迟移植组,差异有统计学意义(22.0%vs.11.5%,P=0.009)。二元Logistic回归校正混杂因素后,2组早期流产率比较差异有统计学意义(aOR=2.094,95%CI:1.138~3.852,P=0.018)。结论:全胚冷冻后立即FET患者的早期流产风险增加,但活产结局与延迟FET类似,该策略可以缩短到达妊娠时间,减少患者精神及心理压力。

摘要： 基于液氮喷雾技术,采用欧拉-拉格朗日方法探讨液氮喷雾冷却冷冻对载体的流动和传热特性的影响,分析相关参数对其表面换热特性的规律。结果表明,液氮喷雾冷却的降温速率可达51777.43 K/min;在一定条件下,随着质量流量(0.0006~0.0008 kg/s)的增加,液膜厚度增加,冷却速率随之增加;随着喷射速度(18~27 m/s)的增加,喷射高度(10~18 mm)逐渐降低,液膜水平流速逐渐增加,从而提高了冷却速率。

摘要： 卵巢组织冻存和移植在技术上可行,有效性也随着技术发展而提高,可用于女性生育力保存,尤其是青春期前放化疗的患癌女性的生育能力保存。玻璃化冷冻被认为是目前最有潜力的卵巢组织冻存方法之一,但其安全性和有效性尚需进一步验证。冷冻损伤及移植缺血再灌注损伤是卵巢冻存和移植中需要克服的难题,如何尽可能有效地保存卵泡是难点及重点。从冷冻保护剂、卵巢组织大小、冷冻载体、抗氧化剂、促进新血管形成和激素6个方面对目前已有的玻璃化冷冻及移植条件、效果等进行了阐述,有益于女性生育力保存的项目推进。

摘要： 为丰富猪鲜精保存技术,改善和提高精液在保存、运输过程中质量.本试验在前期猪精液低温保存研究基础上,通过大量试验筛选,整合,研发了性能稳定的猪精液4°C高效保存稀释粉.试验分为3组,试验组为研发的低温一号和低温二号,对照组为国内某著名品牌且市场占有率极高、能耐受4°C低温的长效稀释粉.研究表明,在有效保存时间和总存活时间上,低温一号和低温二号组均显著高于对照组(P＜0.05);其中,在长白种猪精液有效保存时间以及杜洛克、大白种猪精液总存活时间上,低温一号显著高于低温二号(P＜0.05).在保存前5天,试验组和对照组精子活力差异不显著,但保存至第6天,对照组精子活力显著降低(82.5±0.73VS81.7±0.68VS71.3±0.61,P＜0.05);保存至第10天,低温一号、二号与对照组3组中精子活力分别为(74.6±0.58VS76.0±0.42VS0);在pH值方面,试验第1天,3组溶液的pH值均在6.8左右,在保存第7天,对照组pH值已表现出明显降低,到保存第10天时,对照组pH值已显著低于低温一号和低温二号试验组(5.86±1.49VS6.68±2.21VS6.42±0.66,P＜0.05),保存到第14天,低温一号和低温二号组的pH值分别为6.48±1.44和6.40±0.66,差异不显著(对照组第10天精子已抛弃,所以无第14天检测结果).此外,低温一号和低温二号对精子质膜完整性也具有较好的保护作用.在精液保存的第5天开始,实验组中质膜完整性已显著高于对照组(P＜0.05),到第10天时,低温一号和低温二号试验组精子质膜完整性仍显著高于对照组.

摘要： 样本的采集、处理和保存都对样本的质量有着重要的影响，本文对冷冻保存这一过程对样本的影响进行了综述，期望能够为低温保存技术在生物样本库的应用提供理论参考。细胞是一个复杂的生命体系，冷冻对其功能与结构造成的影响是相互关联的，也与各种生物大分子的结构和含量变化有着不可分割的联系。在生物样本库中合理使用冷冻保存技术，并对保护剂配方及保存方法进行优化，将对保证样本质量，推动生物医学的发展起到重要作用。

摘要： 目的:探讨低温保存对围产期间充质干细胞(Perinatal mesenchymal stem cells,MSCs)体外培养的生物学特性和分化潜能的影响. 方法:分离、培养围产期间充质干细胞,取第3代细胞于液氮深低温保存后复苏.CCK-8法测定增殖活性;β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色检测细胞衰老;流式细胞术分析细胞表面标志CD44、CD90和CD105;碱性磷酸酶和油红O染色检测成骨和脂肪分化潜能.未经低温保存的第3代P-MSCs作为对照. 结果:低温保存的P-MSCs增殖活性、衰老率与未冻存细胞相比较无统计学差异(P＞0.05).低温保存的P-MSCs表达间充质干细胞的表面标志,且能够向成骨和脂肪相比分化. 结论:低温保存对间充质干细胞体外生长特性和分化潜能无影响.

