EV71病毒

摘要： 目的 调研在我疾控中心预防接种门诊服务范围内儿童的家长对于肠道病毒71型灭活疫苗的接种意愿度调查,分析儿童接种肠道病毒71型灭活疫苗的影响因素和不愿意接种的具体原因,为肠道病毒71型灭活疫苗接种率的提高提供有科学依据的参考意见和推广方向。方法 选取2019年1月至2019年12月100例在我疾控中心预防接种门诊接受肠道病毒71型灭活疫苗接种的儿童家长作为主要的调研对象,通过调查问卷的方式,引导调查对象进行问卷的填写和回收工作,分析肠道病毒71型灭活疫苗接种的意愿及其相关影响因素。结果 共发放100份调查问卷,回收100份调查问卷,其中主观愿意接受肠道病毒71型灭活疫苗的儿童或家长有80人(80%)。城市中家长关于主观愿意接种肠道病毒71型灭活疫苗的有40人(80%)高于农村家长主观愿意接种肠道病毒71型灭活疫苗的有25人(50%),P <0.05;父母主观愿意接种率高于其他关系的儿童家长(P <0.05);散居儿童家长的主观愿意接种率高于其他托育儿童家长(P <0.05);随着家长学历的升高,主观愿意接种率也有所升高,P <0.05;既往未患手足口病儿童的家长主观愿意接种率高于既往患有手足口病儿童的家长,P <0.05;从事医疗相关行业,且主观上愿意了解手足口病相关知识、接受过肠道病毒71型灭活疫苗科普讲座的家长主观愿意接种率高于其他家长(P <0.05);采用多因素分析法,Logistic回归分析后,对于20~30岁和30~40岁的家长在主观接种意愿层面的保护因素(P=0.043,OR=0.379,95%CI为0.149-0.966),主动了解手足口病(P <0.01,OR=16.234,95%CI为6.366-41.411),行为养成(P=0.043,OR=2.658,95%CI为1.026-6.871),知识知晓(P=0.037,OR=2.744,95%CI为1.071-7.037)是主要影响家长关于肠道病毒71型灭活疫苗是否主观愿意接种的因素。在20名非主观愿意接种肠道病毒71型灭活疫苗的家长中,5名(25%)家长是由于价格问题,7名(35%)家长是由于担心疫苗的安全性因素主观不愿意接种,9名(45%)家长是由于担心疫苗达不到效果的问题主观不愿意进行接种,4名(20%)家长认为接种疫苗没必要而产生的主观不愿意进行接种。结论 75%的家长都愿意及时的让孩子接种肠道病毒71型灭活疫苗,针对家长接种疫苗的相关影响因素开展相应的疫苗推广活动,能够在一定程度上提升肠道病毒71型灭活疫苗的接种率。

摘要： [目的]构建EV71病毒3C蛋白的真核表达载体,并验证其在细胞中的正确表达.[方法]采用RT-PCR技术,从EV71病毒基因组RNA中扩增3C基因,克隆到真核表达载体pcDNA3.0-Flag上,并转染HeLa细胞,通过Western blot和免疫荧光验证3C蛋白的表达.[结果]酶切及测序鉴定显示,EV71病毒3C真核表达载体构建成功.Western blot和免疫荧光结果证实3C蛋白在HeLa细胞中成功表达.[结论]该研究成功构建了真核表达载体pcDNA3.0-Flag-3C,为进一步研究EV71病毒3C蛋白生物学功能奠定了一定基础.%[Objective]To construct the eukaryotic expression vector of EV71 3C protein and investigate its expression in HeLa cells.[Method] Fragment of 3C was amplified from total RNA of EV71 genome and cloned into eukaryotic expression vector pcDNA3.0-Flag.After the recombi-nation vector was transfected into HeLa cells,Western blot and indirect immunofluorescent assay were performed to confirm the 3C protein expres-sion.[Result]Enzyme digestion and sequencing analysis showed that eukaryotic expression vector pcDNA3.0-Flag-3C was constructed cor-rectly.The results of Western blot and indirect immunofluorescent indicated 3C protein was expressed in HeLa cells.[Conclusion]This research successfully constructed eukaryotic expression vector pcDNA3.0-Flag-3C,which might provide the foundation of research about the biological function of EV71 3C protein.

摘要： 目的 探讨肠道病毒71(EV71)与肺炎支原体(MP)二重感染对手足口病患儿细胞免疫和体液免疫的影响.方法 选取该院PICU重症手足口病患儿120例为研究对象,根据是否感染EV71和MP,将研究对象分为甲组31例、乙组34例、丙组28例、丁组27例,选取同期30例健康患儿为对照组,比较各组血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值、白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)、IgA、IgG、IgM的不同表达水平,比较4组手足口病重症危重型发病率.结果 ①4组手足口病与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+比值、IgA、IgG、IgM低于对照组,CD8+、IL-6、IL-10高于对照组;②4组手足口病比较,差异有统计学意义(P<0.05),血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+比值、IgA、IgG、IgM水平,丁组至甲组依次降低,CD8+、IL-6、IL-10,丁组至甲组依次升高;③各组手足口病重症危重型发病率差异有统计学意义(P<0.001),甲组至丁组重症危重型发病率依次降低.结论 EV71病毒与肺炎支原体二重感染致手足口病患儿细胞免疫及体液免疫均降低.

摘要： 目的 探讨EV71病毒感染手足口病(HFMD)患儿免疫指标水平变化及其临床意义.方法 选取本院2012年2月-2015年12月收治的82例HFMD患儿进行研究,根据病《手足口病诊治指南》中的标准分为轻症组61例、重症组21例,另选30例健康儿童作为对照组,检测三组的细胞免疫学指标、体液免疫学指标并进行组间比较.结果 重症组、轻症组的CD3+、CD4+、NK细胞比例均显著的低于对照组(P0.05).结论 EV71病毒感染HFMD患儿多存在显著的免疫功能紊乱,表现为患儿的细胞免疫水平降低、体液免疫反应增强.

摘要： 肠道病毒71 型(enterovims 71，EV71)是手足口病的主要病原体，由于尚无有效治疗手足口病的药物，因此，开发预防手足口病的有效EV71疫苗成为控制手足口病的首选。目前，EV71 疫苗研究已取得一定的进展，正在研发的疫苗包括减毒或灭活疫苗、基因工程亚单位疫苗、DNA 疫苗和病毒痒颗粒。虽然各种疫苗均具有一定的免疫效果，但最适疫苗的确认还需对各种疫苗的安全性和保护效力进行评估。

摘要： 目的 研究肠道病毒类型与手足口病患儿病情发展的相关性.方法 选取我院收治的136例手足口病患儿,根据患儿病情分为A组(普通组,38例)、B组(重型组,59例)及C组(危重型,39例),比较不同发展进程疾病患儿的差异.结果 A组患儿脑脊液WBC计数和脑脊液蛋白含量均低于B组和C组,且C组脑脊液WBC计数显著高于B组(P<0.05).A组通用阳性的占比高于B组和C组,B组和C组患儿EV71病毒占比显著高于A组(P<0.05),且C组患儿EV71的占比显著高于B组(P<0.05),B组CA16病毒占比高于A组和C组(P<0.05).EV71感染患儿持续性发热率高于CA16和通用阳性病毒感染患儿(P<0.05).EV71感染患儿的呕吐、肢体抖动和四肢无力发生率高于其他病毒感染的患儿(P<0.05).结论 肠道病毒的类型与手足口病患儿病情发展密切相关,EV71型患儿更易出现神经受累症状,值得临床重视.

摘要： 目的 观察手足口病死亡病例组织器官病理变化,探讨病理发生机制,为临床诊断、治疗和预防提供科学依据.方法 采集手足口病死亡病例组织、胸腔积液和粪便等标本,实时荧光RT-PCR检测胸腔积液和粪便标本中手足口病病原核酸,并进一步分离病毒,进行基因组测序和序列分析,并对组织标本进行HE染色病理学检查.结果 胸腔积液和粪便标本EV71病毒核酸检测阳性,细胞培养分离到5株EV71毒株,基因型为C4基因亚型;病理组织学检查发现肺、肾脏、胸髓和肝脏组织病理变化.结论 EV71病毒感染是引起手足口病患者死亡的主要原因.