摘要： 虽然精液保存是保存种公畜繁殖力的一项技术,但这对于性成熟前的种公畜不起作用.在养殖家畜过程中,通过遗传力评估等各项育种措施筛选出的优秀后备种公畜,如果在性成熟前受到了化学、物理、疾病等因素的伤害而面临淘汰,怎么保存其优秀的繁殖力呢,针对这种情况,本文介绍一种保存家畜繁殖力的新技术，主要涉及睾丸组织低温保存技术等.

摘要： 卵巢早衰(prematureovarianfailure,POF)通常是指女性40岁之前闭经,伴随持续的卵泡刺激素水平升高和雌激素水平下降等内分泌异常.该概念由Keettel1964年首先提出.此外,也有文献将其称为原发性卵巢功能不全(Primary ovarian insufficiency,POI)或过早绝经(Premature menopause)等.卵巢功能早衰的病因众多，涉及遗传、自身免疫、感染、物理及化学损伤和不明原因等多种因素，其中不明原因POF又称特发性POF (IdiopathicPOF)。由于POF的病因多而复杂，其中特发性POF的病因不明，难以病因治疗，多数患者只能对症处理。随着低温保存技术的提高和不断完善，不少生殖中心能够采用低温技术(如玻璃化冷冻技术)对卵巢组织、卵子和胚胎进行保存，以保留女性的生育力。另外，有研究发现，对卵巢组织切成小片处理后，可以通过干扰卵巢内的Hippo信号通路，刺激卵泡的生长。

摘要： 姜是生活中必不可少的食品,不仅是生活中重要的调味品,也是中药中的一种.姜同时也被人们做成了各种食品,如姜糖等.姜独有的味道,又让很多人望而却步,养生姜片却将此味道很好的除去,又不失其营养价值.该研究经对其各种营养成分进行了系统的分析研究,从理论上揭示养生姜片是一种药食兼用食物.具有应有的色泽;具有应有的香味，无不良气味;无异味;具有产品应有的规格、厚薄均匀，无杂质，卤汁无混浊;具有产品特有的脆、嫩质地。养生姜片属于低温保存泡姜，研究表明，低温保存的泡姜品质远远优于杀菌常温保存的泡姜品质.

摘要： 为了发现磁场对溶液冷冻过程中冰晶形态的作用机理,本文采用亥姆霍兹线圈产生匀强磁场,研究了弱直流磁场对去离子水以及4种不同质量分数的蔗糖溶液(ω1=2％,ω2=5％,ω3=8％,ω4=10％)冻结过程中冰晶形态的影响.实验发现弱直流磁场对去离子水和蔗糖溶液中冰晶生长有一定的抑制作用,该实验结果可以为磁场应用于生物组织低温保存提供有效的指导.

摘要： 目的：分析在低于体温条件下保存的血小板酶促荧光反应活性(EFRA)的变化规律,研究其与血小板体外聚集活性与低渗休克反应(HSR)的相关性. 方法：采用CMFDA分子探针结合流式细胞术,分析血小板EFRA在22°C±2°C保存7天的变化规律;采用比浊法分析血小板聚集活性在22°C±2°C保存7天的变化;采用透光率法分析血小板的HSR在22°C±2°C保存7天的变化. 结果：结果表明,新鲜血小板的EFRA为295.30±45.28,保存第1天为292.2±37.27,保存5天时降至157.9±53.6,两者之间差异显著(P＜0.05);血小板EFRA在7天保存期内的变化趋势与ADP诱导的聚集活性变化成正相关,相关系数r=0.9578;与血小板HSR的变化成正相关,相关系数r=0.9156. 结论：实验结果提示,血小板EFRA与血小板体外功能密切相关,EFRA有可能作为血小板质量监测指标来指导血小板低温保存研究.