摘要： 目的：研究抗病毒口服液体内抗EV7l病毒作用。方法：10日龄ICR小鼠，随机分为对照组，模型组，利巴韦林组，抗病毒高、中、低剂量组共6组，每组50只。MP10107TCISD50以腹腔注射的方式感染ICR小鼠。小鼠感染后2小时灌胃给药，每日2次，连续5天，模型组给与等体积生理盐水。每日观察小鼠临床症状变化情况，连续观察8天，并根据体重、后肢瘫痪及死亡情况等评分。小鼠感染后第3天，第5天取肌肉组织测定病毒载量。结果：抗病毒口服液改善感染EV71病毒ICR小鼠的临床症状，降低死亡率，显著性降低肌肉组织中病毒载量。结论：抗病毒口服液具有体内抗EV7l病毒作用。

摘要： 目的：研究抗病毒口服液体内抗EV7l病毒作用。方法：10日龄ICR小鼠，随机分为对照组，模型组，利巴韦林组，抗病毒高、中、低剂量组共6组，每组50只。MP10107TCISD50以腹腔注射的方式感染ICR小鼠。小鼠感染后2小时灌胃给药，每日2次，连续5天，模型组给与等体积生理盐水。每日观察小鼠临床症状变化情况，连续观察8天，并根据体重、后肢瘫痪及死亡情况等评分。小鼠感染后第3天，第5天取肌肉组织测定病毒载量。结果：抗病毒口服液改善感染EV71病毒ICR小鼠的临床症状，降低死亡率，显著性降低肌肉组织中病毒载量。结论：抗病毒口服液具有体内抗EV7l病毒作用。

摘要： 目的：研究抗病毒口服液体内抗EV7l病毒作用。方法：10日龄ICR小鼠，随机分为对照组，模型组，利巴韦林组，抗病毒高、中、低剂量组共6组，每组50只。MP10107TCISD50以腹腔注射的方式感染ICR小鼠。小鼠感染后2小时灌胃给药，每日2次，连续5天，模型组给与等体积生理盐水。每日观察小鼠临床症状变化情况，连续观察8天，并根据体重、后肢瘫痪及死亡情况等评分。小鼠感染后第3天，第5天取肌肉组织测定病毒载量。结果：抗病毒口服液改善感染EV71病毒ICR小鼠的临床症状，降低死亡率，显著性降低肌肉组织中病毒载量。结论：抗病毒口服液具有体内抗EV7l病毒作用。

摘要： 目的：研究抗病毒口服液体内抗EV7l病毒作用。方法：10日龄ICR小鼠，随机分为对照组，模型组，利巴韦林组，抗病毒高、中、低剂量组共6组，每组50只。MP10107TCISD50以腹腔注射的方式感染ICR小鼠。小鼠感染后2小时灌胃给药，每日2次，连续5天，模型组给与等体积生理盐水。每日观察小鼠临床症状变化情况，连续观察8天，并根据体重、后肢瘫痪及死亡情况等评分。小鼠感染后第3天，第5天取肌肉组织测定病毒载量。结果：抗病毒口服液改善感染EV71病毒ICR小鼠的临床症状，降低死亡率，显著性降低肌肉组织中病毒载量。结论：抗病毒口服液具有体内抗EV7l病毒作用。

摘要： 本发明提供了一种利用噬菌体表面展示技术筛选获得的人源抗EV71病毒中和性抗体EV71FabL6，其轻链和重链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。该抗体能够特异性识别EV71病毒颗粒抗原，可与EV71病毒发生显著的酶联免疫反应且具有抗EV71病毒感染的中和活性功能。此外，可将本发明的抗体制成预防和治疗手足口病的特异性抗体药物，从而在临床中用于预防和治疗由EV71病毒引起的手足口病。

摘要： 本发明提供了一种利用噬菌体表面展示技术筛选获得的人源抗EV71病毒中和性抗体EV71FabK7，其轻链和重链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。该抗体能够特异性识别EV71病毒颗粒抗原，可与EV71病毒发生显著的酶联免疫反应且具有抗EV71病毒感染的中和活性功能。此外，可将本发明的抗体制成预防和治疗手足口病的特异性抗体药物，从而在临床中用于预防和治疗由EV71病毒引起的手足口病。

摘要： 本发明提供了一种利用噬菌体表面展示技术筛选获得的人源抗EV71病毒中和性抗体EV71FabL4，其轻链和重链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。该抗体能够特异性识别EV71病毒颗粒抗原，可与EV71病毒发生显著的酶联免疫反应且具有抗EV71病毒感染的中和活性功能。此外，可将本发明的抗体制成预防和治疗手足口病的特异性抗体药物，从而在临床中用于预防和治疗由EV71病毒引起的手足口病。

摘要： 本发明提供了一种利用噬菌体表面展示技术筛选获得的人源抗EV71病毒中和性抗体EV71FabL11，其轻链和重链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。该抗体能够特异性识别EV71病毒颗粒抗原，可与EV71病毒发生显著的酶联免疫反应且具有抗EV71病毒感染的中和活性功能。此外，可将本发明的抗体制成预防和治疗手足口病的特异性抗体药物，从而在临床中用于预防和治疗由EV71病毒引起的手足口病。

摘要： 本发明公开了一种白血病病毒混合感染中单一病毒的纯化方法，通过测定混合感染病毒的TCID50进行终点稀释，采用稀释后的病毒液接种DF‑1细胞，收集上清与细胞培养物并用分型鉴定引物与IFA的对其进行鉴定，从而获得单一亚型的禽白血病病毒。该法对实验条件要求简单，具有很高的实际应用价值。实验结果证明，本发明可以成功的对不同亚型混合感染的ALV进行纯化，可为禽白血病病毒分子生物学特征及其致病性的研究提供技术支持。

摘要： 本发明公开了一种用于肠道病毒EV‑A和EV‑B的分型和/或检测的引物组合物，包括核苷酸序列如SEQ ID No.1～2所示引物对1，和核苷酸序列如SEQ ID No.3～4所示引物对2。本发明所述的两对肠道病毒特异性引物位于肠道病毒的VP1基因相对保守区域，可在同一管检测反应体系中实现肠道病毒EV‑A和EV‑B的所有血清型的分型鉴定。本发明所述的测序方法简单，应用方便，扩增重复性好。

摘要： 本发明涉及病原检测技术领域，尤其涉及肠道病毒EV71、CA16、EV通用型核酸检测试剂。本发明提供的肠道病毒EV71、CA16、EV通用型核酸检测试剂添加了抗抑制的成分，可以耐受抑制物胆酸盐、血红素的干扰，并且该试剂能够于2～8°C稳定保存，避免了‑20°C冻存的苛刻条件，从而使反应前无需解冻，提高了反应效率。将该试剂制成试剂盒，适用于更多的样本类型，如咽拭子、粪便、疱疹液、肛拭子。该试剂盒通用性引物覆盖更多的血清型，包括柯萨奇A组、B组、肠道病毒71型，埃可病毒。该试剂盒具有良好的灵敏度、特异性、重复性。

摘要： 本发明公开了一株新型的EV71病毒，该病毒株采自贵州地区2012-2014年确诊为手足口病的患儿疱疹液或咽拭子样本，其全基因组长7405bp，碱基序列如SEQ？ID？NO：1所示，该病毒株编码区VP1区共编码297个氨基酸，氨基酸序列如SEQ？ID？NO：2所示。本发明还公开了该EV71病毒在制备EV71疫苗和诊断产品中应用，属于生物医药技术领域。

摘要： 本发明提供了一种利用噬菌体表面展示技术筛选获得的人源抗EV71病毒中和性抗体EV71FabK7，其轻链和重链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。该抗体能够特异性识别EV71病毒颗粒抗原，可与EV71病毒发生显著的酶联免疫反应且具有抗EV71病毒感染的中和活性功能。此外，可将本发明的抗体制成预防和治疗手足口病的特异性抗体药物，从而在临床中用于预防和治疗由EV71病毒引起的手足口病。

摘要： 本发明提供了一种利用噬菌体表面展示技术筛选获得的人源抗EV71病毒中和性抗体EV71FabL11，其轻链和重链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。该抗体能够特异性识别EV71病毒颗粒抗原，可与EV71病毒发生显著的酶联免疫反应且具有抗EV71病毒感染的中和活性功能。此外，可将本发明的抗体制成预防和治疗手足口病的特异性抗体药物，从而在临床中用于预防和治疗由EV71病毒引起的手足口病。