摘要： 在卵母细胞的低温保存过程中,高浓度冷冻保护剂的添加和洗脱是一个必不可少的步骤.但冷冻保护剂的添加与洗脱过程会对细胞造成渗透损伤和毒性损伤.为了优化冷冻保护剂的添加过程与洗脱过程,减小细胞损伤,本研究对猪MⅡ期卵母细胞进行冷冻保护剂的添加和去除,考察了细胞冷冻/解冻液的渗透压对细胞存活率的影响,与此同时,讨论了卵母细胞在冷冻液、溶解液中的暴露时间和溶解液浓度对细胞存活率的影响.结果表明:在冷冻保护剂添加和洗脱过程中,冷冻/解冻液间的渗透压差是导致细胞损伤的重要因素,卵母细胞从玻璃化溶液VS2中转移至溶解液中,细胞的存活率会显著减小;当细胞在冷冻液VS2中平衡30s时,转移至1mol/L的溶解液中平衡120s,细胞的存活率显著高于其他组,可以达到80.6％;细胞在冷冻液VS2中暴露不同的时间,需要选择不同浓度的溶解液,也充分说明了卵母细胞的溶解过程与保护剂加载过程是相关的.

摘要： 降温速率是决定细胞低温保存效果的关键,而冷冻载体的形式和使用方式对细胞的降温速率有重要影响.使用数字示波器、线径80μm的T型热电偶建立起高速测温系统,研究了一种新型封闭式卵母细胞冷冻载体以不同的方式从空气插入液氮的降温速率,结果发现载体的降温主要通过对流换热实现;载体横卧时,载体的气孔方向与液氮垂直时降温速率高于气孔与液氮相切时的降温速率;将载体直接插入液氮时的降温速度大于插入后左右摆动的操作方法的降温速率;当采用载体倒置插入时,降温速度高于采用载体正置和横卧的降温速率.当采用载体倒置直接插入时,其降温速率最高,可以达到54572±1338K/min,有利于卵母细胞的玻璃化保存.

摘要： 本发明提出了一种抽屉单元、低温保存箱，包括沿滑道伸缩的抽屉和可翻转的异形连杆，异形连杆靠近滑道外侧的一端设有卡勾，靠近滑道内侧的一端设有推杆；异形连杆内向翻转时，通过卡勾限制抽屉外移；异形连杆外向翻转时，通过推杆推动抽屉外移；抽屉外部设置有与卡勾和推杆配合的限位块；抽屉单元还设有驱动异形连杆翻转的驱动机构；本发明还提出了该低温保存箱控制方法；抽屉单元设有一件多用的异形连杆，既可锁住抽屉，又可以在解锁时将抽屉推出一段距离，起到提示位置和破除结冰障碍的作用；抽屉安装在阻尼导轨上，可以防止冻存抽屉快速抽出，导致样本受损。

摘要： 本发明提供了一种橡胶树胚性愈伤组织的低温保存培养基及其低温方法，属于组织培养技术领域。所述低温保存培养基通过添加外源抗氧化剂L‑谷氨酰胺、抗氧化型维生素VC以及外源激素水杨酸；激发内源抗氧化酶谷胱甘肽还原酶GR作用以维持细胞内高比例的GSH/GSSG以及GR参与植物体内清除ROS关键途径抗坏血酸谷胱甘肽循环AsA‑GSH，辅以其他抗氧化酶，协同有效清除低温保存下的胚性愈伤组织内多余的ROS，以提高胚性愈伤组织抗低温胁迫能力。经低温保存培养基保存的胚性愈伤组织的愈伤组织存活率与对照25±2°C暗培养条件下的胚性愈伤组织相比无显著差异，且FDA荧光检测表明经低温保存的胚性愈伤组织细胞活力维持更强。

摘要： 本发明公开了一种海伦兜兰原球茎的低温保存培养基及低温保存繁殖方法。它是将无菌播种获得的原球茎转移至低温保存培养基中，在合适的条件下培养，然后将低温保存的原球茎转移至恢复生长培养基中，在合适的条件下，恢复生长分化出小苗，经生根壮苗培养获得完整植株。本发明的方法具有保存成本低、操作简单、植物材料复苏快、生活力高等优点，在需要进行种苗的大规模生产时，能在短期内获得大量的试管苗，对于解决快繁生产急用及种质资源的保存也均具有极其重要的价值。

摘要： 本发明公开了一种用于超低温保存箱的照明系统和超低温保存箱，涉及超低温保存箱技术领域，解决了现有技术中将照明系统安装在超低温冷冻储存箱箱体上方的发泡层中，使得发泡层厚度减小，影响箱体保温效果的问题。本发明用于超低温保存箱的照明系统包括照明组件，照明组件设置于超低温保存箱门体的外表面，照明组件具有伸展状态和折叠状态，处于伸展状态的照明组件打开并伸展，为超低温保存箱的箱内照明，处于折叠状态的照明组件关闭并折叠至门体的外表面。该照明系统通过照明组件可为箱内提供照明，方便用户存取物品，并且不会影响超低温保存箱的保温效果；无需照明时，将照明组件关闭并折叠至门体的外表面，可减小照明系统的放置空间。

摘要： 本发明提出了一种抽屉单元、低温保存箱，包括沿滑道伸缩的抽屉和可翻转的异形连杆，异形连杆靠近滑道外侧的一端设有卡勾，靠近滑道内侧的一端设有推杆；异形连杆内向翻转时，通过卡勾限制抽屉外移；异形连杆外向翻转时，通过推杆推动抽屉外移；抽屉外部设置有与卡勾和推杆配合的限位块；抽屉单元还设有驱动异形连杆翻转的驱动机构；本发明还提出了该低温保存箱控制方法；抽屉单元设有一件多用的异形连杆，既可锁住抽屉，又可以在解锁时将抽屉推出一段距离，起到提示位置和破除结冰障碍的作用；抽屉安装在阻尼导轨上，可以防止冻存抽屉快速抽出，导致样本受损。

摘要： 本发明属于农产品超低温保存技术领域，公开了一种大蒜愈伤组织超低温保存的方法及超低温保存设备，取长势好的愈伤组织接进行预培养；用低温保护剂进行装载、脱水、玻璃化；低温保护剂处理后茎尖的复温；低温保护剂处理后茎尖的恢复；将恢复后的愈伤组织接入培养基进行初代培养及扩繁。通过本发明方法，有效提高大蒜组织超低温保存效果，提高了大蒜愈伤组织超低温保存后的成活率：预培养时间2天，加载介质装载时间20分钟，PVS2玻璃化溶液处理15分钟，会使愈伤组织成活率明显提高。本发明的方法可应用于大蒜愈伤组织超低温保存,其操作过程简易，易应用于生产，可用于大蒜种质资源的高效安全保存。

摘要： 本实用新型公开了一种用于超低温保存箱的照明系统和超低温保存箱，涉及超低温保存箱技术领域，解决了现有技术中将照明系统安装在超低温冷冻储存箱箱体上方的发泡层中，使得发泡层厚度减小，影响箱体保温效果的问题。本实用新型用于超低温保存箱的照明系统包括照明组件，照明组件设置于超低温保存箱门体的外表面，照明组件具有伸展状态和折叠状态，处于伸展状态的照明组件打开并伸展，为超低温保存箱的箱内照明，处于折叠状态的照明组件关闭并折叠至门体的外表面。该照明系统通过照明组件可为箱内提供照明，方便用户存取物品，并且不会影响超低温保存箱的保温效果；无需照明时，将照明组件关闭并折叠至门体的外表面，可减小照明系统的放置空间。

摘要： 本实用新型公开了一种适用于保存低温保存药物的低温转运箱，其特征在于，包括：箱体、箱门、箱体后盖、第一抽屉、第二抽屉、压缩机、冷凝器、节流装置、蒸发器、蓄电池、plc控制单元；箱门、箱体后盖分别活动连接在箱体的两侧，第一抽屉、第二抽屉分别可拆卸的连接在箱体内腔的上部、下部，压缩机、冷凝器、节流装置、蒸发器、蓄电池、plc控制单元固定连接在箱体后部；该转运箱为促排卵药物的运输提供了一个恒温转运装置，无需再借用冰包转运，避免了原先冰包转运的温度不稳定性，提高了低温保存药物运输的质量，确保此类药物不会因为温度变化而使药性丧失；转运箱配备内置电源，便于装置搬运过程中持续工作，转运箱顶部设有提手，便于搬运装置。

摘要： 本实用新型公开了一种低温保存箱的出风口化霜结构及低温保存箱，在出风口处设置加热管，加热管的进口与压缩机的出口连通，加热管的出口与蒸发器的进口或压缩机的进口连通。压缩机排出的高温高压蒸汽在加热管中流通，从而实现对出风口的化霜。同时，充分利用压缩机排出的热量，不需要额外增加能源供给，有利于降低能耗，并且安全可靠。

摘要： 本实用新型提供了一种低温保存箱门锁紧结构及低温保存箱，所述锁紧结构包括锁鼻轴、安装板以及手把：所述锁鼻轴固定于低温保存箱的箱体，所述安装板固定于低温保存箱的门体并设有转轴、第一锁舌眼，所述手把通过所述转轴转动连接于所述安装板，且所述手把设有与所述锁鼻轴配合的渐开线形轨道槽以及与所述第一锁舌眼配合的机械锁，所述锁鼻轴沿所述轨道槽移动由其开口端移至内端时，所述锁鼻轴、转轴之间距离渐小。本实用新型低温保存箱门锁紧结构可有效解决现有低温保存箱关门不顺畅以及不具备防盗功能的问题。